高效液相色谱仪使用方法及管理维护

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1、精品文档高效液相色谱仪使用方法及管理维护一操作流程:1) 打开计算机 后 自 动 弹 开 CAG Bootpserver 菜单 通信成功。2) 打开色谱仪开关, 进入在线工作站。 ( 红色 : 未就绪 )3) 预热 30 min 即可。 ( 黄 未就绪, 绿 已就绪, 蓝 采集数据, 红报警 )4) 设置泵。点击 泵 检测器 开关, 左键点击 泵 Solvent bottles Solvent Bottles Fillng: Instrument 1 设置每瓶中实际液体量、最低液体量及瓶容量。5) 排气泡。若新换流动相或长时间没开机,应向左旋开排气阀, 逐个流动相瓶排气泡, 排气时应逐渐升高流

2、速 ( 1 2 mL/min), 再逐渐降低流速。( 1) 在对话框中点击相应瓶A 、B、C、D 图标 Set up Pump 。( 2)出现 Set up Pump: Instrument 1 设置 Flow 流速为 1. 0和瓶 B 、C、D 的百分比 ( 例如 : A 为 100 、B 为 0 、C 为 0 、D 为 0) 即排 A内的空气 ) Pressure Limits (压力 ) 0 200之间 ; Timetable( 设置梯度洗脱 ) 。 ( 3) 改变流速为 1. 5 OK ! (当没有气泡即洗脱完毕,向右旋关闭排气阀, 最后将流速调至使用流速 大约 1. 0 mL/min

3、 。)依次排 B 、 C、 D 的气泡。6) 编辑检测方法。( 1)首先编辑方法前将排气阀门关闭,将流速逐渐降至 1. 0 mL/min 。( 2)点击 Method Edit Entire Method 。( 3)弹出对话框 Edit Method: Instrument 1 a 方法信息 ; b参数设置 ( 可设置流量、波长、溶剂配比 ); c 数据分析、报 告 处 理 ( 一般 不 选) ; d 运 行 时 间 表。( 4)点击 OK 进入 Method Comments , 可输入实验名称, 也可不选, 在后面也会提示输入。7) 参数设定。点击 OK 进入参数设定 (根据文献或实验方法

4、设定 ) 。( 1) Control (流速 ) : 一般为 1 2 mL /min。( 2) Solvents (溶剂名称及配比 ) 。( 3) Presswre Limits ( 压力限 ) Max:300 bar (压 力 保 护限, 默 认 ) ; Min: 0 bar。( 4) Timetable ( 洗脱梯度 )一般为 : 一种溶剂配比递 增 或递 减。( 5 )点 Display选 择 显 示 方 式。( 6)点 OK VWDSignal:Instrument1 ( 检测器设置 )对话框, Wavelength ( 波长 ), Peakiwidth ( 检 测 器。1欢迎下载精品

5、文档响 应 时 间) :默 认为 0. 1min( 2 s)。( 7) 点击 OK un Time Checklist:Instrument1 对话框,选中 Data Aequistion 和 Standard Data Analysis 。( 8)点击 OK ( 存储检测方法 ) :点 Save Method as 进入对话框, 可输入名称和注释,也可不输,然后点 OK 结束方法存储。8) 基线调节。( 1)点击界面左下角 “ 三箭头 ”显示 Online Plot 对话框, 观察基线是否平稳 ( 波动在 0. 05 个单位之间 ) Adjust ( 复位 ) , Balance ( 强制使

6、基线归零) 。( 2)点击 Change (调节 ) :基线走速 ( x轴) 、吸收单位 ( y轴)、图表显示曲线数量,点 OK 结束进样前设置。9) 样品信息。点击 un Method (运行方法 ) SimpleInfo Sample info: instrument 1 : Operator Name (操作者姓名 )、 Data File 中选 Manual File Name : ( 输入文件名 ) (必须每次输入新名, 否则覆盖前一次测试结果) ,Subdirectory:(文 件存 储 名 ) ,SimpleName: ( 样品名 ) , Simple Amount: ( 进样量

7、 ) ,点 OK 结束样品信息输入。10) 开始进样。进样量一般 5 25 L。( 仪器配有自动进样器 ) 。11) 停止采样。峰出完后按 F8 或者 stop 停止 ( 也可在 un control 下拉菜单中关闭 ) , 自动出现图表。可直接打印, 也可进行峰型优化后再打印。12) 峰优化。打开 offline ( 离线 ) , 点击 File Load signal 调出文件 ( 或者点击界面图标打开 ) :( 1) 打开文件保存的所在位置。( 2)点击 Graphics Signal Options 可以进行优化处理。( 3)选择 Autoscale 可以进行自动谱图优化。( 4)点击

8、 Interqration Interqration Event 进行人为峰筛选。( 5)设置峰高域和峰面积域进行峰的筛选。( 6)退出峰优化。13) 打印报告 :( 1) 点击 eport Specfy eport 进行打印格式和内容设置。 ( 2) 选择 Printer 为直接打印, 选择 Screen 为。2欢迎下载精品文档显示到屏幕后再打印。选中 File可选择文件存储格式( FileType) ,一般为 . TXT格式,其他项为打印内容可选项。( 3) 点击 eport Print eport 打印报告。14) 关机步骤:停止检测器和泵, 退出色谱工作站 ; 关闭液相色谱仪电源, 关

9、闭计算机。二维护1) 认真维护色谱柱样品的分析是在色谱柱里进行的,色谱柱是液相色谱分析的的核心,一根色谱柱若正确地使用,可以使用很长时间,若使用不当很快就会坏掉,因此维护好色谱柱非常重要。维护好色谱柱,除以上讲的对流动相的要求,还要认真地冲洗色谱柱。1 走完样品,要马上冲洗色谱柱, 否则杂质滞留在里面, 就会导致色谱柱性能降低,以至很快报废。2 用与流动相互溶的溶剂进行冲洗,逐渐过渡。目前我们所常用的 的柱子,如果流动相含缓冲盐一定要用水相置换一下柱内环境, 建议用的异丙醇 水冲洗, 再用甲醇 水(:)冲洗,最后用纯甲 醇 冲 洗。 如 果流 动 相 是 有 机 相 水,用甲醇 水(:)冲洗,

10、再用纯甲醇冲洗即可。3 冲洗时间一定要够。不可草草了事。一般情况下,流速在,每换一种液体,要冲洗约分钟,特殊情况可以冲洗更长的时间。4 色谱柱长期不用时, 应收藏起来, 键合相填料的色谱柱用甲醇冲洗后, 从仪器上取下,用随柱所配的封头 螺 帽 将 柱 两 端 密 封,以 防 止 柱 内 溶 剂蒸发。注意不要强烈震动、碰撞、弯曲。5 将色谱柱编号,记录色谱柱使用的历史。 有条件的最好 一 根 柱 子 只 用于 分 析某一类结构相似的物质, 以避免样品对色谱柱的交叉污染, 延长柱使用寿命。2) 注意对仪器硬件的维护仪器若长期不用,室内要注意通风、防潮,要定期开机运行,以避免电路板因潮湿而损坏。3欢迎下载

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