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1、摘要目的研究人参蛋白的抗辐射损伤作用。方法以60-Y射线一次性照射小鼠全身，观察人参蛋白对照射小 鼠外周血白细胞数，骨髓细胞微核数，红细胞超氧化物歧化酶活性， 肝脏丙二醛含量以及胸腺、脾脏指数的影响。结果人参蛋白能增加辐射后小鼠外周血白细胞数，减少骨髓细胞 微核数，增加红细胞活性，抑制肝脏含量升高，提高胸腺及脾脏脏体 指数。结论人参蛋白对Y射线所致小鼠辐射损伤有较好的保护作用。关键词人参蛋白；小鼠；辐射损伤人参为五加科植物人参的干燥 根。大量研究显示，人参单味药及复方药均具有明显的抗辐射作用 1，但目前研究大多针对人参皂昔及多糖类，认为皂昔与多糖是 人参抗辐射作用的主要成分26，对于蛋白类成分
2、抗辐射研究未 见报道。本实验通过观察人参蛋白对辐射小鼠损伤的保护作用，为进一步 研究人参蛋白的抗辐射作用奠定基础。1材料与仪器11药物5年生人参购自吉林靖宇县，为五加科植 物人参的干燥根。人参蛋白样品为本实验室制备，经蛋白含量试剂盒法测定蛋白含 量为80。12动物由吉林大学实验动物中心提供的小鼠，雄性，体质量18动物质量合格证号10-1023。13仪器与试剂贝克曼-库尔特5分类血球计数仪，公司;-212-201 双目光学显微镜，公司；-1240型紫外可见分光光度计，公司；试剂 盒、试剂盒，南京建成生物研究所。2方法21动物分组取40只小鼠，随机分为4组，即正常对照组， 辐射对照组，人参蛋白高剂
3、量组1及人参蛋白低剂量组05。各组均为灌胃给药，1次，对照组灌服等体积蒸馏水。连续给药7后，除正常对照组外，其余3组均实施一次性60-Y 射线全身照射，照射剂量为2。22外周血白细胞计数照射后24尾静脉采血20u，加入到0382 溶液中，充分混匀，加入血球计数板中，在显微镜下读取白细胞个数。23骨髓细胞微核计数照射后24小鼠颈椎脱臼处死，取胸骨，用 止血钳挤出骨髓液与玻片一端的小牛血清混匀，常规涂片。涂片自然干燥后放入甲醇中固定510。将固定好的涂片放入应用液中，染色1015。立即用蒸馏水冲洗，晾干，镜检。选择细胞完整、分散均匀、着色适当的区域，在油镜下观察。以有核细胞形态完好作为判断制片优劣
4、的标准。24红细胞活性及肝脏含量测定小鼠颈椎脱臼处死后，立即眼球 取血并剥取肝脏。全血经生理盐水冲洗，冷双蒸水混合、95%乙醇振荡、三氯甲烷 抽提制备抽提液，按照试剂盒说明书测定活力。肝组织经生理盐水冲洗，磷酸盐缓冲液匀浆制成5%组织匀浆液， 取上清按照试剂盒说明测定含量。25脏体指数计算照射24后，分别对各受试小鼠进行称重。小鼠处死后分别取出胸腺和脾脏称量，计算胸腺、脾脏的脏体指 数比。26数据处理与分析数据以土表示，组间差异按分布进行检验。3结果31人参蛋白对辐射小鼠血液白细胞数及骨髓细胞微核数 的影响显微镜下读取计数板中白细胞个数，计算计数池中4个大方格 中白细胞总数白细胞数109=4个
5、大方格中白细胞总数4X稀释倍数 X107；每只动物计数1000个嗜多染红细胞，计算骨髓细胞微核率， 以千分率表示。结果见表1。表1人参蛋白对白细胞数及骨髓微核数的影响略由表1可见，辐 射对照组与正常对照组比较，数明显降低，微核率明显升高，说明造 模成功。人参蛋白组较辐射对照组小鼠数明显增多，微核率明显降低，说 明人参蛋白可对抗辐射所致白细胞数降低及微核数升高。32人参蛋白对辐射小鼠活性及含量的影响按照试剂盒方法分别 测定红细胞活性及肝脏含量，并按照试剂盒所示公式进行计算。结果见表2。表2人参蛋白对活性及含量的影响略由表2可见，辐射对照组与 正常对照组比较，活性明显降低、含量明显升高，说明造模成
6、功。人参蛋白组与辐射对照组比较，活性明显升高，且成一定量效关 系，说明人参蛋白可对抗辐射所致活性降低；含量虽无明显变化但有 降低趋势，且成一定量效关系，说明人参蛋白可能具有抑制小鼠含量 升高的作用。33人参蛋白对辐射小鼠胸腺及脾脏指数的影响小鼠处死后称取 胸腺、脾脏重量，并与处死前当天小鼠体质量进行比较，计算脏体系 数比。结果见表3。表3人参蛋白对胸腺及脾脏指数的影响略由表3可见，辐射对照 组与正常对照组比较，胸腺及脾脏指数明显降低，说明造模成功。人参蛋白组与辐射对照组比较，胸腺指数及高剂量脾脏指数明显 升高，说明人参蛋白可对抗辐射所致胸腺及脾脏指数降低，且成一定 量效关系。综上，给予人参蛋白
7、能有效预防Y射线照射引起的小鼠白细胞 数减少、骨髓微核数增加、红细胞活性降低及胸腺、脾脏指数降低， 对含量升高虽无明显抑制作用，但有一定抑制趋势。4讨论辐射对生物体的危害较大，可以直接作用于、蛋白质及酶 类，使分子变性、细胞结构破坏；也可以作用于机体内水分子，使其 产生大量的具有强氧化性能的自由基，致使机体代谢紊乱，引起免疫、 神经和内分泌系统的调节功能障碍等一系列病变7。外周血白细胞数减少、骨髓细胞微核数增高、血或组织中活性降 低等均为一次性全身Y射线照射引起辐射损伤的主要表现。白细胞又称白血球，作为免疫系统的一部分帮助身体抵抗传染病 以及外来的东西，白细胞急剧减少可引起血液病等多种免疫性疾
8、病。微核是在细胞有丝分裂后期没有进入细胞核而留在细胞质中的 染色体或片段，它在末期以后，单独形成一个或几个规则的次核，由 于比核小得多故称微核。微核的多少直接反映染色体的损伤程度，也间接代表机体受辐射 损伤的状况。另外，正常组织受到辐射后，会产生大量自由基，后者作用于生 物膜引起脂质过氧化，造成生物膜功能和代谢的改变。作为机体组织主要清除自由基的抗氧化酶，其活力的高低可间接 反映机体清除自由基的能力；是脂质过氧化的主要产物，其含量高低 反映机体的自由基水平和氧化应激水平8。本实验中人参蛋白能明显抑制受照小鼠的白细胞数减少、微核数 增多、活性降低、含量增加，说明人参蛋白对辐射损伤小鼠具有很好 的
9、保护作用。同时，人参蛋白提高使受照小鼠的胸腺、脾脏指数增加，反映了 人参蛋白有提高免疫力的作用。综上，我们认为，人参蛋白具有有效防治辐射对机体损伤的作用， 且认为人参蛋白的抗辐射作用可能与其增强免疫力，清除自由基作用 密切相关。对于人参蛋白的其他作用机理，我们正在进一步研究中。1邬蓉，高守红，辛海量人参抗辐射损伤研究概况药学实 践杂志，2007,256364 2姜建华，张学进，王育丽人参皂昔对60照射 小鼠不良反应的影响浙江中西医结合杂志,2005,15116823,1 ,2006,444517 4金光辉,刘树铮，刘扬，等人参组甙对紫外线辐 射致皮肤角质形成细胞损伤的保护作用口中华放射医学与防护杂 志，2002,226420 5刘丽波，孙晓玲,张海英，等人参三醇组昔对小鼠 骨髓细胞染色体辐射的防护作用吉林大学学报,2002,28238 6 李校坤，林灼锋，黄亚东，等人参三醇组甙抗辐射作用的研究中药 材,2002,2511805 7吴红星，杨剑婷抗辐射剂的研究现状放射 免疫学杂志,2005,18158 8崔凤梅，聂继华，李建祥，等黑风蜂胶抗 辐射损伤的实验研究工业卫生与职业病,2006,325283
