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1、文档供参考，可复制、编制，期待您的好评与关注！ Na3VO4 原矾酸钠 分子量：183.91溶解性：溶于水。原矾酸钠(Sodium orthovanadate)需要经过处理以后才能成为激活的矾酸钠(Pervanadate)，激活的矾酸钠才具有抑制去磷酸化的作用。100mM原矾酸钠激活储存液配制(1). 取0.183克的原矾酸钠溶解于10ml的双蒸水中，加酸调节PH至10(颜色变黄)。(2). 煮至无色(3). 室温冷却(4). 重调pH至10(5). 重复(1)(2)(3)(4)直至溶液保持无色，并且pH稳定于10，分装100ul/管。 贮存液100mM， -20度保存。使用：工作浓度0.02
2、5-2mM。Pervanadate Exp-11-2x10*6 PBMC/100ul/EP tube1. Cell are rested in 100 ul complete medium for 30 min at 37 degree; Warm 4% Paraformaldehyde(使用常规固定细胞用的) at 37 degree2. Stimulations at 37 degree:Wells：A. Medium 10minB. Pervanadate (25 M) 2minC. Pervanadate (25 M) 10min3. Add 100 ul 4% Paraformald
3、ehyde to corresponding tubes, gently mix, wait for 10min at 37 degree. 4. Incubate cells in the dark at room temperature for another 10 minutes. 5. Wash twice with FACS buffer.6. Do the following staining(, in a volume of 50 ul:RT 15 min1CD20PECy71/500 胞内染色1) 细胞采用Perm/Wash 洗涤2次 2) 进行下面的染色，抗体配在Perm/Wash中，室温 30分钟PE p-Syk(Y348) 1/50 3) Perm/Wash 洗涤2次4) 悬浮在FACS buffer 中，获取 /
