细胞工程学笔记汇总

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1、细胞工程学笔记汇总1植物细胞全能性：是指植物个体的每个生活细胞都具有该植物的全套遗传信息， 与合子一样，具备发育成完整植株的潜能。2.细胞全能性：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能3植物细胞全能性表现的条件：离体、营养条件、激素、其它外界条件。4外植体：用于离体培养的植物组织、器官等材料，以及继代培养时转移至新鲜养 基中的材料5. 脱分化：培养条件下使已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生组织的状态称 为“脱分化”6. 愈伤组织：细胞脱分化后经过无数次的细胞分裂形成一团无特定结构和功能的松 散的薄壁细胞团7再分化：在离体条件下，当细胞脱分化以后，无序生长的细胞及愈伤组织要重新 进入有

2、序生长才能再生为个体。8两条器官发生途径（植物细胞分化、脱分化及再分化的过程和关系）：脱分化单倍体性细腕脱分化愈伤组织胚状体金生根、茎、叶、花、果 （种子）（完整植抹）再分化，愈伤组织倍体体细胞脱分化一叽1咖脱分化9植物各器官在离体条件下培养，经脱分化、愈伤组织形成到再分化形成各器官的 过程大致分为： 诱导期（启动期）：细胞分裂的准备期 分裂期：细胞从开始分裂到持续分裂的时期 分化期：从愈伤组织形成到器官发生10.从愈伤组织诱导发生再分化成完整植株时，共有器官发生和胚状体发生两条途 径。器官发生方式：培养条件下的组织或细胞（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等 器官的过程。胚状体发生方式：有些植

3、物的愈伤组织中的薄壁细胞可以直接产生类似于胚的结构。 11胚状体：是指在植物组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发育形成的胚 状结构。又称体细胞胚、不定胚、无性胚。胚状体具两极性。胚状体发育过程：球形期一心形期一鱼雷期一子叶期。12.体细胞胚胎发生途径： 直接从器官外植体发生； 愈伤组织形成； 悬浮培养发生； 单倍体细胞发生； 单倍体细胞发生； 原生质体发生。13. 生长素的作用：主要被用于诱导愈伤组织形成，诱导根的分化和促进细胞分裂、 伸长生长。在促进生长方面，根对生长素最敏感，在极低的浓度下，就可促进根生 长，其次是茎和芽。（IAA、NAA、IBA、2,4-D）细胞分裂素的作用：多用于

4、诱导不定芽的分化和茎、苗的增殖，而在生根培养时使 用较少或用量较低。（6-BA、激动素Kt、玉米素Zt） 在培养基中添加细胞分裂素有三个作用： 诱导芽的分化促进侧芽萌发生长； 促进细胞分裂与扩大； 抑制根的分化。赤霉素类的作用：在器官形成后，可促进器官和胚状体的生长。（ga3）；脱落酸：抑制蛋白质合成，抵消和抑制生长素、细胞分裂素和GA发挥作用。ABA诱 导休眠，促进衰老和脱落。乙烯： 促进果实成熟，促进脱落和衰老等作用14. 生长素/细胞分裂素比例： 高：有利于根的形成和愈伤组织的形成 适中：有利于根、芽分化低：有利于芽的分化15. 培养基的配制包括母液的配制和培养基的配制。16. 在培养过

5、程中，有些细胞可能会分泌活性物质到培养液中，含有细胞分泌物的培 养液又称为条件培养基。17. 植物离体无性繁殖、微型繁殖、快速无性繁殖或快繁，是指利用组织培养方法进 行植物离体培养，在短期内获得大量遗传性一致个体的方法。18. 植物离体无性繁殖中的器官发生方式：（记哪种植物适合哪一型） 不定芽型：具有顶芽和腋芽的短枝 器官型：百合、水仙、贝母等鳞茎、球茎植物；烟草、大蒜、甘蓝的花茎 器官发生型：水稻、小麦、甘蔗的幼嫩花序； 胚状体发生型：甘蔗、胡萝卜、石刁柏； 原球茎型：兰属植物。19. 花药和花粉培养： 指离体培养花药和花粉，使小孢子改变原有的配子体发育途径， 转向孢子体发育途径，形成花粉胚

6、或花粉愈伤组织，最后形成花粉植株，并从中鉴 定出单倍体植株并使之二倍化的细胞工程技术。20. 配子世代： 形成配子并进行繁殖的世代； 孢子世代： 产生孢子进行无性生殖的时代。21. 合子是产生抱子体的第一个原始细胞； 花粉是产生花粉孢子体的第一个原始细胞； 花粉形成花粉胚或花粉愈伤组织的第一次有丝分裂称为花粉抱子体第一次有丝分 裂； 花粉形成花粉植株的途径即花粉抱子体途径22. （花粉）抱子体的第一个原始细胞（相当于受精卵），第一次有丝分裂（称为花粉孢子体第一次有丝分裂）23. 花粉脱分化培养方法：液体培养、双层培养、分步培养（花粉自然散落）、条件 培养基培养 （培养过花药的液体）看护培养、微

7、室培养。24. 密度效应：是指一定的花药接种密度范围内，花药愈伤组织的形成能力，随接种 花药的密度的增加而增加。25. 单倍体植株的鉴定方法：形态鉴定；结实性鉴定；染色体数目鉴定；遗 传标记鉴定。26. 植物胚胎培养： 指将植物胚或具胚器官（如胚乳、子房、胚珠）等在离体条件下 进行无菌培养，并使之发育成植株的技术。27. 植物胚胎培养的应用： 克服远缘杂交的不育性，获稀有杂种植物； 打破种子休眠，提早结实，缩短育种年限； 使生活力低下或无活力的种子萌发； 测定种子生活力； 获得三倍体植株 其它：快速繁殖特殊植物；用于理论研究28. 离体胚形态发生的方式：正常胚胎发育；胚性发育；早熟萌发；产生愈

8、 伤组织。29. 子房试管授粉的方法：直接引入法；注射法30胚珠试管授粉的方法：哺育法；接近法31. 细胞培养： 是指在离体条件下对植物单个细胞或小的细胞团进行培养，并使其增 殖的技术。32. 单细胞分离的方法：机械法：A.用刀片刮叶片；B.叶片研碎离心；酶解法33. 悬浮培养： 悬浮培养是指将游离细胞或细小的细胞 团在液体培养基中进行培 养的方法。悬浮培养的特点： 培养细胞不断增殖、生长速度快、适于生产次生代谢产物； 能大量提供分散性好且较为均匀的细胞； 大规模悬浮培养需要配置大型摇床、连续培养装置、生物反应器等。34. 悬浮培养的类型： 成批培养： 是指细胞接种在一定容积培养基的密封系统中

9、培养，当培养基中主要 营养成分耗尽时，细胞即停止生长，完成培养过程的方法。 连续培养： 指在培养过程中，以不断排出悬浮培养物并注入等量新鲜培养基，使 培养物不断得到养分补充，保持其恒定体积的培养。35. 开放式连续培养系统中保持细胞恒定的方式分为浓度恒定法和化学恒定法。 浓度恒定法： 即选定一种细胞密度，定量测定培养液中的细胞混浊度，通过控制培 养液流入量使悬浮培养浊度恒定。化学恒定法： 是将新鲜培养基的某一种营养液或营养成分调节为生长限制因子浓度， 并以恒定速率输入，从而使细胞增殖保持在一种稳定状态中。36. 植物原生质体培养： 指将植物细胞游离成原生质体，在适宜的培养条件下，依据 细胞的全

10、能性使其再生细胞壁，进行细胞的分裂分化，并发育成完整植株的过程。37. 植物原生质体分离的方法： 机械法：原生质体在高渗盐水中缩成球状后，用利刃机械切割； 酶解法： 果胶酶和纤维素酶处理。适用于自然生长材料的幼嫩叶片；无菌实生苗 子叶和下胚轴；外植体来源的愈伤组织和细胞悬浮培养物；花粉细胞。38. 原生质体活力测定： 形态识别：球形、颜色鲜艳； 相差显微镜法：胞质环流和核完整 酚藏花红染色法：红色为死细胞； 伊凡蓝染色法：不着色的为活细胞； FDA测原生质体活力的原理：发荧光的为活细胞。39影响原生质体数量和活力的因素：供试材料；酶的种类、组合和酶解时间； 渗透压稳定剂；质膜稳定剂；pH；光照

11、和温度40原生质体融合：是指将植物不同种、属甚至科间的原生质体通过人工调控的方法 诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。41原生质体融合的意义：克服杂交不亲和；克服生殖器官败育；克服柑桔多 胚。42. 杂种细胞的筛选中的互补选择法： 营养代谢互补选择法（无激素培养法） 抗性互补选择法（适合大豆的培养基放置在水稻生长温度） 叶绿素缺失突变体互补选择法（白化和杂种细胞增殖的培养基） 两次不同培养条件的培养43. 四种可产生细胞质杂种的途径： 一个正常原生质体与一个去核原生质体； 一个正常原生质体与一个核失活原生质体； 异核体形成后，两个核中有一个核消失； 较晚时期染色体选择性地消失4

12、4. 人工种子：是指将植物离体培养中产生的体细胞胚或能发育成完整植株的分生组 织（芽、愈伤组织、胚状体等）包埋在含有营养物质和具有保护功能的外壳内形成 的在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。45. 目前研制的人工种子的结构包括： 人工体细胞胚（繁殖体）、人工胚乳、人工种 皮。46. 种质： 是决定生物遗传性状，并将遗传信息从亲代传递到子代的遗传物质。47. 种质资源： 携带各种种质的材料。也称为品种资源或遗传资源。48种质资源按保存的地理位置分为：原生境保存（原地保存）；非原生境保存（异地保存、迁地保存）49. 离体保存： 是将植物外植体在无菌的环境中利用组织培养技术进行植物种质资源 保存的方法

13、。50. 最理想的保存方法是使培养物处于不生长或缓慢生长状态。51冷冻处理：快速冷冻；慢速冷冻法；预冷冻法；干燥冷冻。52细胞学说：细胞是有机体，亦是生物体的基本结构单位，由它构成整个生物体。 同时植物细胞又是在生理和发育上具有潜在全能性的功能单位。53培养基模式：激素调控模式：当生长素/细胞分裂素比率高时促进生根，比率低 时则促进芽的分化，比率平衡时则有利于愈伤组织的生长。54. 细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生：病毒可以介导动物细胞的融合； 1975年，乔治克勒等成功地将经过绵羊红细胞免疫的小鼠脾脏细胞与体外培养的 小鼠骨髓瘤细胞融合，并获得了能产生特异性抗绵羊红血球单抗的杂交瘤细胞株

14、。 实现了获得纯净单一抗体的愿望，开创了杂交瘤新技术。55. 单克隆抗体技术：又称为杂交瘤技术： 将产生抗体的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞杂 交，获得既能产生抗体，又能无限增殖的杂种细胞，并生产抗体的技术。（百度）56. 动物细胞原代培养： 从有机体取材开始，在培养瓶内培养至第一次传代前的过程。57. 动物细胞培养外植块： 用于开始体外培养而切下的一小块组织或器官。58. 动物细胞传代培养： 待细胞长满瓶底后，无论是否稀释，将细胞从一个培养容器 转移到另外一个培养容器中的培养。59. 依据细胞的生长是否需要贴壁，动物细胞体外培养分为：贴壁培养和悬浮培养（淋 巴细胞、血细胞或某些肿瘤细胞）。接触抑

15、制： 细胞在生长过程中达到相互接触时停止分裂的现象。60. 胚胎干细胞分化抑制培养的培养基中的分化抑制物： 饲养层：是指用丝裂霉素C处理细胞单层，阻断细胞有丝分裂后得到的细胞单层。 饲养层在分离培养胚胎干细胞中具有促进细胞增殖而抑制细胞分化两方面作用。 条件培养基：是指培养过细胞并含有细胞分泌的生长因子来刺激胚胎干细胞的增 殖和抑制细胞的分化 分化抑制因子： 白血病抑制因子是常用的 ES 细胞分化抑制因子。61. 体外培养细胞的形态： 在悬浮培养时均呈圆形；贴壁依赖性细胞贴壁后，可呈： 成纤维细胞型、上皮细胞型、游走细胞型、多形细胞型62. 器官培养： 是指将整个器官、器官的一部分或器官的原基，模拟体内的生境，使 之在体外存活、生长和保持一定功能的技术。63. 器官培养的方法： 表玻璃培养法； 琼脂凝胶培养法； 悬浮培养法； 气液界面上的培养； 循环培养液培养法； 器官灌注培养法。