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1、-目 录摘要1前言21LC-MS分析原理22LC-MS仪的组成及其分析条件的选择32.1LC-MS联用仪的组成32.2LC-MS分析条件的选择和优化32.2.1接口的选择32.2.2正、负离子模式的选择32.2.3流动相的选择32.2.4流量和色谱柱的选择32.2.5辅助气体流量和温度的选择43 LC-MS在药物分析中的应用43.1LC-MS在药物筛选方面的应用43.2LC-MS在药物成分鉴定研究43.2.1中药成分分析53.2.2 抗生素药物成分分析53.2.3中成药、保健品、食品中非法添加化学药物成分的鉴定分析53.3LC-MS在药物代分析的应用63.4LC-MS在残留药物分析的应用74
2、展望7参考文献9. z.-液质联用技术在药物分析中的应用研究进展摘要：液相色谱-质谱联用技术以其高别离能力，高灵敏度和专属性强的优势，在药物成分的鉴定分析、药物代研究、中成药和保健品中非法添加化学药物成分的鉴定分析以及药物残留分析等方面得到广泛的应用。本文简要综述了近年来液质联用技术在药物分析中的应用，阐述了LC-MS技术在药物筛选，药物成分鉴定研究，药物代分析以及残留药物分析方面的研究进展，并对其开展趋势进展了展望。关键词：液质联用；药物分析；应用；进展Recent Development in the Application of LC-MS in Pharmaceutical Analy
3、sisChuanyang SuAbstract:Liquid chromatography-mass spectrometry is regarded as an important technology formany advantages such as high separating efficiency, good sensitivity and strong specifity. So it iswidely used in analysis of drugs andmetabolites, chemicalmedicinemixed illegally in Chinese med
4、icine and drug residue.This paper briefly reviewed its application in pharmaceutical analysis,the application and development as drug screening,analysis of drugs and metabolites, drug residues were mainly introduced. Finally, the development trend of LC-MSis proposed.Key words:LC-MS；pharmaceutical a
5、nalysis ; application;development前言液相-质谱联用技术(LC-MS)是20世纪90年代开展起来的一门综合分析技术, LC的高别离效能与MS的高灵敏度,高选择性使之成为当代最重要的别离和鉴定分析方法之一。该技术自20 世纪70 年代进展开创研究以来，经历了长期的实践和研究过程，直到90 年代大气压电离技术成熟后，各种商品化仪器相继问世，LC-MS技术才得以迅速开展，成为科研和日常分析的有力工具。液相-质谱联用技术与气相色谱-质谱联用技术( GC-MS)相比,气相色谱-质谱联用技术开展较早,技术较为成熟,但GC样品要求有一定的蒸汽压,实际应用中,只有少局部样品可以
6、不经过预先处理可到达GC的别离要求,多数情况下需要做预处理或衍生化使之成为易汽化的样品才能进展GC-MS分析;而液相色谱不受上述限制,可别离高极性的和热不稳定的化合物,这使得液相-质谱联用技术具有更广阔的应用前景1。1 LC-MS分析原理LC-MS仪主要由高效液相色谱，接口装置(LC与MS之间的连接装置，同时也是电离源)，质谱仪组成。混合样品通过液相色谱系统进样，由色谱柱别离，从色谱仪流出的被别离组分依次通过接口进入质谱仪的离子源处并被离子化，然后离子被聚焦于质量分析器中，根据质荷比而别离，别离后的离子信号被转变为电信号，传递至计算机数据处理系统，根据质谱峰的强度和位置对样品的成分和构造进展分
7、析。LC-MS是通过一个接口来实现的，所用接口适宜与否，不仅会影响质谱仪的灵敏度，而且影响质谱仪所能提供的构造信息和应用围。在接口研制方面，前后开展了有20多种2，其中主要有直接导入界面、传送带界面、渗透膜界面、热喷雾界面和离子束界面，但这些技术都有不同方面的限制和缺陷，直到大气压电离技术(API)成熟后，液-质才得以飞速开展。大气压电离技术包括电喷雾电离和大气压化学电离(APCI)。作为LC-MS联用仪的质量分析器，最常用的是四极杆分析器，离子阱分析器和飞行时间分析器。四极杆分析器由4根棒状电极组成3，当样品量很少，而且样品中特征离子时，可以采用离子监测，这种扫描方式灵敏度高，通过选择适当的
8、离子使干扰组分不被采集，可以消除组分间的干扰。飞行时间质量分析器的特点是质量围宽，扫描速度快，既不需电场也不需磁场。但是，长时间以来一直存在分辨率低这一缺点，主要原因在于离子进入漂移管前的时间分散、空间分散和能量分散。目前，通过采取激光脉冲电离方式，离子延迟引出技术和离子反射技术，可以在很大程度上克制上述3个原因造成的分辨率下降，这种分析器已广泛应用于液相色谱-质谱联用仪中。离子阱质量分析器的特点是构造小巧，质量轻，灵敏度高，而且还有多级质谱功能，其与四极杆分析器类似，离子在离子阱的运动遵守所谓马蒂厄微分方程，也有类似四极杆分析器的稳定图。在稳定区的离子，轨道振幅保持一定大小，可以长时间留在阱
9、，不稳定区的离子振幅很快增长，撞击到电极而消失。2 LC-MS仪的组成及其分析条件的选择2.1 LC-MS联用仪的组成HPLC局部：高压输液系统、进样系统、色谱柱、检测系统、记录仪。MS局部：供电系统、进样系统、离子源、质量分析器、离子检测器。接口装置：也是电离源。2.2 LC-MS分析条件的选择和优化2.2.1接口的选择ESI适合于中等极性到强极性的化合物分子，特别是那些在溶液中能预先形成离子的化合物和可以获得多个质子的大分子(如蛋白质)APCI不适合可带多个电荷的大分子，其优势在于弱极性或中等极性的小分子的分析。2.2.2正、负离子模式的选择选择的一般原那么为:正离子模式适合于碱性样品，可
10、用乙酸或甲酸对样品加以酸化。样品中含有仲氨或叔氨时可优先考虑使用正离子模式。负离子模式适合于酸性样品，可用氨水或三乙胺对样品进展碱化。样品中含有较多的强伏电性基团，如含氯，含溴和多个羟基时可尝试使用负离子模式。2.2.3流动相的选择常用的流动相为甲醇，乙腈，水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液，如甲酸铵，乙酸铵等，还可以参加易挥发酸碱如甲酸，乙酸和氨水等调节pH值。LC/MS接口防止进入不挥发的缓冲液，防止含磷和氯的缓冲液，含钠和钾的成分必须送样前一定要摸好LC条件，能够根本别离，缓冲体系符合MS要求。2.2.4流量和色谱柱的选择不加热ESI的最正确流速4是150ul/min，应用
11、4。6 mm径LC柱时要求柱后分流，目前大多采用 l2.1 mm径的微柱，TIS源最高允许lml/min，建议200400ul/minAPCI的最正确流速lml/min，常规的直径4.6mm柱最适宜。为了提高分析效率，常采用 100 mm的短柱(此时UV图上并不能获得完全别离，由于质谱定量分析时使用MRM的功能，所以不要求各组分没有完全别离)。这对于大批量定量分析可以节省大量的时间。2.2.5辅助气体流量和温度的选择雾化气对流出液形成喷雾有影响，枯燥气影响喷雾去溶剂效果，碰撞气影响二级质谱的产生。操作中温度的选择和优化主要是指接口的枯燥气体而言，一般情况下选择枯燥气温度高于分析物的沸点20 左
12、右即可5。对热不稳定性化合物，要选用更低的温度以防止显著的分解。选用枯燥气温度和流量大小时还要考虑流动相的组成，有机溶剂比例高时可采用适当低的温度和流量小一点的。3 LC-MS在药物分析中的应用3.1 LC-MS在药物筛选方面的应用在药物筛选工作中，是否能有效去除的化合物，以及能否对潜在的新药前体进展早期鉴定是高通量筛选的关键。因此，必须在别离化合物的初期，运用各HPLC检测手段来指导别离具有特定构造的化合物。目前MS是分子检测中最灵敏的方法，并能得到被测物的分子量及化学构造信息。Bringmann6等采用HPLC-核磁共振(nuclear magnetic resenace，NMR)和LC-
13、MS等几种分析手段相结合的方法考察了热带藤类植物提取物中所含有的成分，利用HPLC-NMR和LC-MS分析发现了2个新的天然产物，并鉴定了构造，确定了绝对构型。Wolfender7等运用此法对龙胆科、豆科的多种植物进展了检测，实验说明，仅用少量的样品就能快速而准确地对具有生物活性的化合物进展别离与鉴别。萝摩科三酚丹是一种具有抗肿瘤活性的药用植物，其主要有效成分为菲吲哚里西丁类生物碱。首先采用别离得到3种骨架10个菲吲哚里西丁类生物碱，在此根底上用LC-MS技术对有效部位进展了考察，分析检测到11个微量的菲吲哚里西丁类生物碱成分。通过参照单体化合物的质谱裂解规律，分析推测了一些微量成分的化学构造
14、。3.2 LC-MS在药物成分鉴定研究液质联用技术将液相色谱高效的在线别离能力与质谱的高选择性、高灵敏度的检测能力相结合,可以同时得到化合物的保存时间、分子量及特征构造碎片等丰富的信息,是组分复杂样品和微重样品别离分析最有力的研究手段。3.2.1中药成分分析中药药物成分复杂多样,别离提纯难度大,液质联用技术对样品不需要进展繁琐和复杂的前处理,因此在中药成分分析研究得到广泛应用,包括对成分的定性定量分析,在对未知成分的研究中,质谱检测器可以给出大量的构造信息,结合同类构造化合物的裂解规律,或结合其他检测方法,即可对未知成分进展直接分析。袁杰8等采用 HPLC /ESI-MS 联用的方法对朝鲜淫羊
15、藿的化学成分进展分析,以ESI-MS 获得的准分子离子峰确定化合物的分子量,根据多级质谱所得的碎片峰,结合紫外光谱、HPLC 的保存时间等信息鉴定了 9 个黄酮苷类化合物。KiteG C9等采用 HPLC /ESI-MS 分析了皂树中一百多种皂苷类成分的构造。总之,液质联用技术不仅能够对中药化学成分进展定性和定量研究,还能够通过串联质谱给出的构造信息推测某些未知成分,指导下一步的研究工作。3.2.2 抗生素药物成分分析许多抗生素品种由于其产生菌绝大多数都是产生构造相似的多组分复合物,用常规分析方法对其进展快速鉴别和相关物质分析比拟困难,药品质量难以控制。液质联用技术以其强有力的别离和分析能力,在这类抗生素药物成分分析和相关物质的鉴定上显示了巨大的优势。牛长群10等用 LC -ESI - MS 分析了氨苄西林、阿莫西林中的相关物质，确定了其构造,为氨苄西林、阿莫西林的相关物质的质量控制提供了重要证据。胡敏等11应用 HPLC-(+) ESI-MS 快速鉴定了头孢硫脒的降解产物。总之,高效液相质谱联用技术集液相色谱的高别离能力和质谱的高灵敏度高选择性于一体,使同时分析多个化合物成为可能,并显示了极大优势。3.2.3中成药、保健品、食品中非法添加化学药物成分的鉴定分析近几年来，中成药或保健品非法添加化学药物屡见不鲜,患者在不知情的情况大量服用,可能造成严重的不良反响。液相-质谱
