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1、细菌的保存方法微生物作为地球上最早出现的生命形式，是生物中重要的分解代谢类 群。微生物的多样性在维持生物圈生态平衡和为人类提供广泛的、大 量的未开发资源方面起着重要的作用。每一个微生物菌株都具有不同的特性，因此以微生物为对象，不 论是进彳丁基础研究还是应用研究，菌种的保存是微生物学的基础。随 着微生物学的发展，研究者们不断挖掘和改进了许多菌种的保存方 法，针对不同物种方法有所不同，有的只应用于短期保存，有的可以 进行长期保存。但在细菌的保存中，有以下几种方法可普遍采用一、传代培养保存法传代培养是微生物保存的基本方法。其中，培养基的浓度不宜过 高，培养温度应稍低于生长最适温度。虽然此法可以随时接
2、种以便复 试，但它也有重要的缺陷，如遗传性状容易变异，易发生污染，需要 定期移种等。二、液体石蜡覆盖保存法这是传代培养的变相方法，能够适当的延长保存时间。主要适用 于放线菌、需氧性细菌等的保存。在长期保存中，为了防止传代培养 菌由于干燥而死亡，同时为了限制氧的供应以削弱代谢作用，可以在 培养基上面覆盖灭菌的液体石蜡进行冷藏。此方法简单不需要特殊装 置，应用范围广，保存时间长（几年甚至十几年），但使用的液体石 蜡质量要高，而且要经过数次高压灭菌。液体石蜡层的深度以1cm 左右为宜。三、载体保存法使微生物吸附在适当的载体（土壤、砂子等）上进行干燥保存也 是一种常用的菌种保存方法。这种方法主要用于形
3、成孢子的细菌的保 存。使用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜，经高压灭菌后加入菌液。 待细菌繁殖后，移入干燥器，经短暂干燥或风干后，冷藏或保存于室 温。四、悬液保存法有些细菌如放线菌、青枯病假单胞杆菌，使之悬浮于蒸馏水中就 能在室温下保存数年。而有些细菌需要保存于糖溶液或磷酸缓冲液 中。五、冷冻保存法大多数细菌进行冷冻处理都能长期保存。抗冻力强的菌株在细胞 外冻结下不受损伤，但多数细胞不论在细胞外冻结或在细胞内冻结， 都容易受到损伤。一般来说，加防冻剂如甘油就能防止细胞外冻结所 引起的损伤。六、冷冻干燥保存法其原理较为简单。首先使微生物冷冻，然后在减压下利用升华现 象除去水分。从菌体除去大部分的水分，细胞的生理活动就会停止， 从而能够长期维持生活状态。以上方法是细菌学研究中常用的几种保存方法，其操作简便易行， 适用于常规实验。但由于每种微生物其生理生化性状和次生代谢类型 的不同，保存方法也存在差异，研究者可不断的摸索和改进。
