《中成药检验技术实训讲义》由会员分享，可在线阅读，更多相关《中成药检验技术实训讲义（21页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中成药检验技术实训讲义浙江医药高等专科学校实训一 六味地黄丸的定性鉴别一 实验目的1. 掌握中成药显微鉴别的操作技能2. 掌握中成药理化鉴别的操作技能3. 熟悉中成药色谱鉴别的操作技能4. 了解中成药定性鉴别的特点和发展趋势二 实验试药及仪器 六味地黄丸，显微镜，研钵，刀片，盖玻片，载玻片，解剖针，稀甘油，水合 氯醛，硅藻土，乙醚，丙酮，丹皮酚对照品，环己烷，乙酸乙酯，盐酸酸性5% 三氯化铁乙醇溶液。三实验内容1. 显微鉴别 取六味地黄丸，按蜜丸取样制片方法进行临时装片，置显微镜下 观察应有一下特征：淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径2440pm，脐点短缝 状或人字状（山药）。不规则分枝状团块无色
2、，遇水合氯醛液溶化；菌丝无 色，直径46pm （茯苓）。薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕 色核状物（熟地黄）。草酸钙簇晶存在于无色薄壁细胞中，有时数个排列成 行（牡丹皮）。果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周壁略连珠状增 厚（山茱萸）。薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群（泽泻）。2. 理化鉴别 取本品水蜜丸6g,研碎，或取小蜜丸或大蜜丸9g,切碎，加硅 藻土 4g,研匀。加乙醚40ml，低温回流1小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣 加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml 含 1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各
3、10pl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷一醋酸乙酯（3:1）为展开剂，展 开，取出，晾干，喷以盐酸酸性 5三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。四思考题现在市场上最常见的是六味地黄丸的浓缩丸，那浓缩丸和水蜜丸相比较，鉴 定性鉴别的结果有什么异同？为什么？实训二 香连丸的质量检验一 . 实验目的1. 掌握中成药显微鉴别方法2. 掌握薄层层析技能3. 掌握生物碱的提取、精制方法4. 掌握生物碱的含量测定方法5. 熟悉中药制剂质量检验的流程和方法6. 了解中国药典的质量标准变化 二实验试药及仪器香连丸，显微镜，紫外灯，研钵，刀片，
4、盖玻片，载玻片，解剖针，层析用 中性氧化铝；乙醇，稀甘油，水合氯醛；甲醇，正丁醇，冰乙酸，水，乙醚，乙 酸乙酯，丹皮酚对照品，环己烷，丙酮，木香对照药材，盐酸小檗碱对照品，5 香草醛硫酸溶液。三实验内容1.鉴别:(1) 取本品，置显微镜下观察：菊糖块不规则，有时可见微细放射状纹理， 加热后溶解；网纹导管直径约至90pm。纤维束鲜黄色，壁稍厚，纹孔明显。(2) 取本品约0.3g，研碎，加乙醇10ml,加热回流1小时，放冷，滤过， 滤液作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每1ml中含1mg的 溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各 10pl ，分别 点于同一硅胶G薄
5、层板上，以正丁醇一冰醋酸一水(7:1:2)为展开剂，展开，取 出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应 的位置上，显相同的一个黄色荧光斑点。(3) 取本品2g，研细，加乙醚15ml，放置2小时，时时振摇，滤过，滤液挥 去乙醚，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.4g， 加乙醚15ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液 各10卩1,分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷一丙酮(10:3)为展开剂，展开， 取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105r加热5分钟。供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，
6、显相同的紫红色至蓝紫色斑点。2.含量测定取本品粉末（过三号筛）约0.8g，精密称定，置索氏提取器中，加盐酸一甲 醇（1:100）的混合溶液适量，加热回流提取至提取液无色，将提取液（必要时浓缩） 移至50ml量瓶中，用盐酸一甲醇（1:100）的混合溶液稀释至刻度，摇匀，照柱色 谱法试验，精密量取5ml，置中性氧化铝柱（5g，内径约0.9cm，湿法装柱，用乙 醇30ml预洗）上，用乙醇25ml洗脱，收集洗脱液，置50ml量瓶中，用乙醇稀 释至刻度，摇匀，精密 量取2ml，置50ml量瓶中，用0.05mol/L硫酸溶液稀释 至刻度，摇匀。照分光光度法，在 345nm 的波长处测定吸收度，按盐酸小檗碱
7、 （C20H18NO4）的吸收系数（E 1%1 ）为728计算，即得。本品按干燥品计20 1841cm算，每1g含总生物碱以盐酸小檗碱（C2oH18N04）计，不得少于56mg。四 、思考题1. 比较 2000 年版和 2005 版的中国药典中香连丸的质量标准有何改进？2. 比较湿法装柱和干法装柱操作有何异同？附：中国药典2005版收载香连丸名称：香连丸汉语拼音：Xianglian Wan药物组成：黄连（吴茱萸制）800g，木香200g。药物制法：以上二味，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末用米醋8g加 适量的水泛丸，干燥，即得。性状： 本品为淡黄色至黄褐色的水丸；气微，味苦。鉴别：（1）
8、取本品，置显微镜下观察：菊糖团块形状不规则，有时可见微细放射状纹理，加热后溶解；网纹导管直径约90“血纤维束鲜黄色，壁稍厚，纹 孔明显。（2）取本品约60mg，研细，加甲醇5ml，置水浴中加热回流15分钟， 滤过，取滤液，补加甲醇使成5ml，摇匀，作为供试品溶液。另取黄连对照药材 0.05g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含 0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录WB）试验，吸取上述三 种溶液各1卩1,分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓 氨试液（12:6:3:3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下
9、检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同的 黄色荧光斑点。（3）取本品2g，研细，加乙醚15ml，放置2小时，时时振摇， 滤过，滤液挥去乙醚，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取木 香对照药 材0 .4g ，加乙醚1 5ml ，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（附录 WB）试验，吸取上述两种溶液各10卩1.分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己 烷-丙酮（10:3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5香草醛硫酸溶液， 在 105C加热5分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的 紫红色至蓝紫色斑点。检查：应符合丸剂项下有关的各项规定（附
10、录I A）。含量测定：取本品适量，研细，取约0.2g，精密称定，置索氏提取器中，加 盐酸-甲醇（1:100）的混合溶液适量，加热回流提取至提取液无色。将提取 液 转移至100ml量瓶中，用少量上述混合溶液洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加 上述混合液至刻度，摇匀，精密量取10ml，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度， 摇匀，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定、加甲醇制成每 1ml含20腿的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录WB）试验，精密吸 取供试品溶液4卩1、对照品溶液2卩1与6卩1,分别交叉点于同一硅胶G薄层板上.以 甲苯-乙酸乙醇-异丙醇-甲醇-水 （4:2:1:1:0.
11、2）为展开剂，在另槽中加入等体积 的浓氨试液，预饱和15分钟，展开，展距10cm，取出，晾干，照薄层色谱法（附 录WB薄层色谱扫描法）进行荧光扫描，激发波长:X=366nm，测量供试品荧光强 度的积分值与对照品荧光强度的积分值，计算，即得。本品每1g含黄连以盐酸 小檗碱（C20H18ClNO4）计，不得少于27mg。功效: 清热化湿，行气止痛。主治: 用于大肠湿热所致的痢疾，症见大便脓血、里急后重、发热腹痛；肠 炎、细菌性痢疾见上述证候者。用法用量：口服。一次3-6g, 日2-3次；小儿酌减。贮藏: 密封。实训三 复方丹参片的质量检验一实验目的1. 掌握对中药制剂皂苷类成分的提取、精制能力2.
12、 掌握含量测定方法的效能指标3. 掌握薄层层析技能和高效液相操作4. 熟悉中药制剂质量检验的流程和方法 二实验试药及仪器显微镜，研钵，刀片，盖玻片，载玻片，解剖针；甲醇，乙醚，乙酸乙酯， 苯，正丁醇，三氯甲烷，丹参酮ILA对照品，冰片对照品，1%香草醛硫酸溶液， 三七对照药材，三七皂苷R1对照品，人参皂苷Rb1对照品，人参皂苷Rg1对照 品三实验内容1. 鉴别: (1)取本品，置显微镜下观察:树脂道碎片含黄色分泌物。(2) 取本品5 片,糖衣片除去糖衣，研碎，加乙醚10ml，超声处理5分钟， 滤过，药渣备用，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另 取丹参酮IIA对照品、冰片对
13、照品，分别加乙酸乙酯制成每1ml含0.5mg的溶液， 作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4卩1，分别点于同一 硅胶 G 薄层板上，以苯-乙酸乙酯(19:1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试 品色谱中，在与丹参酮IIA对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以 1 %香草醛硫酸溶液，在110C加热数分钟，在与冰片对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点。(3) 取鉴别(2)项下的备用药渣，加甲醇25ml，加热回流15分钟， 放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇25ml 振摇提取，取正丁醇提取液，用氨试液 25ml 洗涤，再用正丁醇饱和的水洗
14、涤 2 次，每次25ml，正丁醇液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。 另取三七对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取三七皂苷R1对照品及人 参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶 液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验。吸取上述五种溶液各1卩1，分别点于 同一硅胶G薄层板上。以三氯甲烷-甲醇-水(13:7:2) 10C以下放置分层的下层 溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液（1-10）,在11OC加热 至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点。2. 含量测定:丹参酮IIA照高
15、效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇- 水（73:27）为流动相；检测波长为270nm。理论板数按丹参酮II A峰计算应不 低于 2000。对照品溶液的制备：取丹参酮IIA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中， 加甲醇制成每1ml含40腿的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品10片， 糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取约1g，精密称定，置具塞棕色瓶中，精 密加入甲醇25m 1，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz） 15 分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量、摇匀，滤过，取续滤液，置 棕色瓶中，即得。测定法：分别精密吸取对照
16、品溶液与供试品溶液各10卩1,注入液相色谱仪， 测定，即得。本品每片含丹参以丹参酮IIA（C19H18O3）计，不得少于0.20mg。 四思考题1. 使用高效液相法测定含量，试剂和样品应如何前处理？2. 高效液相色谱法测定含量有哪些常用的方法？实训四 板蓝根颗粒的质量标准要求一 实验目的培养全面制订药品质量标准的思路与能力 培养对各类专业知识的综合运用能力培养创造性思维二 实验内容以学生自己设计的实验方案进行验证。（方案设计要求学生学生提前查阅相 关资料完成，先进行可行性讨论后进行）三 思考题2005 版中国药典中，板蓝根颗粒的质量标准有何不足之处？你认为可以 怎么改进？附：中国药典 2005版收载板蓝根颗拼音名：Ban
