《免疫检测系统的分析性能验证评估报告》由会员分享，可在线阅读，更多相关《免疫检测系统的分析性能验证评估报告（16页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、免疫检测系统/方法的分析性能验证评估报告检验中心依据CNAS-CL02：医学实验室质量和能力认可准则（ISO 15189： 2007）对 医学实验室检测系统性能评价的相关要求，对定性检测项目的灵敏度、特异性、符合率、检 出限、CUT OFF值进行评价；雅培ARCHITECT i2000SR全自动化学发光分析检测系统性 能主要从以下几个方面进行评价：精密度、正确度、线性范围、临床可报告范围、功能灵敏 度等。具体实施方案如下。1 目的：对雅培ARCHITECT i2000SR全自动化学发光分析检测系统定量检测的肿瘤8项（AFP、 CEA、Ferritin、Total PSA、Free PSA、CA
2、125、CA19-9、CA15-3）和感染免疫项目（HBsAg、 HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、抗 HCV、抗 HIV、抗 TP、TRUST）定性检测方法的 分析性能进行评价，结果与生产厂家给出的性能指标进行比较，来验证生产厂家给出的性能 指标是否能满足临床要求。若无厂家性能指标则与CLIA88规定的标准或卫生部室间质评 计划表提供的标准比较，判断仪器的性能是否符合要求。2 原理2.1 感染免疫定性检测项目2.1.1 检测系统灵敏度、特异性和符合率评价仪器测量结果与真值的一致程度。采用参加卫生部临检中心的室间质评样品，本组 参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准。检测系
3、统灵敏度为真阳性/（ 真阳性+假阴性） 的百分率。 诊断特异性为 真阴性/（真阴性+假阳性）的百分率。符合率指所有检验结果中正确结果百分率。2.1.2 检出限检出某种分析物的最低浓度。选择定值阳性质控品，按比例作系列稀释并检测，以确定 其最低检出限。以S/CO大于1且接近于1,比值稳定的最低浓度作为其检测限。2.1.3 CUT OFF 值判定某种分析物有或无的判断值。收集1500例健康人群需验证项目的OD值，求其平 均值和标准差（SD）,以平均值+3SD作为本实验室的Cut off值。2.2 肿瘤 8 项定量检测项目2.2.2.2：采用卫生部临检中心室间质评回报结果作为评价指标，分析最近一次室
4、间质评回报 成绩。2.2.3 线性范围评价采用EP6-A定量检测系统线性评价方案，采用未经过任何处理的病人检验标本，确 定某项目检测上限的同时验证其检测上下限范围是否呈线性关系。2.2.4 临床可报告范围评价 临床可报告范围上限为分析测量范围上限乘以最大稀释度。结合最大稀释度以及分析测量范围确定临床可报告范围。3 检测方法：感染免疫项目（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、抗 HCV、抗 HIV、抗TP）的检测方法是ELISA法，其中梅毒螺旋体非特异性抗体（TRUST）的检测方法是粒 子凝集法；肿瘤 8 项（AFP、CEA、Ferritin、Total PSA、Free
5、 PSA、CA125、CA19-9、CA15-3） 的检测方法为化学发光免疫分析法（双抗夹心法）。4 方案：4.1 感染免疫定性检测项目评价方案采用2011年卫生部临检中心室间质评（EQA）结果作为评价标准。4.1.1特异性（） =EQA被测试剂盒测定真阴性数/EQA阴性数*100%4.1.2灵敏度（） =EQA被测试剂盒测定真阳性数/EQA阳性数*100%4.1.3符合率（） =EQA被测试剂盒测定的正确数/EQA总数*100%4.1.4 最低检出限：用每一需验证项目的定值阳性质控品，按比例做合适的浓度稀释系列稀释并检测,每个浓度重复3孔，根据试剂盒要求仪器自动计算S/CO值,记录每一孔的S
6、/CO 值。以 SCO 大于 1 且接近于 1 所对应的浓度作为其最低检出限。4.1.5收集1500例健康人群需验证项目的OD值，求其平均值和标准差（SD）,以平均值+3SD 作为本实验室的 Cut off 值。4.2 肿瘤 8 项定量检测项目性能评价方案4.2.1 精密度评价方案根据 NCCLS EP15-A 文件，对稳定的样品作多次测定，求重复测定值的均值、标准差判定标准：批内性精密度CV%应三1/4最大允许误差（TEa） （TEa参考卫生部临检中心室间质量评 价计划书中的允许总误差）。日间精密度CV%1/3最大允许误差（TEa）（TEa参考卫生部临检中心室间质量评价计 划书中的允许总误差
7、）。4.2.2 正确度验证（定值参考物质检测）方案一：根据NCLLS EP5-A文件，采用定值校准品进行正确度验证。首先使用校准品 1 进行检测系统的校准，之后用不同批号的校准品2进行检测，每个项目重复测定5次，取 平均值与校准品 2 的定值进行比较，计算绝对偏倚与相对偏倚，要求相对偏倚小于 1/2CLIA88或小于1/2最大允许误差（TEa）（TEa参考卫生部临检中心室间质量评价计划书 中的允许总误差）。方案二：根据历年的EQA上报数据（至少连续2次的）进行统计，计算偏倚。4.2.3 临床可报告范围评价方案依照CLSI的EP6 一 As文件的要求，收集评价项目的患者高值与低值标本（高值标本
8、为接近线性范围上限或高于线性上限 10%15%的标本，低值标本为接近线性范围下限的标 本），要求有足够的样本量能满足所需样本稀释和测量，将高浓度混合样品与低浓度混合样 品按5H、4H+L,3H+2L、2H+3L、H+4L、5L的比例精确配制，重复测定2次。所有样品应 在一次运行中或几次间隔很短的运行中随机测定，最好在一天之内完成。统计数据，剔除离 群值，单个离群值可直接由数据组中剔除并进行重测，全部样本无需重新测定。如发现多个 离群值或数据点过于分散，需检查造成此误差的可能原因，对可能原因进行纠正后，对全部 样本进行重新测定。求出2次测定结果的平均值和每一稀释度的预期值，进行相关回归分析， 判
9、断其是否线性。采用线性回归分析，以预期值为X，以按比例稀释的实测均值为Y,得线性方程Y=bX+a, 得到a、b及R2值。X和Y分别为自变量和应变量，b为斜率，a为Y轴截距，R2为相关系 数的平方，判断其是否线性。制作线性差异图：计算出每一稀释度测定均值和预期值的差值。 以预期值为横轴，差值为纵轴，做图。判断标准：验。取一份高浓度的病人样本（接近线性范围上限的样品），用空白液或厂商推荐的稀释液 进行系列稀释，稀释倍数包含厂家推荐最大稀释倍数，每个浓度重复测定2 次，取 2 次结果 的平均值为各个稀释度样品的检测值。依据系列稀释浓度计算各系列样品的分析物浓度的预期值。比较各个稀释度样品的检测 值和
10、预期值，分别计算比值R （R=检测值/预期值）。判断标准： 80%R120%定为可接受限，R120%时的相应稀释度为不可接受稀释度，其 上一级别的稀释度即为该测试的最大稀释度。 或者以 1/2 CLIA88 总允许误差范围为判断限。 符合条件的最大稀释度确定为该项目的最大稀释倍数。4.2.5 Free PSA和Total PSA的功能灵敏度评价方案功能灵敏度定义为：以天间重复CV为20%时对应检测限样品具有的平均浓度，确定为 检测系统或方法可定量报告分析物的最低浓度或其他量值的限值。为了估计功能灵敏度，须 用多个检测限浓度来确定在低浓度处的精密度表现，从中选择具有或接近于20%CV的对应 浓度
11、，为可定量报告的最低浓度或其它量值的限值。分别收集Free PSA和Total PSA正常值标本的混合血清，作系列稀释（稀释的最低预 期值最好低于检测范围的下限），记录每天的检测结果，连续检测不少于10天，计算每个 稀释度的天间CV,以天间CV最接近于20%时所对应的平均浓度确定为该项目的功能灵敏 度。（备注：只做Free PSA、Total PSA的功能灵敏度，其他项目最低检出限根据厂家声明的检 出限乘以 6-10倍，不进行验证）5 器材雅培ARCHITECT i2000SR全自动化学发光分析仪，伯乐Model 680全自动酶标仪6 结果验证结果均符合相关规定，详见附表一、二。7 结论：本实
12、验的感染免疫项目（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、抗 HCV、抗 HIV、4r 、i、,、 r c m、尺氏 J、, .ktL. 4-A ?.r7Trl厶厶I 匕J I ?tL-l-. IK .ktL.斤斤一、）：4-A I I t 17口Tm i iAtV-US 丄_*附表一定性检测系统/方法的分析性能验证评估表序号项目参 数检测系统/方法生产厂给出技术指标特异性验 证结果灵敏度验 证结果检出限符合率验 证结果CUT OFF验证值评估结 论1乙型肝 炎病毒 表面抗原（HBsAg）1. 检测设备:A.伯乐Model 680全自 动酶标仪，注册号：国食药监械（进） 字
13、2011第2400149号，设备编号： LAB-YQ/MY004； B.伯乐 1575 洗板 机，注册号：国食药监械（进）字2010 第2403456号，设备编号： LAB-YQ/MY0072. 检测试剂：北京万泰乙型肝炎病毒 表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法）， 国药准字S10980090；3. 校准品：（不适用）；4质控品：北京康彻思坦HBsAg标准 物质（1 IU/ml）, GBW （E） 0900695.检测方法：ELISA法。阳性参考品（P1P3） 符合率为3/3,阴性参 考品（N1N20）符合 率为20/20,灵敏度参 考品 HBsAg adr、adw 及ay亚型，系列1的 最低检出
14、量不高于 0.1IU/ml,系列2及系 列3的最低检出量不 高于0.2IU/ml。精密 度 CV （%） 15%100%100%0.5 IU/ml100%0.067符合要 求2乙型肝 炎病毒 表面抗 体（HBsAb）1. 检测设备:A.伯乐Model 680全自 动酶标仪，注册号：国食药监械（进） 字2011第2400149号，设备编号： LAB-YQ/MY004； B.伯乐 1575 洗板 机，注册号：国食药监械（进）字2010 第2403456号，设备编号： LAB-YQ/MY0072. 检测试剂：北京万泰乙型肝炎病毒 表面抗体诊断试剂盒（酶联免疫法），最低检出量参考品P1 （ 10mIu
15、 ） ， P2（5mIu），P3 （2mIu） 最低检出量不高于 10mIu ；阴性参考品（N1N） 20符合率 为20/20,精密度CV（%） 15%。100%100%5 mIU/ml100%0.089符合要 求国食药监械（准）字2008第3401056 号；3.校准品：（不适用）；4质控品：北京康彻思坦 抗HBs标准 物质（30 mIU/ml）, GBW （E） 0901255.检测方法：ELISA法。3乙型肝 炎病毒e 抗原（HBeAg）1. 检测设备:A.伯乐Model 680全自 动酶标仪，注册号：国食药监械（进） 字2011第2400149号，设备编号： LAB-YQ/MY004； B.伯乐 1575 洗板 机，注册号：国食药监械（进）字2010 第2403456号，设备编号： LAB-YQ/MY0072. 检测试剂：北京万泰乙型肝炎病毒 e抗原诊断试剂盒（酶联免疫法），国 食药监械（准）字2008第3401283号；3. 校准品：（不适用）；4质控品：北京康彻思坦HBeAg标准 物质（2 NCU/ml），GBW （E） 0901495
