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1、 全自动血细胞分析SOP一，检验目的及原理 1，目的：用BC-3000 Plus 全自动血细胞分析仪，在临床和实验室定量分析血液细胞，对人体的血液中三种有形成分（红细胞，白细胞，血小板）的19项参数和3个直方图进行分析。是人体血液的基本生理病理指标之一。白细胞计数WBC淋巴细胞计数Lymph#中间细胞计数Mid#中性粒细胞计数Gran#淋巴细胞百分比Lymph%中间细胞百分比Mid%中性粒细胞百分比Gran%红细胞计数RBC血红蛋白HGB平均红细胞体积MCV平均红细胞血红蛋白含量MCH平均红细胞血红蛋白浓度MCHC红细胞分布宽度变异系数RDW-CV红细胞分布宽度标准差RDW-SD红细胞压积HC
2、T血小板计数PLT平均血小板体积MPV血小板分布宽度PDW血小板压积PCT白细胞分布直方图WBC Histogram红细胞分布直方图RBC Histogram血小板分布直方图PLT Histogram对患者和健康人群来讲，观察有无各种原因引起的贫血，出血和失血，目前机体有无细菌及病毒感染，可筛查出各种血液病，如白血病，血小板减少性紫癜等。 2，原理：电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释，用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下，分别通过各自的计数微孔，流入管道，通过两个光电传感器，在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
3、 用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。电极插在液体中计数微孔的两边，在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境，根据血细胞非传导性的性质，当有细胞通过计数微孔时，将引起阻抗的变化，阻抗变化的大小与细胞体积成正比。WBC根据体积的大小，它有多种形态，由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同，WBC的体积大小会发生变化。在一定的程序控制下，显示出WBC 的三分类淋巴细胞、中间细胞（嗜酸嗜碱单核）和中性粒细胞。被稀释的血样加入溶血剂后，红细胞溶解，释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂结合形成复合物，用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强，用这个透过光强与空白状态的透过
4、光强相比较，得到血红蛋白浓度（空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态）。二，标本1，标本种类：末梢血为200-300微升，静脉血2毫升。2，采集标本容器及添加剂：容器：末梢血为一次性朔料试管，静脉血为真空采血管。添加剂：不同实验使用不同的抗凝剂，不能互相代替。血常规用EDTA-k2抗凝。3，采集方法：毛细血管采集或静脉穿刺采集。采集时间：患者随到随时采集。4，标本运送：标本采集后，应及时送检。5，标本接受：标本的编号与化验单上的编号要一致，清楚，正确及完整。6，准备与保存：室温静置10-15分钟，充分混匀后上机检测。血液常规标本一般保存在室温24小时。三，设备与试剂1，设备：BC-3000
5、 Plus 全自动血细胞分析仪。深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产。产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400522号。2，专用试剂： 稀释液：M-30PD，等渗溶液，具有特定的电导值，为细胞计数提供稳定的环境。作为人体血细胞计数，体积测量以及白细胞分类计数时的稀释液使用。本品应为透明液体，不得有沉淀，悬浮物和絮状物。主要成份，NaCl，Na2SO4，缓冲剂，抗菌剂。本品2-30保存期2年。开瓶后，使用温度15-30，有效期60天。 产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400276号。 冲洗液：M-30PR， 不含蛋白酶和次氯酸钠（NaCIO)等强蛋白清除剂的电解质溶液，用于仪器
6、的进样孔，阀和管路系统的清洁和冲洗。本品应为透明液体，不得有沉淀，悬浮物和絮状物。主要成份，NaCl，KCl，Na2SO4，缓冲剂，抗菌剂和表面活性剂。本品2-30保存期2年。开瓶后，使用温度15-30，有效期60天。产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400303号。 无氰溶血剂：M-30PCFL，能溶解红细胞，与血红蛋白形成复合物。用于白细胞计数，白细胞分群和血红蛋白测定。本品应为透明液体，不得有沉淀，悬浮物和絮状物。主要成份，NaCl，KCl，Na2SO4，缓冲剂，抗菌剂和表面活性剂。本品2-30保存期2年。开瓶后，使用温度15-30，有效期60天。产品注册号：粤食药监械（准）字2
7、005第2400274号。 E-Z清洗液（酶清洗液）：M-30PE，含有蛋白水解酶的电解质溶液，能有效地清除蛋白污渍，用于仪器的进样器，阀和管路系统的清洁和冲洗。本品应为透明液体，不得有沉淀，悬浮物和絮状物。主要成份，NaCl，缓冲剂，抗菌剂，表面活性剂，蛋白水解酶。本品2-30保存期2年。开瓶后，使用温度15-30，有效期60天。产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400303号。 探头清洁液：M-30PP，本品为含有次氯酸钠的电解质溶液，用于仪器的进样器，的清洁和冲洗。主要成份，NaOH，次氯酸钠（NaCIO)，表面活性剂。本品2-30保存期2年。开瓶后，使用温度15-30，有效期6
8、0天。产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400303号。四，操作步骤 1, 开机前的准备： 检查试剂（稀释液，冲洗液，溶血剂）是否足量，有无浑浊变质。 试剂管路连接正常否，管道有无扭结。 并倒空废液瓶。 电源连接是否正常。 2，开机启动： 打开仪器主机后面的电源开关。 电源指示灯燃亮，仪器内部进行初始化，进行自检。 自动冲洗内部管路，自动测量本底。 80秒钟后进入计数界面。 3，本底检查： 出现计数界面后，仪器自动测量本底数值显示在屏幕上，本底结果要求： WBC0.3 RBC0.03 HGB1 PLT10 如果本底没有达到仪器的要求，仪器将会提示“本底异常”，请执行清洗或维护程序。 4
9、，室内质控操作： 5，全血测量： 在计数界面下，按模式键，将模式设置为“全血”。 用K2EDTA抗凝剂作抗凝血标本。 混匀抗凝血后，送到采样针下，让采样针插入抗凝血。 按开始键，开始对样本计数。 58秒后测试结果显示在屏幕上。 按“打印”键，结果打印出来。 6，末梢血测量： 在计数界面下，按模式键，将模式设置为“预稀释”。 按“稀释液”，按开始键，用试管从采样针下取0.7ml稀释液。 将毛细血管采取的20l末梢血标本，迅速注入盛有0.7ml的稀释液的试管中，制成稀释血样（注意针刺得要深，用不起毛的纸巾拭去第一滴血） 制好的稀释血样要摇匀（注意不要剧烈震荡，否则有可能会因产生微小气泡导致计数值不
10、准） 将预稀释血样放置3分钟后，再次摇匀，放于采样针下，按开始键计数。 58秒后测试结果显示在屏幕上。 按“打印”键，结果打印出来。 7，关机： 每天测试完毕一定要用E-Z清洗液执行“关机”程序，等待屏幕提示“关闭电源”后关掉主机电源。WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、Lymph#、Lymph%、Gran#、Gran%六，结果分析与报告1，复查标准：HGB凡低于80g/L，高于170g/L者应进行复查。WBC凡低于3*109/L或高于20*109/L者应复查。凡直方图有明显异常者，必须推片染色油镜分类。PLT低于5109/L或高于35109/L应复查 2，按照仪
11、器模式出血细胞分析检验报告。七，参考值与临床意义： 1. 血红蛋白测定（HGB）：120-160g/L降低：贫血、白血病、大量失血及钩虫病等。增高：慢性缺氧（肺气肿和先天性心脏病等）、严重脱水、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒及真性红细胞增多症等时。2. 红细胞计数（RBC）：4.0-5.51012/L临床意义同血红蛋白，巨幼红细胞贫血时减少更为明显。3. 红细胞压积（HCT）：0.42-0.49增高：失水和大面积烧伤等所致的血液浓缩以及真性红细胞增多症时。降低：贫血及血液稀释时。4. 红细胞平均容积（MCV）： 82-92fl用于贫血分类：增大为巨红细胞性贫血，减小为小细胞性贫血（如严重缺铁性贫
12、血）和遗传性球型红细胞增多症；正常红细胞性贫血时正常。5. 红细胞平均血红蛋白含量（MCH）：27-31pg用于贫血分类：增加见于大细胞性贫血，减少见于单纯小细胞性贫血和小细胞低色素贫血。6. 红细胞平均血红蛋白浓度（MCHG）：320-360g/L大细胞性贫血正常，单纯小细胞性贫血时正常，小细胞低色素性贫血时减小。贫血形态分类MCVMCHMCHC病因大细胞性贫血巨红细胞性贫血，恶性贫血正细胞性贫血急性失血，急性溶血，再障，白血病单纯小细胞性贫血慢性感染，炎症，肝病，恶性肿瘤，风湿疾病小细胞低色素性血缺铁性，地中海性，铁粒幼细胞性贫血7. 红细胞分布宽度（RDW）： 11.5-14.5%是反映
13、血液中红细胞体积变异的参数，以测得红细胞体积大小的变异系数表示。RDW与MCV结合可将贫血分为小细胞均一性贫血（MCVRDW正常，如地中海贫血），小细胞不均一性贫血（MCVRDW，如缺铁性贫血），正细胞均一性贫血（MCV，RDW均正常，常见急性失血和再生障碍性贫血），正细胞不均一性贫血（MCV正常RDW，如早期缺铁性贫血和急性溶血性贫血），大细胞均一性贫血（MCV RDW正常，如慢性再障）。大细胞不均一性贫血（MCV 和RDW均，如巨幼细胞性贫血和恶性贫血）。8. 白细胞计数（WBC）： 4.0-10.0109/L增多：细菌性感染、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、白血病和应激状态（急性
14、出血和大手术）等增多（妊娠后期、月经期、饭后、剧烈运动后可有生理性增加）。 减少：病毒感染、伤害及副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血、极严重感染、放射性辐照、肿瘤化疗后和非白血性白血病等。9. 白细胞分类（DC）：正常参考值见下表检测项目英文缩写参考值中性粒细胞百分比NEUT %0.5-0.7淋巴细胞百分比LYMPH %0.2-0.4单核细胞百分比MONO %0.03-0.08嗜酸性粒细胞百分比EO %0.005-0.05嗜碱性粒细胞百分比BASO %0.000-0.005中性粒细胞绝对值2， NEUT #3.0-5.0109/L淋巴细胞绝对值LYMPH #1.0-3.0109/L单核细胞绝对值MONO #0.067-0.325109/L嗜酸性粒细胞绝对值EO #0.02-0.05109/L嗜碱性粒细胞绝对值BASO #0.005-0.05109/L中性粒细胞：增多见于急性化脓性细菌感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后和尿毒症等；其减少见于伤寒和副伤寒、疟疾、粒细胞缺乏症、放射性辐照和肿瘤化疗。 嗜酸性粒细胞增多见于过敏性疾病、寄生虫病等；其减
