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1、为了合理规范我院消毒灭菌效果、环境卫生学监测工作，提高监测结果的准确性、真实性、可比性，特作如下规定及要求:一、各科室（部门）对此项监测工作,按规定的要求开展监测项目，严格遵守规定的监测时限，真实规范采样，完整填写申请单.按时（每月底前)做好报表工作.二、各科室（部门）对每月监测结果要进行效果评价并将资料妥善保管。对不合格项目要进行原因分析并制定改进措施，达到不断持续性改进的目的。三、各科室(部门)对此项监测工作，要务真求实，对不合格项目应如实上报。避免单纯追求合格率，而虚报、闹假、走形式.经核实将按奖罚条例进行重奖、重罚。四、检验科（细菌室）保证对全院各科室（部门），监测所需合格采样试管、培
2、养皿的供应,并每月做无菌试验.按要求做到培养时限准确、中和剂添加正确、报告结果规范.五、检验科(细菌室)对各科室（部门）送检的采样标本有不合格，采样不规范,申请单填写不符合要求的,有权拒绝出示报告结果.六、感染控制科对全院重点科室（部门)的消毒灭菌效果、环境卫生学监测工作负责监督、并开展随机抽查采样监测。各科室应积极主动配合，对在随机抽查采样中态度不端正、找借口、推诿等影响工作正常进行的，将按奖罚条例进行扣罚。七、各科室（部门）监测时间具体安排重点科室(部门)：、类科室及相关科室手术室、新生儿里间、监测时间：每周一次（周二）。内镜室1w、供应室3w、产一科1w、产二科1w、母婴同室1w、分娩室
3、2w、人流室1w等。监测时间：每月一次。（第1w、2w、3w）、（3*、9*）普通科室(部门)：、类科室及相关科室外科（换药室)3w、五官科1w、儿一科3w、儿二科3w、儿三科3w、新生儿科3w、妇一科2w、妇二科2w、检验科3w、血库3w、医疗废物储存室2w、放射科2w、病理室1w、外科3w、注射室2w、换药室2w、泳吧1w、妇科门诊1w、儿童乐园3w、儿科门诊治疗室3w、手足口病诊室2w监测时间：每月一次.（第1w、2w、3w）、（3*、9*） 注：有号的月份加紫外线强度监测。八、各科室（部门）监测项目、监测时限、采样方法、评价（合格）标准，详见附件。附件：1空气消毒效果的监测采样时间：在
4、消毒处理后、操作前进行采样。（1） 采样方法1)布点方法；室内面积30Cm2,设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁IM处;室内面积30M2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁lm处。2)平板暴露法：将普通营养琼脂平板(直径为9CM）放在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5m，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好立即送检。3） 检测方法:将送检的平板置37温箱培养48h，计数菌落数,并分离致病菌。（2)结果判定类区域:细菌总数10cfu/m3，未检出致病菌为消毒合格；类区域：细菌总数200 cfu/m3,未检出致病菌为消毒合格；类区域：细菌总数500 cfu/m3
5、，未检出致病菌为消毒合格。注意事项：采样前，关闭门、窗,在无人走动的情况下，静止10分钟后进行采样。2物品和环境表面消毒效果监测采样时间：在消毒处理后进行采样。(1) 采样方法：用5cm5cmd 标准灭菌规格板，放在被检问题表面，采样面积100cm2，连续采样4个，用浸有含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含有相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。(2) 结果判定、类区域：细菌总数5CFU/cm3并未检出致病菌为消毒合格。类区域：细菌总数10CFU/cm3并
6、未检出致病菌为消毒合格。类区域：细菌总数15CFU/cm3并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏3手的消毒效果监测采样时间:在消毒后立即采样。（1）采样方法1)手的采样:被检人五指并拢，用浸有含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30 cm3）,并随之转动采样棉拭子,剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含有相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。2)结果判定、类区域工作人员：细菌总数5CFU/cm3，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌为消毒合格.类区域工作人员:细菌总数
7、10CFU/cm3并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。类区域工作人员:细菌总数15CFU/cm3并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上，不得检出沙门菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。4 压力蒸汽灭菌效果监测方法(1） 化学监测法1）化学指示卡（管)监测方法:将既能指示温度,又能指示温度持续时间的化学指示管(卡）放人每一待灭菌的物品包中央，经一个灭菌周期后,取出指示管（卡），根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。2)化学指示胶带监测法：将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外，经一个灭菌周期后，观察其颜色的改
8、变，以指示是否经过灭菌处理.3)结果判定：检测时，所放置的指示管(卡)的性状或颜色均变至规定的条件，可认为该包灭菌合格。4）注意事项：监测所用化学指示剂须经卫生部批准，并在有效期内使用。（2）生物监测法1)指示菌株:指示菌株为嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC7953或SSIK31株),菌片含菌量为5。0X105-5。0x106cfu/片，在1210。5条件下,D值为13-1。9min，杀灭时间（KT值）19min，存活时间(ST值)为3.9min。2)培养基：试验用培养基为溴甲酚紫蛋白胨水培养基。3）检测方法：将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装人灭菌小纸袋内,置于标准试验包中心部位。灭菌柜室内，排气口
9、上方放置一个标准试验包（由3件平纹长袖手术衣，4块小手术巾,2块中手术巾，1块大手术中，3O块10cm x 10cm8层纱布敷料包裹成25cm X 30cm x 30cm大小）。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒（22cm x 13cm x 6cm)代替标准试验包,盒内盛满中试管,指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封），将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投人溴甲酚紫蛋白胨水培养基中，经56培养7天（自含式生物指示物按说明书执行)，观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。（4)结果判定：每个指
10、示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基,由紫色变为黄色时，则灭菌不合格.（5）注意事项：监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内使用。5 紫外线消毒效果的监测（1 ）紫外线灯管辐照度值的测定1）检测方法:开启紫外线灯5min后，将测定波长为254nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离1m的中央处,待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯管的辐照度值。2)结果判定：普通30w。直管型紫外线灯,新灯辐照强度90Uw/cm2为合格；使用中紫外线灯辐照强度70Uw/cm2对为合格；30W高强度紫外线新灯的辐照强度180 Uw/cm2行
11、为合格。3)注意事项:测定时电压220v土5v，温度20一25，相对湿度60%，紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用。6 医疗器械灭菌效果的监测(1)采样时间:在灭菌处理后，存放有效期内采样。 常规监测1）检测方法：用无菌的方法将拟检缝合针、针头、手术刀片等小件医疗器械各5支，分别投人5ml的无茵洗脱液中;注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次；手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下取2份以上用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂擦采样，并将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中。将采样管用力振打80次，用无菌吸管吸取lml待检样品放于灭菌平皿内,加人已熔化的45-48的营养琼脂1518ml，边倾
12、注边摇匀，待琼脂凝固，置37温箱培养48h，计数菌落数.2）结果判定:平板上无菌生长为灭菌合格。3)注意事项:若消毒因子为化学消毒剂时，采样液中应加人相应中和剂。7消毒液的监测（1） 常用消毒液有效成分测定1）有效氯含量测定配制2mol/L硫酸、10碘化钾与0。5淀粉等溶液。配制并标定0。1mol/L硫代硫酸钠标准溶液。对液体含氯消毒剂，吸取0。1ml放容量瓶中，加蒸馏水至刻度，混匀。对固体含氯消毒剂，称取1g(精确至0。001g)，置研钵研磨后以蒸馏水溶解,转人100ml容量瓶中(溶水中无残渣者可免研磨).称量杯及研钵需用蒸馏水洗3次，洗液全部转人容量瓶。向 100ml碘量瓶中加 2mol/
13、L硫酸 10ml，10%碘化钾溶液 10ml和混匀的消毒剂稀释液10。0ml。此时，溶液出现棕色。盖上盖并振摇混匀后加蒸馏水数满于碘量瓶盖缘，置暗处5min.打开盖，让盖缘蒸馏水流人瓶内。用硫代硫酸钠标准溶液(装于25ml滴定管中)滴定游离碘；边滴边摇匀。待溶液呈淡黄色时加人0.5淀粉溶液10滴，溶液立即变蓝色。继续滴定至蓝色消失，记录用去的硫代硫酸钠溶液总量.重复测3次，取3次平均值进行以下计算。因lmol/L硫代硫酸钠标准溶液Iml相当于0。03545g有效氯,故可按下式计算有效氯含量：有效氯含量二 C V 0。03545/W 100C为硫代硫酸钠标准溶液物质的量浓度(MOL/L）V为滴定
14、用去硫代硫酸钠标准溶液毫升数；w为碘量瓶中所含消毒剂原药克数（液体消毒剂则为毫升数)、2)有效碘含量的测定配制0.5%淀粉溶液.备36醋酸溶液。配制并标定0。1moL/L硫代硫酸钠标准溶液。向ltolnl碘量瓶中精确加含碘消毒剂样液50ml及醋酸1滴.用0.led/L硫代硫酸钠标准溶液滴定(通常用25ML滴定管，若预计有效碘浓度5%时用50ml滴定管)，边滴边摇匀。待溶液呈淡黄色时加人0.5淀粉溶液10滴(溶液立即变蓝色）,继续滴定至蓝色消失，记录用去的硫代硫酸钠溶液总量。重复测3次,取3次平均值进行以下计算。由于 lmol/L硫代硫酸钠标准溶液 lml相当于 0.1269g有效碘，故可按下式
15、计算有效碘含量:有效碘含量=C V 0.1269/W 100%”“”“Wc为硫代硫酸钠标准溶液物质的量浓度(mol/L)v为满定用去硫代硫酸钠标准溶液毫升数;W为碘量瓶中所含消毒剂原药克数（液体消毒剂则为毫升数)3) 戊二醛(C5h 8O2。)含量的测定配制6.5%三已醇胺溶液、0。04%澳酚蓝乙醇溶液与盐酸羟胺中性溶液（17。5g盐酸羟胺加蒸馏水75ml溶解,并加异丙醇稀释至500ml,摇匀。加0.04澳酚蓝乙醇溶液15rnl，用6.5三乙醇胺溶液滴定至溶液显蓝绿色)。配制并标定0。25mol/L硫酸标准溶液.取戊二醛消毒剂样液10。0ml(非消毒浓度的浓溶液需用50ml容量瓶稀释后取样)置250ml碘量瓶中，精确加 6。5三乙醇胺溶液 20.0ml与盐酸羟胺中性溶液0。25ml，摇匀.静量反应 lh后，用0。25mol/L硫酸标准溶液滴定。待溶液显蓝绿色，记录硫酸溶液用量。同时,以不含戊二醇的三乙醇胺、盐酸羟胺中性溶液重复上述操作(空白对照）.重复测3次,取3次的平均值进行以下计算.由于 lmol/L硫酸标准溶液 Iml相当于 0。1001g戊二醛，因此可按下式计算成二醛含量:戊二醛含量(w/v)=C （v2-v1） 0。1001/w 100
