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1、紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的含量 作者：郑湘娟 余淑娴 徐晓芳 万南红 李玉琳 张小强【摘要】 目的建立虎杖提取物中白藜芦醇含量的测定方法。方法采用紫外分光光度法，测定波长为305 nm。结果检测浓度在316 g/ml范围内与吸光度线性关系良好(r=0.999 0) 。结论该方法简便、快速、准确，可作为提取过程中的实时监测。 【关键词】 虎杖 白藜芦醇 紫外分光光度法Abstract:ObjectiveTo establish the determination method for resveratrol in extract of Polygonum cuspidatum . Met
2、hodsUV spectrophotometry was adopted with a detection wavelength of 305 nm. ResultsThere was good linear relation ship with in the range of 316 g (r=0.999 0). ConclusionThe method is simple，rapid，accurate.Key words:Polygonum cuspidatum； Resveratrol； UV spectrophotometry虎杖Polygonum cuspidatum Sied.et
3、 Zucc，又名斑根紫金龙、活血龙、阴阳莲1，其根茎具有活血定痛、清热利湿、止咳化痰作用。主要用于关节麻痹、湿热黄疸、经闭、咳嗽痰多、水火烫伤、跌打损伤等症的治疗2。现代药理研究表明其主要有效活性成分白藜芦醇具有抗癌、抗氧化、抗血小板凝聚、抗菌、调节脂类代谢等多种功能。目前定量检测白藜芦醇的方法主要有高效液相色谱法（HPLC）3、气相色谱/质谱法(GC/MS)4以及气相色谱法(GC)5等。国内还未见有关用紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇含量的报道。本实验应用紫外分光光度法测定了虎杖提取液中白藜芦醇含量。现报道如下。1 仪器与试药1.1 仪器Gold S54 紫外可见分光光度计（上海棱光技术有限
4、公司）；AB204-N电子天平(Mettler-Toledo设备有限公司)；FC-160型锤式粉碎机（上海中药机械厂制造）。1.2 试剂虎杖药材购自江西省药材公司（产地江西樟树），经江西医学院冯江教授鉴定为正品虎杖，白藜芦醇对照品由中国药品生物制品检验所提供，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 对照品溶液的制备精密称取干燥恒重的白藜芦醇对照品5.4 mg，于50 ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀，即得到0.108 mgml-1的对照品溶液。2.2 供试品溶液的制备准确称量细块状虎杖10.0 g，加10倍量的水，在沸腾状态下提取180 min，提取1次，冷却后将
5、提取液过滤，滤液定容至一定体积，即为供试样品液。精密称取一定量试液于50 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。2.3 测定波长的选择将白藜芦醇对照品和供试品溶液按实验方法操作，在 200 500 nm 进行波长扫描。结果表明，对照品和供试品溶液均在 305 nm 处有最大吸收，且两者光谱形状极为相似，满足分光光度法测定的基本要求。因此，选定305 nm 作为测定波长。2.4 标准曲线的绘制分别精密吸取“2.1”项下对照品溶液0，0.3，0.6，0.9，1.2，1.5 ml各置于10 ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，即得浓度分别为0，3.24，6.48，9.72，1
6、2.96，16.20 g/ml的对照品溶液。以甲醇做参比，分别测定305 nm 吸光度，以吸光度(A) 对浓度(C) 进行线性回归，得回归方程A=0.134 27C + 0.048 59 (r=0.999 0)。结果表明，白藜芦醇检测浓度在316g/ml 范围内与吸光度线性关系良好。见表1及图1。表1 白藜芦醇标准溶液的浓度与吸光度（略）2.5 重复性实验 取同一批虎杖样品，精密称取4份，按“2.2”项下方法分别制备成4份供试品溶液。在305 nm下分别测定其吸光度并计算白藜芦醇的含量。结果(见表2)表明，4份提取液中白藜芦醇的平均含量为1.46，RSD=2.41（n=4）。表2 白藜芦醇含量
7、测定结果（略）2.6 回收率实验采用加样回收法，精密吸取已知含量为3.32 g/ml虎杖提取液2 ml于25 ml容量瓶中，加入3.24 g/ml对照品溶液2 ml，各4份，用甲醇稀释至刻度，摇匀，测定吸光度，计算回收率。结果得到平均回收率为98.8，RSD为1.35。3 小结 本实验建立了紫外分光光度法测定虎杖提取物中白藜芦醇的方法。实验表明,本法具有操作简单、速度快、准确度高的优点。其加样回收率和重复性均较好，可作为一种虎杖提取液中白藜芦醇含量测定的方法。【参考文献】 1苏文强,杨 磊,朱明华,等.中压柱层析法分离白藜芦醇的研究J.林产化学与工业,2004,24(1):40.2江海燕,朱 华,黄慧学,等.炮制对虎杖中白藜芦醇苷和大黄素的影响J.中草药,2003,34(3):412.3杨红美,陈 波,曾建国,等.HPLC同时测定虎杖及其提取物中4种有效成分的含量J.中国中药杂志,2006,31(3):202.4马 亭,李攻科,李晓东,等.葡萄酒中白藜芦醇的固相萃取GC/MS法测定及其生理活性的初步研究J.高等学校化学学报,2000,20(7):1023.5于 贞,张影陆,赵光鳌.葡萄酒中白藜芦醇的分析J.工业微生物,2001,31(4):34.
