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1、肯定是。原因：很明显的一个地方就是他的分子里面有一个孤立的羰基，而羰基的氧原子 是强吸电子基团，它的吸电子能力远大于羟基的吸电子能力，而醚键的极性更是 微不足道。这样分子中的极性主要是由于羰基的作用，虽然分子中有很多的羟基， 但它们的分布很疏散，根本比不过一个羰基的威力，这样就导致分子中几乎所有 的负电荷集中在羰基氧原子上，而烃基是疏电子集团，他几乎不影响分子的极性， 这样正电荷也就落在了羰基碳原子上。由于他的极性存在，也就使得这种化合物 可溶于水。0H【分子式】：c27h30oi6【分子量】:610.53流动相：流动相首选甲醇-水，其比例根据被测药物的极性而定，被测药物的极性小则70% 甲醇
2、先试，被测药物的极性大，则30%甲醇先试，被测药物的极性中等，则50%甲醇先试， 当然还要根据药物结构的不同，选用一些添加剂和缓冲盐等。色谱柱：柱子以ODS柱，即C18为通用。被测药物的极性小，可用C8或氰基柱等，被测 药物的极性大，则可选用氨基柱或能用纯水洗的改性柱。检测波长：如果所测药物不是在近U区215nm，波长只要能满足检测需要，应以靠长波方 向及不是坡度太大之处为宜，这是药品分析与生物分析的不同之处。流动相:还 可通过调节缓冲液的PH来改善峰型，如酸性的药物可加入适当的酸如磷酸、乙酸 等，碱性药物可加入适当的碱如三乙胺等药物分析液相色谱流动相应用小常识一、液相色谱流动相的性质要求一个
3、理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质 在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质 在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组 成的函数。塔板数N 一般与流动相的粘度成反比。所以选择流动相时应 考虑以下几个方面：流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的 离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而 改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相 不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。纯度。色谱柱的寿命 与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含
4、杂质在柱上积累时。 必须与检测器匹配。使用UV检测器时，所用流动相在检测波长下应 没有吸收，或吸收很小。当使用示差折光检测器时，应选择折光系数与 样品差别较大的溶剂作流动相，以提高灵敏度。 粘度要低（应2cp）。高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质，降低柱 效，还会使柱压降增加，使分离时间延长。最好选择沸点在100C以下 的流动相。二、液相色谱流动相的pH值采用反相色谱法分离弱酸（3pKa7）或弱碱（7pKa8）样品时，通 过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上 的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相 的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱
5、酸的pKa值时， 弱酸主要以分子形式存在；对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常 在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶 液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L 磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。注：流动相中加入有机胺可 以减弱碱性溶质与残余硅醇基的相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。所 以在这种情况下有机胺（如三乙胺）又称为减尾剂或除尾剂。三、液相色谱流动相的选择在化学键合相色谱法中，溶剂的洗脱能力 直接与它的极性相关。在正相色谱中，溶剂的强度随极性的增强而增加； BR正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。反相色谱的流动
6、相通常以水作基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶 的极性调整剂，如甲醇、乙腊、四氢呋喃等。极性调整剂的性质及其所 占比例对溶质的保留值和分离选择性有显著影响。一般情况下，甲醇- 水系统已能满足多数样品的分离要求，且流动相粘度小、价格低，是反 相色谱最常用的流动相。但Snyder则推荐采用乙腊-水系统做初始实验， 因为与甲醇相比，乙腊的溶剂强度较高且粘度较小，并可满足在紫外 205nm处检测的要求，因此，综合来看，乙腊水系统要优于甲醇-水系 统，但价格较贵。在分离含极性差别较大的多组分样品时，为了使各 组分均有合适的k值并分离良好，也需采用梯度洗脱技术。四、液相色谱流动相的滤过所有溶剂使用前都必须
7、经0.45pm （或0.22pm）滤过，以除去杂质微粒， 色谱纯试剂也不例外（除非在标签上标町已滤过）。用滤膜过滤时， 特别要注意分清有机相（脂溶性）滤膜和水相（水溶性）滤膜。有机相 滤膜一般用于过滤有机溶剂，过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜 只能用于过滤水溶液，严禁用于有机溶剂，否则滤膜会被溶解！溶有滤 膜的溶剂不得用于HPLC。对于混合流动相，可在混合前分别滤过，如 需混合后滤过，首选有机相滤膜。现在已有混合型滤膜出售。五、液相色谱流动相的脱气所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。 气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至 使无法检测。此
8、外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固 定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或 分析结果带来误差。溶解氧能与某些溶剂（如甲醇、四氢呋喃）形成 有紫外吸收的络合物，此络合物会提高背景吸收（特别是在260nm以 下），并导致检测灵敏度的轻微降低，但更重要的是，会在梯度淋洗时 造成基线漂移。在荧光检测中，溶解氧在一定条件下还会引起淬灭现象， 特别是对芳香烃、脂肪醛、酮等。在某些情况下，荧光响应可降低达 95%。在电化学检测中（特别是还原电化学法），氧的影响更大。除 去流动相中的溶解氧将大大提高UV检测器的性能，也将改善在一些荧 光检测应用中的灵敏度。超声脱气比较好，
9、10-20分钟的超声处理对许 多有机溶剂或有机溶剂/水混合液的脱气是足够了，此法不影响溶剂组 成。超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触，以免玻璃瓶破裂， 容器内液面不要高出水面太多。六、液相色谱流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料 容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导 致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二 氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应尽量新鲜配 制使用。如确需贮存，可在冰箱内冷藏，并在短期内使用完毕。PKa为4.5
10、的化合物，流动相PH该怎么选择？为了保证样品外，也就是最好是大于5.5或低于3.5。另外要注意以下3个方面：1. 所选用流动相一定要能将峰检出一一这个是基础条件，相信大家都 知道。2. 流动相如为缓冲液，它的pH值应在它本身PKa的上下1个pH值 内，如超出此范围，缓冲作用将大大减弱。3. 一般检测柱是C18，但使用C18柱时，流动相的pH值应在28之 间，否则对柱子伤害较大。根据以上要求，请选择适合自己实验的流动相。c18反相柱对非极性的物质保留充分峰形对称，所以如果你的化合物是 弱酸，记得好像流动相pHpKa-2时，弱酸就会基本以游离态存在，呈 非极性，达很好保留出很好峰形！所以你的流动形
11、相就的选择22.5当溶液PH值等于化合物的pKa时，化合物半解离。在pKa1.5的范 围内，保留随PH值的变化而变化，超过此PH值范围，化合物完全解 离或不解离，保留随PH值的变化很小。了解化合物的pKa值，可在pKa1.5的范围内调节流动相的PH值， 以改变其保留，达到成分分离的目的。或者，使流动相PH值超出这一 范围，以保持保留的恒定，使建立的方法具有耐用性。可参考药物分析化学工业出版社，盛龙生等P235237反相液相色谱中流动相pH的确定反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析 中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性
12、十分重 要，不恰当的PH值可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰或肩峰，而尖锐 的，对称的峰是定量分析中获得低的检测限以，两次分析之间较低的相 对标准偏差（RSD）和保留时间的高重现性的前提。我们将讨论在使用 缓冲液时如何选择缓冲液的PH值，以及如何选择正确的缓冲体系。什么时候需要缓冲溶液？在反相液相色谱分析中，流动相的PH值一般在2.5-7之间，当被分 析物在反相条件下可离解，或样品的PH值在2.5-7之外时，就需要 缓冲液。在反相条件下可离解的化合物一般都有氨基和羧基，他们的 Pka在1-11之间，选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团以 一种形式存在，离子形式或中性化合物的形式。如果样品的P
13、H值对柱 子有伤害，则缓冲溶液可使其变温和从而减小其危害。如何选择缓冲液PH值在选择缓冲液PH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka 两个PH值单位的，有助于获得好的、尖锐的峰，从HH公式：PH =Pka+log (A-/A)得知，溶液PH值高于或低于Pka两个单位，化合 物中99%以一种形式存在，而一种形式存在的化合物才能获得好的尖 锐的峰。如果选择不到合适的，样品的pKa与流动相的pH非常接近，那么流动 相pH微小的变化，都会引起样品保留时间较大的变动。当化合物只有氨基时，缓冲体系的选择十分简单，大多数氨基化合物在 PH值小于9时都被质子化，所以所有PH值在7或更低的溶液均适合
14、 应用，你也许会问水的PH值大约是7,为什么还用缓冲盐，因为缓冲 盐有助于增加方法的可靠性，以及色谱峰的尖锐性，PH值的降低有助 于氨基化合物保留的减弱，减小化合物与硅胶表面硅羟基的作用，而使 峰更尖锐，从表1可值，任何缓冲液均可应用于氨基化合物的分析， 但我们认为PH值等于3的磷酸钾盐最适合用于氨基化合物的分析。在上面两个例子中，PH=3的磷酸钾盐都能获得良好的应用，在一般情 况下，它是含羧基和氨基化合物分析中最好的缓冲液，并且我们认为在 氨基化合物分析中钾盐比钠盐更好。为离子对试剂选择缓冲液为应用离子对试剂的方法选择缓冲液的过程是相似的，离子对试剂例如 四丁基铵的盐，十四烷基横酸钠等，在流
15、动相中可与化合物中可离解的 官能团配对，在缓冲液中以离子形式存在的化合物就需要应用离子对试 剂。应用缓冲液PH值来调节方法选择性如前面提到的，氨基化合物的保留随PH的减小而降低，这个特性可以 用来调节方法的选择性，如果两个化合物共流出，一个含有氨基，适当 改变PH值就可以用来分离这一物质对。由于可离解化合物的选择性依 靠PH值，所以变化PH值也可以用来鉴别未知化合物的官能团，如果 PH值变小，出峰便快，则化合物中可能存在氨基，当PH变大,化合物 出峰很快，或流出在死时间处，化合物可能是一种羧酸，因为羧基离子 化后流出大大快于比质子化的中性化合物。总结正确选择缓冲溶液在反相液相色谱方法中对于优化
16、尖峰，捡出限，以及 获得稳定的保留时间十分重要，如果你知道化合物官能团信息和化合物 的Pka值这一过程将十分简单。许多试剂检测都涉及到标准曲线的问题，标准曲线做的好与坏会直 接影响到实验的结果，甚至是关系到实验的成败，那么究竟如何绘制或 制作标准曲线呢？一、做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把 做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结 果无从谈起。2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并 且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段，即曲线几乎成直线的范围内。3、最好采用倍比稀
