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1、-响应面法优化亚麻籽粕不溶性膳食纤维提取工艺可 侯伟伟 娜娜 天兰 双双 海燕*(*农业大学食品科学与药学学院，*乌鲁木齐 830052)摘要：以亚麻籽粕为原料，采用碱性蛋白酶水解。在单因素试验根底上，选取酶解温度、时间、加酶量(质量分数)和料液比为响应变量，以不溶性膳食纤维提取率为响应值，利用Bo*-Behnken试验设计方案和响应面分析法，建立不溶性膳食纤维提取率与响应变量的回归方程，并确定最正确提取条件为:酶解温度55、酶解时间4h、料液比1：20、加酶量9%，此条件下水不溶性膳食纤维得率为52.05%，与预测值52.5%较为一致。关键词：亚麻籽粕；不溶性膳食纤维；响应面分析法；优化Re
2、sponse Surface Methodology for Optimization of E*traction Process of InsolubleDietary Fiber fromFla*seed MealLi Ke Yang Hai-yan*(College of Food Science and Pharmacy, *injiang Agricultural University, Urumqi 830052, China)Abstract: This article used fla*seed meal as raw material, pleted hydrolysis w
3、ith alkaline protease. On the basis of single factor test, selected the hydrolysis temperature, time, enzyme amount (mass fraction) and the ratio of solid to liquid as response variable, regarded the insoluble dietary fiber e*traction rate as response value, establish insoluble dietary fiber e*tract
4、ion rate and response variables regression equation by Bo*-Behnken e*perimental design and response surface analysis method, and determined the optimum e*traction conditions: Hydrolysis temperature of 55, enzymatic hydrolysis time of 4h, solid to liquid ratio of 1:20, enzyme amount of 9%. Under this
5、 condition, the water-soluble dietary fiber yield is 52.05%, it is consistent with the predictive value of 52.51%.Key words: fla*seed meal；insoluble dietary fiber；response surface methodology；optimization亚麻又称胡麻，是古老的经济作物，广泛分布于世界各地。根据联合国粮农组织的统计，世界亚麻种植面积年平均314.6万hm2、年产量平均为271万t。我国的亚麻种植面积每年约57万hm2，仅次于加拿
6、大和印度，居世界第3位；亚麻年产量约47万t，仅次于加拿大，居世界第2位1。亚麻是喜凉作物，在北方适宜早春种植，一般海拔高度8702000m均可种植，需有效积温10002200。我国的亚麻以油用为主，约占总播面积的90%，主要分布在华北、西北地区2。但胡麻籽也含有一些抗营养因子，如植酸、生氰糖苷、抗吡多醇因子抗维生素B6和致甲状腺肿素等，限制胡麻籽在食品和家禽饲料方面应用3，造成资源的收稿日期：作者简介：可1985-，男，硕士研究生，研究方向：天然产物提取与利用。Email: 31866460qq.通讯 海燕1962-，女，博士，教授，研究方向：食品资源开发与利用。: yanghaiyan12
7、3.浪费。膳食纤维具有预防肥胖症、缓解便秘、改善肠道菌群、降低血糖、降低血清胆固醇水平、防治高血压、抗肠胃癌症、去除重金属离子、抗氧化、去除自由基等成效4-7，是继蛋白质、脂肪、水、矿物质、维生素、碳水化合物之后，能够改善人体营养状况、调节机体功能的“第七类营养素9。而亚麻籽脱脂后的纤维占到亚麻饼粕的1/2左右5，是膳食纤维的很好来源。但是，在我国报道用亚麻籽提取亚麻蛋白和膳食纤维的文献很少，更未见有规模化生产的报道1。 本试验利用亚麻籽制油后的亚麻籽粕开展不溶性膳食纤维IDF的提取工艺条件研究，旨在提高亚麻籽粕加工产品的附加值，为亚麻产业化的开展提供技术支撑，这对于推动亚麻产业化开展，提高经
8、济效益、增加农民收入、促进地方经济和社会开展有着重要的意义。1 材料与方法1.1原料与试剂亚麻籽粕 西域金锄生物技术；碱性蛋白酶(产品规格20万U/g) 庞博生物工程。1.2仪器与设备PH-10 pH计 德国 Sartorius公司；AL204电子分析天平 梅特勒-托利多仪器()；HH-2型数显恒温水浴锅 金坛市医疗仪器厂；SHB-循环水式多用真空泵 长城科工贸；TDL-5离心机 安亭科学仪器厂；DHG-9140A型电热鼓风枯燥箱 一恒科学仪器。1.3实验方法1.3.1 IDF提取工艺流程 亚麻籽粕粉碎过筛脱毒脱胶调底物浓度灭酶调pH值恒温酶解灭酶离心别离枯燥IDF1.3.2单因素实验 为了确
9、定工艺条件，分别对影响IDF提取率的酶解温度、加酶量(质量分数)、酶解时间和液料比4个因素进展研究。在酶解温度45、50、55、60、65五个水平，加酶量4%、6%、8%、10%、12%六个水平，酶解时间2h、2.5h、3h、3.5h、4h、4.5h六个水平，液料比1：10、1：15、1：20、1：25、1：30(g/mL)六个水平，分别进展单因素试验，计算IDF提取率，以确定各因素的变化围及适宜值。确定在提取过程中温度、时间、料液比、加酶量对提取率的影响。1.3.3响应面法实验在单因素的根底上，根据Bo*-Behnken的中心组合设计实验原理，以提取率为响应值，选择温度(*1)、时间(*2)
10、、料液比(*3)、及加酶量(*4)，进展四因素三水平响应面实验，通过响应面曲面分析进提取条件的优化，因素水平见表1，并运用软件分析得到最优提取条件。表1 试验因素水平表Tab.1 Test factor and level table水平因 素*1温度*2时间(h)*3料液比(m/v*4加酶量(%)-15031:1560553.51:20816041:25101.4分析评价方法1.4.1 亚麻籽粕水不溶性膳食纤维测定IDF测定AACC法101.4.2 试验设计与数据处理采用软件Design-E*pert 7.0.0 Trial进展试验设计与数据处理。2结果与分析2. 1单因素实验结果2.1.1
11、 温度对IDF提取率的影响图1 温度对IDF提取率的影响Fig.1 The effect of t temperature on e*traction ratio of IDF在酶解温度分别为45、50、55、60、65，酶解时间4h，料液比20%，加酶量8%的条件下，提取率如图1所示。由图1可知，当提取温度低于55时，随着温度的升高，膳食纤维提取率逐步升高；但是，当温度高于55时，膳食纤维提取率反而随温度的升高而降低。这是因为，当酶解温度低于55时，碱性蛋白酶活力随温度的升高而升高；当酶解温度高于55时，随着温度的升高碱性蛋白酶活性降低，IDF提取率下降。因此，选择温度为5060作为响应面试
12、验的因素水平围。2.1.2酶解时间IDF提取率的影响图2 时间对IDF提取率的影响Fig.2 The effect of time on e*traction ratio of IDF在温度为55，分别为2h、2.5h、3h、4h、4.5h，料液比20%，加酶量8%的条件下，提取率如图2所示。由图2可知，酶解时间到达3.5h时IDF取率到达最高，其提取率到达45.96%，继续延长酶解时间，膳食纤维的提取率变化不明显。这是因为亚麻籽粕中有大量的蛋白，酶解时间过短，蛋白水解不完全，随时间的延长，蛋白充分酶解。当酶解时间到达3.5小时，其中的酶已充分酶解蛋白，继续延长酶解时间对IDF的提取率趋于平缓
13、。2.1.3料液比对IDF提取率的影响图3 料液比对IDF提取率的影响Fig.3 The effect of material-to-liquid on e*traction ratio of IDF在温度55，时间3.5h，料液比分别为1：10、1：15、1：20、1：25、1：30，加酶量8%的条件下，提取率如图3所示。由图3可知，当料液比小于1：20时，随料液比增加提取率增加，但料液比高于1:20时IDF的提取率开场下降，这是因为当料液比到达1:20时，其中的液体用量已使酶可充分与蛋白接触，从而到达降解蛋白的目的。而在升高液体的用量过高时，酶浓度过低，从而使IDF提取率降低。2.1.4加
14、酶量对IDF提取率的影响图4 加酶量对IDF提取率的影响Fig.4 The effect of amylase density on e*traction ratio of IDF在温度55，时间3.5h，料液比1：20，加酶量分别为4%、6%、8%、10%、12%的条件下，提取率如图3所示。由图3可知，当加酶量小于8%时，随着加酶量的增大，IDF的提取率也增大，酶添加量到达8%时IDF取率到达最高，其提取率到达51.56%。继续增加加酶量，膳食纤维的提取率趋于平缓。这是因为亚麻籽粕中有大量的蛋白，当加酶量低于8%时，酶用量过低；当酶添加量到达8%时其中的酶已可充分与蛋白接触从而到达降解蛋白的
15、目的，而加大酶用量时对IDF提取率的作用已经不明显。2.2 制备工艺的优化2.2.1 响应面法优化酶解条件试验结果表2 Bo*-Behnken 试验设计及结果Table 2 Bo*-Behnken design and corresponding e*perimental results试验序号*1*2*3*4提取率%11-10036.112-110047.4330-10-143.21400-1141.775-100148.316000050.8870-10147.738001-141.1790-11040.7810000049.331101-1045.2112-10-1039.2213000051.7
