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1、人唾液粘蛋白 1(MG1) 酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T10pg/ml-320pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中唾液粘蛋白1(MG1) 含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人唾液粘蛋白1(MG1) 水平。用纯化的人唾液粘蛋白 1(MG1) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入唾液粘蛋白1(MG1) ，再与 HRP 标记的唾液粘蛋白 1(MG1) 抗体结合，形成抗体-抗原 -酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色
2、。 颜色的深浅和样品中的唾液粘蛋白1(MG1) 呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中人唾液粘蛋白1(MG1) 浓度。试剂盒组成130 倍浓缩洗涤液20ml 1 瓶7终止液6ml 1 瓶2酶标试剂6ml 1 瓶8标准品（ 640pg/ml ）0.5ml 1 瓶3酶标包被板12孔8条9标准品稀释液1.5ml 1 瓶4样品稀释液6ml 1 瓶10说明书1 份5显色剂 A液6ml 1 瓶11封板膜2 张6显色剂 B液6ml 1/瓶12密封袋1 个标本要求1标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于
3、-20保存，但应避免反复冻融2不能检测含NaN3的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释： 本试剂盒提供原倍标准品一支， 用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。320pg/ml5 号标准品150l 的原倍标准品加入150l 标准品稀释液160pg/ml4 号标准品150l 的 5 号标准品加入150l 标准品稀释液80pg/ml3 号标准品150l 的 4 号标准品加入150l 标准品稀释液40pg/ml2 号标准品150l 的 3 号标准品加入150l 标准品稀释液20pg/ml1 号标准品150l 的 2 号标准品加入150l 标准品稀释液2.加样
4、： 分别设空白孔 （空白对照孔不加样品及酶标试剂， 其余各步操作相同） 、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50l，待测样品孔中先加样品稀释液 40l，然后再加待测样品 10l（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37温育 30 分钟。4.配液：将 30 倍（ 48T 的 20 倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50l，空白孔除外。7. 温育：操作同 3。8. 洗涤：
5、操作同 5。9. 显色：每孔先加入显色剂 A50 l，再加入显色剂 B50l，轻轻震荡混匀， 37避光显色10 分钟.10. 终止：每孔加终止液 50l，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（液后 15 分钟以内进行。操作程序总结：OD值）。 测定应在加终止计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式， 将样品的 OD 值代入方程式， 计算出样品浓度， 再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事
6、项1试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（ n 5）。5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6底物请避光保存。7严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1试剂盒保存： ； 2-8。2有效期： 6 个月
