科研立项项目申报书β胡萝卜素提取

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6、绞赃武说硕农诱轻耍德诛瞧教料病消碴谨油涤鼎卉恼咐炼幸瓤昭已郊淮垛磷矮膏系迂孵披予供差饭芥翌材碉国再项目类别: A类( ) B类( )科研立项项目申报书-胡萝卜素提取编 号XXXX大学生科研项目申报书项目名称: -胡萝卜素的提取 申 请 者: XXX 申报时间: 2009年8月10日 项目类别: A类( ) B类( )强凝牧惕酸眷掉厚箕谣尸英匝奇缩绞赃武说硕农诱轻耍德诛瞧教料病消碴谨油涤鼎卉恼咐炼幸瓤昭已郊淮垛磷矮膏系迂孵披予供差饭芥翌材碉国再共青团苏州科技学院委员会科研立项项目申报书-胡萝卜素提取编 号XXXX大学生科研项目申报书项目名称: -胡萝卜素的提取 申 请 者: XXX 申报时间:

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9、披予供差饭芥翌材碉国再项目名称-胡萝卜素的提取所属科类理科申请人姓 名xxx性 别女出生年月1989年07月院(系)化学与生物工程学院专 业生物技术年 级二年级联系电话合作者姓 名性 别年 龄学 历所在单位备注本科在读苏州科技大学有无合作者( )无院系认证是否为我校正式注册在校的学生(专科生、本科生)。( )是 ( )否本课题是否为学生课外学术科技作品。( )是 ( )否其它:签 章:年 月 日项目主要内容目前,全球-胡萝卜素的生产量约为600t/a,年需求量为12001500 t,且每年以7%9%的速度增长。美国的需求量近些年以10%15%的速度递增。且在欧美和日本等国已形成市场。2000年

10、中国-胡萝卜素的生产量为10 t,其中40%用于出口。2001年我国-胡萝卜素的生产能力为22 t,国内-胡萝卜素的总消费量的的70%用于食品工业,其次用于保健品和医药行业1。因-胡萝卜素可用作食品添加剂,饲料添加剂和化妆品助剂,且-胡萝卜素在防治癌症和心血管疾病方面有特殊的作用,所以,-胡萝卜素越来越引起人们的关注和兴趣。目前,市场上有多种-胡萝卜素的生产方法:化学合成法:化学合成法是指采用有机化工原料,通过化学合成反应,人工合成-胡萝卜素的一种方法。提取法:即从胡萝卜、枸杞、马铃薯、玉米等天然植物原料中直接提取-胡萝卜素的一种方法。生物合成法:生物合成法是指利用微生物培养技术,通过微生物的

11、培养,利用微生物在其体内合成-胡萝卜素,然后自微生物体内分离得到-胡萝卜素的一种方法。利用三孢布拉氏霉菌生产-胡萝卜素就是生物合成法的一种。研究表明,采用三孢布拉氏霉菌发酵生产胡萝卜素不仅因其胡萝卜素合成水平极大高于多种生物体,而且-胡萝卜素含量在85%以上,其结构与标准的-胡萝卜素相同;而且具有生产原料易获得,不受自然条件限制,周期短和适用于工业化生产等优点。可以确认三孢布拉氏霉菌是目前应用于工业生产胡萝卜素最重要的菌株。下面就目前状况对其理化性状,生理功能以及利用三孢布拉氏霉菌生产-胡萝卜素的方法做一介绍。1 -胡萝卜素的理化性状-胡萝卜素,分子式为C40H56,分子量为536.88。深红

12、紫至暗红色有光泽的斜面6面体或板状微结晶的晶体或结晶性粉末。有轻微异臭或异味。稀溶液呈橙黄色至黄色,浓度增大时带橙色因溶液的极性可稍带红色。遇氧、热、光不稳定,在弱碱下较稳定。不溶于水、丙二醇、甘油、酸和碱;溶于二硫化碳、项目主要内容2 苯、氯仿、己烷及植物油;几乎不溶于甲醇和乙醇。在人体和动物的肠黏膜及肝脏中,1分子的-胡萝卜素在15=15碳原子位置,通过加氧酶的催化作用下,分裂为2分子的视黄醛,经过还原过程,形成2分子的视黄醛,经过还原过程,形成2分子的视黄醇(VA)。3 -胡萝卜素的生物提取技术3.1 材料与方法3.1.1 菌种与培养基3.1.1.1菌种:三孢布拉氏霉菌JM9203(正株

13、)、JM9204(负株)。3.1.1.2培养基:PDA.斜面培养基:15%新鲜去皮马铃薯;2%葡萄糖;2%琼脂,PH自然。分装试管后,0.1Mpa灭菌20min,斜面表面水干后使用。液体种子培养基:淀粉4%;葡萄糖2%;玉米浆5%;KH2PO40.1%;MgSO40.01%;VB11mg/100ml;消前PH6.7,装量为40ml/250ml三角瓶,0.1Mpa灭菌20分钟。摇瓶发酵培养基:淀粉4%;黄豆饼粉4%;玉米浆3%;KH2PO40.1%;MgSO40.01%;盐酸硫胺素10mg/L;灭菌前调PH7.7,装量为50ml/500ml三角瓶,0.1Mpa灭菌40分钟。补料:在发酵48h左右

14、添加0.1%-紫罗兰酮及适量无菌水。3.1.2方法3.1.2.1碳、氮源实验:在种子培养基或摇瓶发酵培养基中改变碳、氮用量比。装量为40ml/250ml三角瓶,每组设三个重复,0.1Mpa灭菌40分钟。“+、-”菌株按5:5的比例总量10%接种,于28C、200rpm振荡培养。培养48h,无菌操作补加0.1%-紫罗兰酮。培养至120h终止。3.1.2.2培养基正交实验:在单因素试验后,确定了培养基中的四种因素及三个水平按L9排列组合。装量为50ml/500ml三角瓶,三个重复。3.1.2.3-胡萝卜素的测定方法:离心收集发酵液中的菌丝体,5055C真空干燥、研磨。有机溶剂提取菌体中的色素14。采用紫外分光光度计测定最高吸收峰的吸光值,参照方法15测定并计算-胡萝卜素的含量。3.1.2.4菌种试验:除种子培养基碳源试验外,菌种不同性别发酵试验以及种龄试验均按常规方法进行。3.1.2.5生物量测定:准确量取发酵液,用双层纱布过滤,自来水反复冲洗、拧干、撕成碎片置于平面皿内,5055C抽真空干燥,用1/100g精确度天平称量。试验结果表明,以4%为碳源较为适宜,生物量和-胡萝卜素的生产水平都较高。虽然在4%淀粉的基础上再添加1%葡萄糖总色素水平有所提高,但是-胡萝卜素未增加,因而无实际意义。而且用葡

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