DNA重组技术的基本工具doc-泉州市第七中学首

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1、DNA重组技术的基本工具1实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序,切点在G和A之间,这是应用了酶的A酶的高高效性 B酶的专专一性 CC酶的的多样性性 D酶的催催化活性性受外界界条件影影响2以下说说法正确确的是 A所所有的限限制酶只只能识别别同一种种特定的的核苷酸酸序列BB质粒粒是基因因工程中中惟一的的运载体体C运运载体必必须具备备的条件件之一是是:具有有多个限限制酶切切点,以以便与外外源基因因连接DD基因因治疗主主要是对对有缺陷陷的细胞胞进行修修复3.下列黏黏性末端端属于同同一种限限制性内内切酶切

2、切割的是是( )ABCD4.下列四四条DNNA分子子,彼此此间具有有粘性末末端的一一组是 A B C D5依右图图有关基基因工程程的工具具酶功能能的叙述述,不正确的的是 A切断aa处的酶酶为限制制核酸性性内切酶酶 B连接aa处的酶酶为DNNA连接接酶C切断bb处的酶酶为解旋旋酶 D切断bb处的为为限制性性内切酶酶6不属于于质粒被被选为基基因运载载体的理理由是 A能复制制 B有多个个限制酶酶切点C具具有标记记基因 D它它是环状状DNAA7.基因工工程技术术也称为为DNAA重组技技术,其其实施必必须具备备的四个个必要条条件是A.目的基基因 限限制性内内切酶 运运载体 体细胞胞 B.重组DDNA R

3、NAA聚合酶酶 限制性性内切酶酶 连接接酶C.工具酶酶 目目的基因因 运运载体 受体细细胞D.模板DDNA 信使RRNA 质粒粒 受体细细胞8下列关关于各种种酶作用用的叙述述,不正正确的是是ADNAA连接酶酶能使不不同脱氧氧核苷酸酸的磷酸酸与脱氧氧核糖连连接BRNAA聚合酶酶能与基基因的特特定位点点结合,催催化遗传传信息的的转录C一种DDNA限限制酶能能识别多多种核苷苷酸序列列,切割割出多种种目的基基因D胰蛋白白酶能作作用于离离体的动动物组织织,使其其分散成成单个细细胞9.下列关关于限制制酶的说说法不正正确的是是A.限制酶酶广泛存存在于各各种生物物中,尤尤其在微微生物细细胞中分分布最多多B.不

4、同的的限制酶酶识别不不同的核核苷酸序序列C.限制酶酶能识别别不同的的核苷酸酸序列,体体现了酶酶的专一一性D.限制酶酶的作用用只是用用来提取取目的基基因10有关关基因工工程的叙叙述中,不正确的是 A.DNAA连接酶酶将黏性性未端的的碱基对对连接起起来 B.限制性性内切酶酶可用于于目的基基因的获获得 C.目的基基因须由由运载体体导入受受体细胞胞 D.人工合合成目的的基因不不用限制制性内切切酶11下图图所示限限制酶切切割基因因分子的的过程,从从图中可可知,该该限制酶酶能识别别的碱基基序列和和切点是是ACTTTAAGG,切点点在C和和T之间间 BCTTTAAAG,切切点在GG和A之之间CGAAATTC

5、C,切点点在G和和A之间间 DGAAATTTC,切切点在CC和T之之间 12.下列列关于质质粒的叙叙述,正正确的是是()A、质粒是是广泛存存在于细细菌细胞胞中的一一种颗粒粒状细胞胞器B、质粒是是细菌细细胞质中中能够自自主复制制的小型型环状DDNA分分子C、质粒只只有在导导入宿主主细胞后后才能在在宿主细细胞内复复制D、细菌质质粒的复复制过程程一定是是在宿主主细胞外外独立进进行的13科学学家常选选用的细细菌质粒粒往往带带有一个个抗菌素素抗性基基因,该该抗性基基因的主主要作用用是A提高受受体细胞胞在自然然环境中中的耐热热性 B有有利于检检测目的的基因否否导入受受体细胞胞C增加质质粒分子子的相对对分子

6、质质量 D便便于与外外源基因因连接14下图图是基因因工程主主要技术术环节的的一个基基本步骤骤,这一一步需用用到的工工具是ADNAA连接酶酶和解旋旋酶 BDDNA聚聚合酶和和限制性性核酸内内切酶C限制性性核酸内内切酶和和DNAA连接酶酶 DDDNA聚聚合酶和和RNAA聚合酶酶15限制制酶是一一种核酸酸切割酶酶,可辨辨识并切切割DNNA分子子上特定定的核苷苷酸碱基基序列。下下图为四四种限制制酶BaamHII,EcooRI,Hinnd以及Bggl的辨识识序列。箭箭头表示示每一种种限制酶酶的特定定切割部部位,其其中哪两两种限制制酶所切切割出来来的DNNA片段段末端可可以互补补黏合?其正确确的末端端互补

7、序序列为何何? A. BaamHII和EcooRI;末末端互补补序列AATTTB. BaamHII和Hinnd;末端端互补序序列GATTCC. EccoRII和Hinnd;末端端互补序序列AATTTD. BaamHII和BgllII;末末端互补补序列GATTC16在DDNA 测序工工作中,需需要将某某些限制制性内切切核酸酶酶的限制制位点在在 DNNA上定定位,使使其成为为 DNNA 分分子中的的物理参参照点。这这项工作作叫做“限制酶酶图谱的的构建”。假设设有以下下一项实实验:用用限制酶酶 Hinnd,BaamH和二者者的混合合物分别别降解一一个 44kb(11kb即即1千个个碱基对对)大小小的

8、线性性DNAA 分子子,降解解产物分分别进行行凝胶电电泳,在在电场的的作用下下,降解解产物分分开,如如下图所所示。据此分析,这这两种限限制性内内切核酸酸酶在该该DNAA 分子子上的限限制位点点数目是是以下哪哪一组?AHinnd1个,BBamHH2 个 BBHiind2个,BBamHH3个CHinnd2个,BBamHH1 个 DDHiind和BaamH各有2 个17.两个个核酸片片段在适适宜的条条件下,经经X酶的的作用,发发生下述述变化,则则X酶是是A.连接酶酶 B.RRNA聚聚合酶 CC.DNNA聚合合酶 DD.限制制酶18基因因工程中中涉及多多种工具具酶:(1)限制制性内切切酶是一一类能识识

9、别特定定核苷酸酸序列并并在特定定位点切切割双链链DNAA的“基因剪剪刀”。被限限制酶识识别的序序列往往往正反读读顺序相相同,断断裂的位位置交错错,但又又是围绕绕着一个个轴线(对对称轴)对对称排列列,如下下左图。PPstII和EccoRII都是限限制酶。请请补全下下右图中中的互补补链,画画出对称称轴以及及切割后后的产物物。 (2)DNNA连接接酶是基基因操作作的“针线”,其作作用是把把基于 能力而而粘贴在在一起但但存在的的切口封封闭,进进而才可可能形成成有意义义的 。(3)逆转转录酶也也常被用用于基因因工程,其其存在于于 (生物物)中,催催化以 为模板板合成DDNA的的过程。 19.利用用基因工

10、工程生产产蛋白质质药物,经经历了三三个发展展阶段。第第一阶段段,将人人的基因因转入细细菌细胞胞;第二二阶段,将将人的基基因转入入小鼠等等动物的的细胞。前前两个阶阶段都是是进行细细胞培养养,提取取药物。第第三阶段段,将人人的基因因转入活活的动物物体,饲饲养这些些动物,从从乳汁或或尿液中中提取药药物。(1)将人人的基因因转入异异种生物物的细胞胞或个体体内,能能够产生生药物蛋蛋白的原原理是基基因能控控制。(2)人的的基因能能和异种种生物的的基因拼拼接在一一起,是是因为它它们的分分子都具具有双螺螺旋结构构,都是是由四种种_构成,基基因中碱碱基配对对的规律律都是_。(3)人人的基因因在异种种生物细细胞中

11、表表达成蛋蛋白质时时,需要要经过和和翻译两两个步骤骤。在翻翻译中需需要的模模板是,原原料是氨氨基酸,直直接能源源是ATTP,搬搬运工兼兼装配工工是,将将氨基酸酸的肽键键连接成成蛋白质质的场所所是_,“翻翻译”可可理解为为将由_个“字字母”组组成的核核酸“语语言”翻翻译成由由个“字字母”组组成的蛋蛋白质“语语言”,从从整体来来看在翻翻译中充充任着“译译员”。(4)利用转基因牛、羊乳汁提取药物工艺简单,甚至可直接饮用治病。如果将药物蛋白基因移到动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中,利用转基因牛羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于:处于不同发育时期的动物都可生产药物。20.在某某一特定定的植物物

12、基因工工程中,用用土壤农农杆菌中中的Tii质粒作作为运载载体。把把目的基基因重组组入Tii质粒上上的T-DNAA片段中中,再将将重组的的T-DDNA插插入植物物细胞的的染色体体DNAA中。(1)科学学家在进进行上述述基因操操作时,要要用同一一种 分别切切割质粒粒和目的的基因,质质粒的黏黏性末端端与目的的基因DDNA片片段的黏黏性末端端就可通通过 而黏黏合。(2)将携携带抗除除草剂基基因的重重组Tii质粒导导入二倍倍体油菜菜细胞,经经培养、筛筛选获得得一株有有抗除草草剂特性性的转基基因植株株。经分分析,该该植株含含有一个个携带目目的基因因的T-DNAA片段,因因此可以以把它看看作是杂杂合子。理理论上,在在该转基基因植株株自交FF1代中,仍仍具有抗抗除草剂剂特性的的植株占占总数的的 , (3)种植植上述转转基因油油菜,它它所携带带的目的的基因可可以通过过花粉传传递给近近缘物种种,造成成“基因污污染”。如果果把目的的基因导导入叶绿绿体DNNA中,就就可以避避免“基因污污染”,原因因是 。

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