《拉曼光谱仪及拉曼光谱的原理及应用》由会员分享，可在线阅读，更多相关《拉曼光谱仪及拉曼光谱的原理及应用（28页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、拉曼光谱仪及拉曼光谱的原理及应用拉曼光谱仪及拉曼光谱的原理及应用拉曼光谱山于近儿年来以下儿项技术的集中发展而有了更广泛的应用。这些技术 是:CCD检测系统在近红外区域的高灵敏性，体积小而功率大的二极管激光器，与激发 激光及信号过滤整合的光纤探头。这些产品连同高口径短焦距的分光光度计，提供了 低荧光本底而高质量的拉曼光谱以及体积小、容易使用的拉曼光谱仪。（一）含义光照射到物质上发生弹性散射和非弹性散射.弹性散射的散射光是与激发光波长相 同的成分非弹性散射的散射光有比激发光波长长的和短的成分，统称为拉曼 效应当用波长比试样粒径小得多的单色光照射气体、液体或透明试样时，大部分的光会 按原来的方向透射
2、，而一小部分则按不同的角度散射开来，产生散射光。在垂直方向 观察时，除了与原入射光有相同频率的瑞利散射外，还有一系列对称分布着若干条很 弱的与入射光频率发生位移的拉曼谱线，这种现象称为拉曼效应。III于拉曼谱线的数位移的大小，谱线的长度直接与试样分子振动或转动能级有关。因此，与红外吸收光 谱类似，对拉曼光谱的研究，也可以得到有关分子振动或转动的信息。LI询拉曼光谱 分析技术已广泛应用于物质的鉴定，分子结构的研究谱线特征（二）拉曼散射光谱具有以下明显的特征：a. 拉曼散射谱线的波数虽然随入射光的波数而不同，但对同一样品，同一拉曼谱 线的位移与入射光的波长无关，只和样品的振动转动能级有关；b. 在
3、以波数为变量的拉曼光谱图上，斯托克斯线和反斯托克斯线对称地分布在瑞 利散射线两侧，这是由于在上述两种情况下分别相应于得到或失去了一个振动量子的 能量。c. 一般情况下，斯托克斯线比反斯托克斯线的强度大。这是山于Boltzmann分 布，处于振动基态上的粒子数远大于处于振动激发态上的粒子数。（三）拉曼光谱技术的优越性提供快速、简单、可重复、且更重要的是无损伤的定性定量分析，它无需样品准备，样品可直接通过光纤探头或者通过玻璃、石英、和光纤测量。此外1由于水的拉曼散射很微弱，拉曼光谱是研究水溶液中的生物样品和化学化合物的 理想工具。2拉曼一次可以同时覆盖50-4000波数的区间，可对有机物及无机物进
4、行分析。相 反，若让红外光谱覆盖相同的区间则必须改变光栅、光束分离器、滤波器和检测器3拉曼光谱谱峰清晰尖锐，更适合定量研究、数据库搜索、以及运用差异分析进行 定性研究。在化学结构分析中，独立的拉曼区间的强度可以和功能集团的数量相关。4因为激光束的直径在它的聚焦部位通常只有0.2-2毫米，常规拉曼光谱只需要少 量的样品就可以得到。这是拉曼光谱相对常规红外光谱一个很大的优势。而且，拉曼 显微镜物镜可将激光束进一步聚焦至20微米棋至更小，可分析更小面积的样品。5共振拉曼效应可以用来有选择性地增强大生物分子特个发色基团的振动，这些发 色基团的拉曼光强能被选择性地增强1000到10000倍。（四）儿种重
5、要的拉曼光谱分析技术1、单道检测的拉曼光谱分析技术2、以CCD为代表的多通道探测器用于拉曼光谱的检测仪的分析技术3、采用傅立叶变换技术的FT-Raman光谱分析技术4、共振拉曼光谱分析技术5表面增强拉曼效应分析技术（五）拉曼频移，拉曼光谱与分子极化率的关系1、拉曼频移:散射光频与激发光频之差，取决于分子振动能级的改变，所以它是 特征的，与入射光的波长无关，适应于分子结构的分析2、拉曼光谱与分子极化率的关系分子在静电场E中，极化感应偶极矩P为静电场E与极化率的乘积诱导偶极矩与外电场的强度之比为分子的极化率分子中两原子距离最大时，极化率也最大拉曼散射强度与极化率成正比例（六）应用激光光源的拉曼光谱
6、法应用激光具有单色性好、方向性强、亮度高、相干性好等特性，与表面增强拉曼效 应相结合，便产生了表面增强拉曼光谱。其灵墩度比常规拉曼光谱可提高104107倍， 加之活性载体表面选择吸附分子对荧光发射的抑制，使分析的信噪比大大提高。已应 用于生物、药物及环境分析中痕量物质的检测。共振拉曼光谱是建立在共振拉曼效应基础上的另一种激光拉曼光谱法。共振拉曼效应产生于激发光频率与待测分子的某个 电子吸收峰接近或重合时，这一分子的某个或儿个特征拉曼谱带强度可达到正常拉曼 谱带的lorioe倍，有利于低浓度和微量样品的检测。已用于无机、有机、生物大分 子、离子乃至活体组成的测定和研究。激光拉曼光谱与傅里叶变换红
7、外光谱相配合， 已成为分子结构研究的主要手段1、共振拉曼光谱的特点：(1) 、基频的强度可以达到瑞利线的强度。(2) 、泛频和合频的强度有时大于或等于基频的强度。(3) 、通过改变激发频率，使之仅与样品中某一物质发生共振，从而选择性的研究 某一物质。(4) 、和普通拉曼相比，其散射时间短，一般为10-1210-5So2、共振拉曼光谱的缺点：需要连续可调的激光器，以满足不同样品在不同区域的 吸收。(七) 电化学原位拉曼光谱法电化学原位拉曼光谱法，是利用物质分子对入射光所产生的频率发生较大变化的散 射现象，将单色入射光(包括圆偏振光和线偏振光)激发受电极电位调制的电极表面， 通过测定散射回来的拉曼
8、光谱信号(频率、强度和偏振性能的变化)与电极电位或电流 强度等的变化关系。一般物质分子的拉曼光谱很微弱，为了获得增强的信号，可采用 电极表面粗化的办法，可以得到强度高104-107倍的表面增强拉曼散射(Surface Enahanced Raman Scattering, SERS)光谱，当具有共振拉曼效应的分子吸附在粗化的电 极表面时，得到的是表面增强共振拉曼散射(SERRS)光谱，其强度乂能增强102-103。电化学原位拉曼光谱法的测量装置主要包括拉曼光谱仪和原位电化学拉曼池两个部 分。拉曼光谱仪由激光源、收集系统、分光系统和检测系统构成，光源一般采用能量集 中、功率密度高的激光，收集系统
9、山透镜组构成，分光系统采用光栅或陷波滤光片结合 光栅以滤除瑞利散射和杂散光以及分光检测系统采用光电倍增管检测器、半导体阵检测 器或多通道的电荷藕合器件。原位电化学拉曼池一般具有工作电极、辅助电极和参比电 极以及通气装置。为了避免腐蚀性溶液和气体侵蚀仪器，拉曼池必须配备光学窗口的密 封体系。在实验条件允许的情况下，为了尽量避免溶液信号的干扰，应采用薄层溶液（电 极与窗口间距为0.1,1mm）,这对于显微拉曼系统很重要，光学窗片或溶液层太厚会导致 显微系统的光路改变，使表面拉曼信号的收集效率降低。电极表面粗化的最常用方法是 电化学氧化-还原循环（Oxidation- Reduction Cycle
10、, ORC）法，一般可进行原位或非原 位ORC处理。LI前采用电化学原位拉曼光谱法测定的研究进展主要有：一是通过表面增强处理把 测检体系拓宽到过渡金属和半导体电极。虽然电化学原位拉曼光谱是现场检测较灵墩的 方法，但仅能有银、铜、金三种电极在可见光区能给出较强的SERS。许多学者试图在具 有重要应用背景的过渡金属电极和半导体电极上实现表面增强拉曼散射。二是通过分析 研究电极表面吸附物种的结构、取向及对象的SERS光谱与电化学参数的关系，对电化学 吸附现象作分子水平上的描述。三是通过改变调制电位的频率，可以得到在两个电位下 变化的“时间分辨谱”，以分析体系的SERS谱峰与电位的关系，解决了由于电极
11、表面 的SERS活性位随电位而变化而带来的问题。（八）拉曼信号的选择入射激光的功率，样品池厚度和光学系统的参数也对拉曼信号强度有很大的影响， 故多选用能产生较强拉曼信号并且其拉曼峰不与待测拉曼峰重叠的基质或外加物质的 分子作内标加以校正。其内标的选择原则和定量分析方法与其他光谱分析方法基本相 同。斯托克斯线能量减少，波长变长反斯托克斯线能量增加，波长变短(九) 拉曼光谱的应用方向拉曼光谱分析技术是以拉曼效应为基础建立起来的分子结构表征技术，其信号来源 与分子的振动和转动。拉曼光谱的分析方向有：定性分析:不同的物质具有不同的特征光谱，因此可以通过光谱进行定性分析。结构分析:对光谱谱带的分析，乂是
12、进行物质结构分析的基础。定量分析:根据物质对光谱的吸光度的特点，可以对物质的量有很好的分析能力。(十)拉曼光谱用于分析的优点和缺点1、拉曼光谱用于分析的优点拉曼光谱的分析方法不需要对样品进行前处理，也没有样品的制备过程，避免了一 些误差的产生，并且在分析过程中操作简便，测定时间短，灵敏度高等优点2、拉曼光谱用于分析的不足(1) 拉曼散射面积(2) 不同振动峰重叠和拉曼散射强度容易受光学系统参数等因素的影响(3) 荧光现象对傅立叶变换拉曼光谱分析的干扰(4) 在进行傅立叶变换光谱分析时，常出现曲线的非线性的问题(5) 任何一物质的引入都会对被测体体系带来某种程度的污染，这等于引入了 一些 误差的
13、可能性，会对分析的结果产生一定的影响(十一)新进展及发展前景十多年来，虽然已经有一些关于在高真空体系、大气下、以及固/液体系（电化学 体系）中研究单晶金属体系表面拉曼光谱的报道,89, 91,但直至近年光滑单晶电极体 系的SERS研究才取得了重要进展.Bryant等记录了以单分子层吸附在光滑Pt电极表面 的U塞吩拉曼谱,89, , Furtak等使用具有Kretchmann光学构型的ATR电解 池并利用表 面等离子体增强效应，获得了吸附物种在平滑的Ag（lll）单晶面上的弱SERS信 号,90,.山于拉曼光谱系统的检测灵敏度的限制，所获得的表面信号极弱，无法进行较 为详细的研究.Otto小组和
14、Futamata小组分别成功地采用Otto光学构 造的ATR电解 池，利用表面等离子激元增强方法获得了光滑单晶电极上相对较强的表面Raman信 号,92, 94,.前者发现不同的Cu单品电极表面的增强因子有所不同，有较高指数或台阶 的晶面的信号明显增强,92,. Futamata等英至可在Pt和Ni金属的单晶表面上观察到 SERS信号，计算表明其表面增强因子为1, 2个数量级,93,. U前可用于单晶表面电极体 系的SERS研究还局限于Raman散射截面很大的极少数分子，尚需进一步改进和寻找实 验方法，以拓宽可研究的分子体系.若能成功地将各种单晶表面电极的SERS信号与经 过不同粗糙方式处理的
15、电极表面信号进行系统地比较和研究，不但对定量研究SERS机 理和区分不同增强机制的贡献大有益处，而且将有利于提出正确和可黑的拉曼光谱的 表面选择定律.随着纳米科学技术的迅速发展，各类制备不同纳米颗粒以及二维有疗;纳米图案的 技术和方法将日益成熟，人们可以比较方便地在理论的指导下，寻找在过渡金属上产 生强SERS效应的最佳实验条件.这些突破无疑将为拉曼光谱技术广泛应用于各种过渡金属电极和单晶电 极体系的研究开创新局面.总之，通过摸索合适的表面处理方法并采用新一代高灵敬度 的拉曼谱仪，可将拉曼光谱研究拓展至一系列重要的过渡金属和半导体体系，进而将 该技术发展成为一个适用性广、研究能力强的表面（界面
16、）谱学工具，同时推动有关 表面（界面）谱学理论的发展.各种相关的检测和研究方法也很可能得到较迅速的发展和提高在提高检测灵敬度 的基础上，人们已不满足于仅仅检测电极表面物种，而是注重通过提高其检测分辨率 （包括谱带分辨、时间分辨和空间分辨）来研究电化学界面结构和表面分子的细节和 动态过程.今后的主要研究内容可能从稳态的界面结构和表面吸附逐渐扩展至其反应的 动态过程，并深入至分子内部的各基团，揭示分子水平上的化学反应（吸附）动力学 规律，研究表面物种间以及同电解质离子或溶剂分子间的弱相互作用等.例如将电化学 暂态技术（时间-电流法、超高速循环伏安法）同时间分辨光谱技术结合，开展时间分 辨为ms或us级的研究,93,.采用SERS同电化学暂态技术结合进行的时间分辨实验可检 测鉴别电化
