三种麻醉剂对果蝇麻醉效果的比较

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1、晋中学院本科毕业论文(设计)题 目三种麻醉剂对果蝇麻醉效果的比较院系 生物科学与技术学院专 业生物科学姓 名学 号学习年限指导教师申请学位理学 学士学位2014年4月10日三种麻醉剂对果蝇麻醉效果的比较乙醚、乙醇、氯仿学生姓名:指导教师:扌商要 果蝇由于其饲养容易、生长迅速等诸多优点,是遗传学实验中常用的材 料。在涉及果蝇的实验中,果蝇麻醉是很重要的环节。本实验旨在比较三种麻醉 剂一乙醚、乙醇、氯仿对果蝇成虫、幼虫麻醉效果和复苏率以及乙醚、乙醇、氯 仿对雌性果蝇和雄性果蝇的麻醉效果和复苏率率。从而选择果蝇麻醉实验中最适 宜的麻醉剂,从而达到延长麻醉时间,并确保较高的苏醒率的目的。关键词果蝇乙醚

2、乙醇氯仿麻醉时长复苏率Comparison of anesthetic effect of threekinds of anesthesia on Drosophilaether, alcohol, chloroformAuthors Name Duan Ruifang Tutor:LiHongyanABSTRACT: Drosophila due to its easy feeding, rapid growth and many otheradvantages, is commonly used in genetics experimental course materials. In t

3、he fruit fly Drosophila to experiment, anesthesia is very important.The aim of this study is to compare three kinds of anesthetic ether, alcohol, chloroform, on Drosophila adults, larvae and the effect of anesthesia and resuscitation rate of ether, alcohol, chloroform in female Drosophila and male f

4、lies to the effect of anesthesia and recovery rate.In order to choose the most suitable anesthesia Drosophila anesthetic experiment, so as to extend the duration of anesthesia, and ensure the high recovery rate of. KEYWORDS: Drosophila ether alcohol chloroform the time ofanesthesiarecovery rate1 实验材

5、料及药品11.1 实验材料11.2实验药品12 试验方法12.1 果蝇的培养与筛选12.2 果蝇的麻醉22.3 重复实验33 结果分析3注释3参考文献3附录1实验材料及药品1.1实验材料1.1.1黑腹果蝇本实验以黑腹果蝇为实验对象,使用玉米-琼脂培养基。以雄性果蝇和雌性 果蝇为一组对照以及果蝇成虫和幼虫为另一组对照,分别用乙醚、乙醇、氯仿三 种麻醉剂对上述两组果蝇进行麻醉。1.1.2玉米-琼脂培养基玉米粉、琼脂、干酵母粉、蔗糖。1.1.3器皿麻醉瓶、显微镜、培养瓶、毛笔、镊子、量筒500ml)、烧杯、滤纸、天平、 电磁炉、铁锅、纸杯、试管。1.2实验药品乙醚、乙醇、氯仿、丙酸。2实验方法2.1

6、果蝇的培养与筛选2.1.1培养基的配制取100ml水,加入1.5g琼脂,煮沸并搅拌,使之充分溶解。加入13g蔗糖, 继续煮沸使溶液溶解。再取100ml水并加入17g玉米粉,加热并搅拌使成糊状。 将上述两份糊状物混合,再次煮沸。待稍微冷却后加入lml丙酸调匀,防止霉菌 生长。待培养基表面凝固后撒入适量酵母粉。待培养瓶消毒后,将培养基分装入 培养瓶中。2.1.2果蝇的诱捕将变质的香蕉等水果装入纸杯中,放在窗口。用一盖子盖住杯口,但要留下 一小缝隙以便果蝇进入纸杯。第二天即可获取诱捕到的果蝇。2.1.3果蝇接种并培养将诱捕得到的果蝇麻醉并分检雌雄,在每个培养瓶中接种10对果蝇。接种 果蝇是要先将培养

7、瓶横放,以免果蝇粘在培养基上。待果蝇苏醒后再把培养瓶扶 正。然后将培养瓶放入培养箱中,在25r左右培养,定期观察。待培养瓶壁 上出现大量卵时,将亲本果蝇放掉,并继续培养。2.1.4筛选果蝇待培养瓶中出现大量子代果蝇时,将培养瓶浸入冰水,对果蝇进行低温麻醉 【6】,根据雌雄蝇的区别如性梳等,挑选出雌性果蝇和雄性果蝇【7】,并分装入不同 的麻醉瓶中。再挑选出长约5mm的三龄幼虫装入另外的麻醉瓶,静置待其苏醒。2.2果蝇的麻醉2.2.1果蝇麻醉、苏醒标准麻醉状态一以果蝇失去贴壁附着及活动能力为标准,即在试管中飞行或附着 的果蝇掉落瓶底时,将试管放平并轻轻滚动,失去附着能力的果蝇都位于试管下 侧壁,再

8、将试管立起,果蝇全部落入管底,此时为完全麻醉。苏醒标准为果蝇再 次站立并爬离初始位置。其中三种麻醉剂计量取40ul为安全剂量。2.2.2乙醚对雌雄性果蝇对照组的麻醉随机将6只雄性果蝇移入一个试管中,用棉花塞好管口,标记。再随机取6 只雌性果蝇移入另一只试管中,用棉花塞好管口,标记。将上述两只试管在支架 上固定好。分别用两支移液枪取40ul乙醚,同时注入两个试管的棉花中央位置, 并将棉花推至试管中央位置。开始计时。果蝇完全苏醒后,记下苏醒率。2.2.3乙醇对雌雄性果蝇对照组的麻醉随机将6只雄性果蝇移入一个试管中,用棉花塞好管口,标记。再随机取6 只雌性果蝇移入另一只试管中,用棉花塞好管口,标记。

9、将上述两只试管在支架 上固定好。分别用两支移液枪取40ul乙醇,同时注入两个试管的棉花中央位置, 并将棉花推至试管中央位置。开始计时。果蝇完全苏醒后,记下苏醒率。2.2.4氯仿对雌雄性果蝇对照组的麻醉随机将6只雄性果蝇移入一个试管中,用棉花塞好管口,标记。再随机取6 只雌性果蝇移入另一只试管中,用棉花塞好管口,标记。将上述两只试管在支架 上固定好。分别用两支移液枪取40ul氯仿,同时注入两个试管的棉花中央位置, 并将棉花推至试管中央位置。开始计时。果蝇完全苏醒后,记下苏醒率。2.2.5乙醚对果蝇成、幼虫对照组的麻醉随机取6只雌雄果蝇成虫移入一个试管中,用棉花塞好管口,标记。再随机 取6只果蝇幼

10、虫移入另一只试管中,用棉花塞好管口,标记。将上述两只试管在 支架上固定好。分别用两支移液枪取40ul乙醚,同时注入两个试管的棉花中央 位置,并将棉花推至试管中央位置。开始计时。果蝇完全苏醒后,记下苏醒率。2.2.6乙醇对果蝇成、幼虫对照组的麻醉随机取6只雌雄果蝇成虫移入一个试管中,用棉花塞好管口,标记。再随机 取6只果蝇幼虫移入另一只试管中,用棉花塞好管口,标记。将上述两只试管在 支架上固定好。分别用两支移液枪取40ul乙醇,同时注入两个试管的棉花中央 位置,并将棉花推至试管中央位置。开始计时。果蝇完全苏醒后,记下苏醒率。2.2.7氯仿对果蝇成、幼虫对照组的麻醉随机取6只雌雄果蝇成虫移入一个试

11、管中,用棉花塞好管口,标记。再随机 取6只果蝇幼虫移入另一只试管中,用棉花塞好管口,标记。将上述两只试管在 支架上固定好。分别用两支移液枪取40ul氯仿,同时注入两个试管的棉花中央 位置,并将棉花推至试管中央位置。开始计时。果蝇完全苏醒后,记下苏醒率。2.3重复试验上述步骤每日重复一次,共进行5次试验,并详细记录各自的麻醉时间、复 苏时间及复苏率。3结果分析注释参考文献1 闫桂琴,王华峰遗传学实验教程第1版北京:科学出版社,2010:1-6.2 王彩丽.实验用果蝇饲养及保种注意事项生物学通报,2009, 44 (1): 49-50.3 张英俊果蝇的采集与识别生物学通报,1985,5:44-45.4 聂传鹏果蝇的生活史及其人工饲养生物学通报,2002,37 (2): 21.5 邓接楼,晏燕花,付国良等不同培养基培养果蝇的效果差异研究.上饶师 范学院学报,2010,30 (6): 69-72.6 王璐,辛芳,许乐乐等.5种麻醉方法对果蝇麻醉效应的探究生物学通报, 2012,47 (5): 51-55.7 张立兴果蝇的观察处理及性别鉴定生物学教学,1990,(4): 34.8 徐静音,王子琪,许雅丽等。乙酸乙酯对果蝇的麻醉效应研究生物学杂志, 2011,28 (2): 36-38.9 郝大翠,姚明镜,刘焰.乙醚、乙醇用于果蝇麻醉的研究。生物学通报,2007,42 (8): 52-54.

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