《仪器分析答案.doc (2)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《仪器分析答案.doc (2)（22页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、16色谱定性的依据是什么？主要有哪些定性方法？答：根据组分在色谱柱中保留值的不同进行定性.主要的定性方法主要有以下几种:(1)直接根据色谱保留值进行定性(2)利用相对保留值r21进行定性(3)混合进样(4)多柱法(5)保留指数法(6)联用技术(7)利用选择性检测器19.有哪些常用的色谱定量方法？是比较它们的优缺点及使用情况。答：1外标法 外标法是色谱定量分析中较简易的方法该法是将欲测组份的纯物质加试剂配制成不同浓度的标准溶液。取固定量的标准溶液进样分析从所得色谱图上测出响应信号（峰高或峰面积等），以响应信号（纵坐标）对质量分数（横坐标）作标准曲线图这些数据应是个通过原点的直线分析样品时，在上述
2、完全相同的色谱条件下，取制作标准曲线时同样量的试样分析、测得该试样的响应讯号后由标谁曲线即可查出其百分含量 此法的优点是操作简单，因而适用于工厂控制分析和自动分析；但结果的准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性2内标法 当只需测定试样中某几个组份或试样中所有组份不可能全部出峰时，可采用内标法具体做法是：准确称取样品，加入一定量某种纯物质作为内标物，加入到准确称取的试样中根据被测物和内标物在色谱图上相应的峰面积(或峰高）)和相对校正因子求出某组分的含量内标法是通过测量内标物与欲测组份的峰面积的相对值来进行计算的，因而可以在定程度上消除操作条件等的变化所引起的误差 内标法的要求是：内标物必须
3、是待测试样中不存在的；内标峰应与试样峰分开，并尽量接近欲分析的组份内标法的缺点是在试样中增加了一个内标物，常常会对分离造成一定的困难。3归一化法 当试样中各组分都能流出色谱图，并在色谱图上显示色谱峰时，可用此法。归一化法是把试样中所有组份的含量之和按100计算，以它们相应的色谱峰面积或峰高为定量参数通过下列公式计算各组份含量：由上述计算公式可见，使用这种方法的条件是：经过色谱分离后、样品中所有的组份都要能产生可测量的色谱峰 该法的主要优点是：简便、准确；操作条件(如进样量，流速等)变化时，对分析结果影响较小这种方法常用于常量分析，尤其适合于进样量很少而其体积不易准确测量的液体样品20.在一根2
4、m长的硅油柱上，分析一个混合物，得到下列数据：苯、甲苯及乙苯的保留时间分别为120”,22”及31；半峰宽为6.33”,8.73”及12.3”，求色谱柱对每种组分的理论塔板数及塔板高度。解：120”80”,22”=122”,31=181”由公式H=L/n,n=5.54(tr/Y1/2) (tr/Y1/2)得N1=880,H1=0.0023N2=1086,H2=0.0018N3=1197,H3=0.001721.解：（1）从图中可以看出，tR2=17min, Y2=1min,所以； n = 16(tR2/Y2)2 =16172 = 4624 (2) tR1= tR1- tM1 =14-1=13m
5、in t”R2=tR2 tM2 = 17-1 = 16min相对保留值 a = tR2/tR1=16/13=1.231根据公式：L=16R2(1.231/(1.231-1)2 Heff通常对于填充柱，有效塔板高度约为0.1cm, 代入上式， 得：L=102.2cm 1m22.分析某种试样时，两个组分的相对保留值r21=1.11, 柱的有效塔板高度H=1mm，需要多长的色谱柱才能完全分离？解：根据公式得L=3.665m23在其流量为25mL/min，进样量为0.5mL饱和苯蒸汽，其质量经计算为0.11mg，得到的色谱峰的实测面积为384mV/s。求该热导检测器的灵敏度。SmA/m384/（0.1
6、110（-3）349000025. 丙烯和丁烯的混合物进入气相色谱柱得到如下数据：组分保留时间/min 峰宽/min空气丙烯(P)丁烯(B)0.53.54.80.20.81.0计算：（1）丁烯的分配比是多少？（2）丙烯和丁烯的分离度是多少？解： （1）kB= tR(B)/tM =(4.8-0.5)/0.5=8.6 (2) R = tR(B)-tR(P)/(1/2)(YB+YP)=(4.8-3.5) (1.0+0.8) =1.4428.化合物A与正二十四烷及正二十六烷相混合注入色谱柱进行试验，得调整保留时间为A, 10.20min, n-C24H50, 9.81min, n-C26H54, 11
7、.56min, 计算化合物A的保留指数。解；将有关数据代入公式得：I = (log10.2 log9.81)/(log11.56-log9.81)+24 100=242432.解：利用公式m=fA,A= hY1/2,可得质量m= fhY1/2，将上表的个数据带入可得M110.55，m223.73，m326.18则质量总和为m=m1+m2+m3=83则各组分的质量分数x1=12.7%x2=28.6%x3=31.5%1.从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。解：二者都是根据样品组分与流动相和固定相相互作用力的差别进行分离的。从仪器构造上看，液相色谱需要增加高压泵以提高
8、流动相的流动速度，克服阻力。同时液相色谱所采用的固定相种类要比气相色谱丰富的多，分离方式也比较多样。气相色谱的检测器主要采用热导检测器、氢焰检测器和火焰光度检测器等。而液相色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。但是二者均可与MS等联用。二者均具分离能力高、灵敏度高、分析速度快，操作方便等优点，但沸点太高的物质或热稳定性差的物质难以用气相色谱进行分析。而只要试样能够制成溶液，既可用于HPLC分析，而不受沸点高、热稳定性差、相对分子量大的限制。2.液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些? 与气相色谱相比较, 有哪些主要不同之处?解:液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动的流
9、动相传质、滞留的流动相传质以及柱外效应。在气相色谱中径向扩散往往比较显著，而液相色谱中径向扩散的影响较弱，往往可以忽略。另外，在液相色谱中还存在比较显著的滞留流动相传质及柱外效应。3. 在液相色谱中, 提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么?解:液相色谱中提高柱效的途径主要有:1.提高柱内填料装填的均匀性;2.改进固定相： 减小粒度; 选择薄壳形担体; 选用低粘度的流动相; 或 适当提高柱温其中,减小粒度是最有效的途径.4. 液相色谱有几种类型?它们的保留机理是什么? 在这些类型的应用中,最适宜分离的物质是什么?解:液相色谱有以下几种类型:液-液分配色谱; 液-固吸附色谱; 化学键合色谱
10、;离子交换色谱; 离子对色谱; 空间排阻色谱等.其中;液-液分配色谱的保留机理是通过组分在固定相和流动相间的多次分配进行分离的。可以分离各种无机、有机化合物。液-固吸附色谱是通过组分在两相间的多次吸附与解吸平衡实现分离的.最适宜分离的物质为中等相对分子质量的油溶性试样，凡是能够用薄层色谱分离的物质均可用此法分离。化学键合色谱中由于键合基团不能全部覆盖具有吸附能力的载体,所以同时遵循吸附和分配的机理,最适宜分离的物质为与液-液色谱相同。离子交换色谱和离子色谱是通过组分与固定相间亲合力差别而实现分离的.各种离子及在溶液中能够离解的物质均可实现分离，包括无机化合物、有机物及生物分子，如氨基酸、核酸及
11、蛋白质等。在离子对色谱色谱中,样品组分进入色谱柱后,组分的离子与对离子相互作用生成中性化合物,从而被固定相分配或吸附进而实现分离的.各种有机酸碱特别是核酸、核苷、生物碱等的分离是离子对色谱的特点。空间排阻色谱是利用凝胶固定相的孔径与被分离组分分子间的相对大小关系,而分离、分析的方法。最适宜分离的物质是：另外尚有手性色谱、胶束色谱、环糊精色谱及亲合色谱等机理。5何谓正相色谱与反相色谱？在应用上有何特点？答：正相色谱就是流动相的极性小于固定相的色谱类型。反向色谱就是流动相极性大于固定相的色谱类型。在正相色谱中，一般采用极性键合固定相，硅胶表面键合的是极性的有机基团，键合相的名称由键合上去的基团而定
12、。最常用的有氰基（-CN）、氨基（-NH2）、二醇基（DIOL）键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂，如烃类溶剂，或其中加入一定量的极性溶剂（如氯仿、醇、乙腈等），以调节流动相的洗脱强度。通常用于分离极性化合物。一般认为正相色谱的分离机制属于分配色谱。组分的分配比K值，随其极性的增加而增大，但随流动相中极性调节剂的极性增大（或浓度增大）而降低。同时，极性键合相的极性越大，组分的保留值越大。该法主要用于分离异构体，极性不同的化合物，特别是用来分离不同类型的化合物。在反相色谱中，一般采用非极性键合固定相，如硅胶-C18H37（简称ODS或C18）硅胶-苯基等，用强极性的溶剂为
13、流动相，如甲醇/水，乙腈/水，水和无机盐的缓冲液等。6.何谓化学键合固定相?它有什么突出的优点?解:利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面形成的固定相称为化学键合固定相.优点:1. 固定相表面没有液坑,比一般液体固定相传质快的多.2. 无固定相流失,增加了色谱柱的稳定性及寿命.3. 可以键合不同的官能团,能灵活地改变选择性,可应用与多种色谱类型及样品的分析.4. 有利于梯度洗提,也有利于配用灵敏的检测器和馏分的收集.7. 何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱?试述它们的基本原理.解:在离子色谱中检测器为电导检测器,以电解质溶液作为流动相,为了消除强电解质背景对电导检测器的干扰,通常除了
14、分析柱外,还增加一根抑制柱,这种双柱型离子色谱法称为化学抑制型离子色谱法.例如为了分离阴离子,常使用NaOH溶液为流动相，钠离子的干扰非常严重，这时可在分析柱后加一根抑制柱，其中装填高容量H+型阳离子交换树脂，通过离子交换，使NaOH转化为电导值很小的H2O，从而消除了背景电导的影响但是如果选用低电导的流动相（如10- 5 10-4M的苯甲酸盐或邻苯二甲酸盐），则由于背景电导较低，不干扰样品的检测，这时候不必加抑制柱，只使用分析柱，称为非抑制型离子色谱法何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？解：梯度洗提就是流动相中含有两种物质（或更多）不同极性的溶剂，在分离过程中按一定的程序连续
15、改变流动相中溶剂的配比和极性，通过流动相中极性的变化来改变被分离组分的容量因子k和选择性因子，以提高分离效果。梯度洗提与气相色谱中的程序升温类似，但是前者连续改变的是流动相的极性、pH或离子强度，而后者改变的温度程序升温也是改进气相色谱分离的重要手段高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有何不同之处？解：在液相色谱中为了承受高压，常常采用停流进样与高压定量进样阀进样的方式10以液相色谱进行制备有什么优点？解：以液相色谱进行制备时，分离条件温和，分离检测中不会导致试样被破坏，切易于回收原物1.电位测定法的根据是什么?解：对于一个氧化还原体系:Ox + ne- = Red根据能斯特方程式:E = E0Ox/Red + TR/nF ln (aOx/aRed)对于金属电极，还原态是纯金属,其活度是常数，定为1,故上式变为:可见,测定了电极电位,即可测定离子的活度(或在一定条件下确
