高中生物选修一2.1《微生物的实验室培养》学案

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10、时需将培养基PH调至 、培养细菌时需将PH调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。思考1从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?【补充1】碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。 氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。 二、无菌技术:阅读“无菌技术”,讨论回答下列问题: (一)获得纯净培养物的关键是 ,具体操作如下: 1对实验操作的 、操作者的 和 进行 。 2将用于微生物培养的 、 和 等器具进行 。 3为避免周围环境

11、中微生物的污染,实验操作应在 附近进行。4实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 (二)消毒和灭菌1消毒是指 。常用的方法有 、 、 消毒法。2灭菌是指 。常用的方法有: 、 、 灭菌。分别适用于那些用具?思考2无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是什么?思考3利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是什么?思考4物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是 ;随后关闭排气阀继续加热,气压升至 ,温度为 ,并维持 min;最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至 时打开锅盖,其目的是防止 实验操作-大肠杆菌的纯化培养:本实验所

12、用的培养基是 ,本实验可分成 和 两个阶段进行。一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是: 、 、 、 、 。思考5在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作要迅速,原因是什么?溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么?思考6牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质?2 倒平板:待培养基冷却至 左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:在火焰旁右手拿 ,左手 ;使锥形瓶的瓶口 ;左手将培养皿 ,右手 ,立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后,将平板 。思考7锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?思考8倒平板的目的是什么?思考9若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板能否

13、培养微生物?为什么?思考10配制斜面培养基作用是什么?,试管为什么要加塞棉塞?二、纯化大肠杆菌 微生物接种:最常用的是 法和 法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。 1平板划线法是 的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是:将 在酒精灯火焰上灼烧直至 。在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到 的目的。将冷却的接种环伸入到 。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙,把接种环 ,盖上皿盖,不要划破培养基。灼烧接种环,冷却后从 划线。重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。注意不要将 相连。将平板 培养。思考11取菌种前灼烧接种环的目的是什么? 为什么除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环?

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