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1、紫外线杀菌试验生物科学 121一、实验目的1、了解紫外线的杀菌作用原理。2、学习紫外线杀菌试验方法。二、实验原理1) 紫外线杀菌属于射线杀菌的一种 ；2)杀菌波长240nm-280nm,265nm-266nn范围最强，此范围与 DNA吸收 光谱一致；3) 其杀菌机制：短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。不同的 菌，紫外线的杀菌时间不同 ，杀菌的效果不同。不同的菌，紫外线的杀菌 时间不同，对于一般的细菌只要很短的时间，对于有芽孢的菌，它本身抗逆 性非常强，因此杀灭的时间会相对更长一些4) 特点：杀菌作用强、穿透能力很弱、适用于空间消毒和表面消毒三、实验材料和用具培养 24-48h 的大肠
2、杆菌5 皿牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 接种环 酒精灯 紫外灯四、实验步骤(1)制平板-取无菌平皿5个，将已熔化并冷却至50C左右的牛肉膏蛋白 胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿中，使冷凝成平板。( 2)标记 - 在平板底部标记姓名、日期、班级、实验室号及紫外照射时间(3) 接种-用接种环取细菌密集接种于培养基上。(4) 紫外线处理-将紫外灯光开灯预热3min。再将上述平皿置于紫外灯下， 将平板按照时间顺序在紫外灯下方摆成一排， 并用平皿盖遮住细菌涂布面的 一半。(5) 培养-每隔30s取出一块平皿，放入37C温箱中孵育18-24h , 注意事项1. 在使用过程中，应保持紫外灯表面的清洁。2紫外线对皮
3、肤和眼睛有损伤作用，应注意防护。五、预期结果：1. 盖子盖住的琼脂表面，可见大肠杆菌形成的菌落。2. 直接暴露于紫外线下的琼脂表面无菌生长或只有少量菌生长，且随着照射时间的延长，杀菌效果越好，残余菌越少。六、实验结果及分析大肠杆菌无皿盖有皿盖30s60s90s120s150s结果分析:紫外线对微生物有强烈的致死作用，其杀菌机制是短波的紫外线引起细 胞核酸变性导致微生物死亡。五皿培养皿左半边为无皿盖，右半边为有皿盖, 由图可知，从30s-150s，所长菌从多到少，但长得都较多。紫外灯照射时间 不同，效果不同，30s下，紫外灯照射对菌生长无明显影响，长的菌都较多。 随着时间增加，紫外灯照射对菌生长有了抑制作用，起到的杀菌效果增强。 从设置的时间上看， 90s 后效果开始明显。对比有盖和无盖，当紫外灯照射 相同时间，无皿盖的菌长的比有皿盖少。说明有盖能减弱紫外线对菌的杀菌 作用，但从 150s 下的那个皿可以看出，紫外灯对菌杀菌作用即使在有皿盖 保护情况下，也会随着时间增加而增强。总而言之，紫外线杀菌，且随着照射时间的延长，杀菌效果越好，残余 菌越少。加皿盖能削弱紫外线对菌的杀菌作用。不足点： 1、虽然已经能看出结果，但不明显，接种的菌还不够多，可利用涂布法进 行改进。2、设置的实验组不够多，应适当增长紫外线照射时间。
