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1、 一、概述 伪狂犬病(Pseudorabies)是由伪狂犬病毒引起的多种家畜和野生动物的一种急性传染病。除猪以外的其他动物发病后通常具有发热、奇痒及脑脊髓炎等典型症状，均为致死性感染，但呈散发形式。猪是伪狂犬病毒的自然宿主和贮存者，仔猪和其他易感动物一旦感染该病，死亡率高达100，成年母猪和公猪多表现为繁殖障碍以及呼吸道症状。本病广泛分布于世界各地。并且近年来国外报道，猪、牛及绵羊发生本病逐年增加。在我国该病也广泛存在，并严重发病，尤其是猪的伪狂犬病，给我国养猪业造成了巨大的经济损失。 二、病原 伪狂犬病毒属于疱疹病毒科(Herpesviridae)、猪疱疹病毒属，病毒粒子为圆形，直径1501
2、80nm，核衣壳直径为105110nm。病毒粒子的最外层是病毒囊膜，它是由宿主细胞衍生而来的脂质双层结构。囊膜表面有长约810nm呈放射状排列的纤突。 伪狂犬病毒是疱疹病毒科中抵抗力较强的一种。在37下的半衰期为7h，8可存活46天，而在25干草、树枝、食物上可存活1030天，但短期保存病毒时，4较-15和-20冻结保存更好。病毒在pH49之间保持稳定。5石炭酸经2min灭活，但0.5石炭酸处理32天后仍具有感染性。0.51氢氧化钠迅速使其灭活。对乙醚、氯仿等脂溶剂以及福尔马林和紫外线照射敏感。 伪狂犬病毒V只有一个血清型，但不同毒株在毒力和生物学特征等方面存在差异。伪狂犬病毒具有泛嗜性，能在
3、多种组织培养细胞内增殖，其中以兔肾和猪肾细胞(包括原I代细胞和传代细胞系)最为敏感，并引起明显的细胞病变，细胞肿胀变圆，开始呈散在的灶状，随后逐渐扩展，直至全部细胞圆缩脱落，同时有大量多核巨细胞形成。细胞病变出现快，当病毒接种量大时，在1824h后即能看到典型的细胞病变。 实验动物也可用于病毒的分离。在兔、1日龄小鼠和组织培养之间对伪狂犬病毒的敏感性无显著差异，但成年鼠与新生鼠相比有较强的抵抗力。虽然鸡胚对伪狂犬病毒不很敏感，但应用鸡胚绒毛尿囊膜接种是最早用于病毒增殖和传代的方法。 伪狂犬病毒基因组是线状双链DNA分子，大小约150kb，平均G+C含量高达74，具有典型的疱疹病毒基因组结构特征
4、，由独特长区段、独特短区段及位于US两侧的末端重复序列(TR)和内部重复序列(IR)组成。三、流行病学 伪狂犬病毒在全世界广泛分布。伪狂犬病自然发生于猪、牛、绵羊、犬和猫，另外，多种野生动物、肉食动物也易感。水貂、雪貂因饲喂含伪狂犬病毒的猪下脚料也可引起伪狂犬病的暴发。实验动物中家兔最为敏感，小鼠、大鼠、豚鼠等也能感染。关于人感染伪狂犬病毒的报道很少，并且都不是以病毒分离为报道依据。如土耳其及我国台湾曾报道有血清学反应阳性者。欧洲也曾报告数例因皮肤伤口接触病料组织而感染，主要表现为局部有发痒，未曾报告有死亡。最新的报道见于1992年，在波兰因直接接触伪狂犬病毒而感染的工人，首先是手部先出现短暂
5、的搔痒，后扩展至背部和肩部。 猪是伪狂犬病毒的贮存宿主，病猪、带毒猪以及带毒鼠类为本病重要传染源。不少学者认为，其他动物感染本病与接触猪、鼠有关。 在猪场，伪狂犬病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪，另外，被伪狂犬病毒污染的工作人员和器具在传播中起着重要的作用。而空气传播则是伪狂犬病毒扩散的最主要途径，但到底能传播多远还不清楚。人们还发现在邻近有伪狂犬病发生的猪场周围放牧的牛群也能发病，在这种情况下，空气传播是惟一可能的途径。在猪群中，病毒主要通过鼻分泌物传播，另外，乳汁和精液也是可能的传播方式。 除猪以外的其他动物感染伪狂犬病毒后，其结果都是死亡。猪发生伪狂犬病后，其临诊症状因日龄而异，成年
6、猪一般呈隐性感染，怀孕母猪可导致流产、死胎、木乃伊胎和种猪不育等综合症候群。15日龄以内的仔猪发病死亡率可达100，断奶仔猪发病率可达40，死亡率20左右；对成年肥猪可引起生长停滞、增重缓慢等。 伪狂犬病的发生具有一定的季节性，多发生在寒冷的季节，但其他季节也有发生。四、临床症状 伪狂犬病毒的临诊表现主要取决于感染病毒的毒力和感染量，以及感染猪的年龄。其中，感染猪的年龄是最主要的。与其他动物的疱疹病毒一样，幼龄猪感染伪狂犬病毒后病情最重。 新生仔猪感染伪狂犬病毒会引起大量死亡，临诊上新生仔猪第1天表现正常，从第2天开始发病，35天内是死亡高峰期，有的整窝整窝死光。同时，发病仔猪表现出明显的神经
7、症状、昏睡、呜叫、呕吐、拉稀，一旦发病，12日内死亡。剖检主要是肾脏布满针尖样出血点，有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血。15日龄以内的仔猪感染本病者，病情极严重，发病死亡率可达100。仔猪突然发病，体温上升达41以上，精神极度委顿，发抖，运动不协调，痉挛，呕吐，腹泻，极少康复。断奶仔猪感染伪狂犬病毒，发病率在2040左右，死亡率在1020左右，主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。成年猪一般为隐性感染，若有症状也很轻微，易于恢复。主要表现为发热、精神沉郁，有些病猪呕吐、咳嗽，一般于48天内完全恢复。 怀孕母猪可发生流产、产木乃伊胎儿或死胎，其中以死胎为主无论是头胎母猪还是经产母猪都发病，而且没有
8、严格的季节性，但以寒冷季节即冬末春初多发。据近年来的报道，奇痒症状以往在猪罕见，但目前则常可见到。 伪狂犬病的另一发病特点是表现为种猪不育症。近几年发现有的猪场春季暴发伪狂犬病，出现死胎或断奶仔猪患伪狂犬病后，紧接着下半年母猪配不上种，返情率高达90%，有反复配种数次都屡配不上的。此外，公猪感染伪狂犬病毒后，表现出睾丸肿胀、萎缩，丧失种用能力。 五、病理变化 伪狂犬病毒感染一般无特征性病变。眼观主要见肾脏有针尖状出血点，其他肉眼病变不明显。可见不同程度的卡他性胃炎和肠炎，中枢神经系统症状明显时，脑膜明显充血，脑脊髓液量过多，肝、脾等实质脏器常可见灰白色坏死病灶，肺充血、水肿和坏死点。子宫内感染
9、后可发展为溶解坏死性胎盘炎。 组织学病变主要是中枢神经系统的弥散性非化脓性脑膜脑炎及神经节炎，有明显的血管套及弥散性局部胶质细胞坏死。在脑神经细胞内、鼻咽黏膜、脾及淋巴结的淋巴细胞内可见核内嗜酸性包涵体和出血性炎症。有时可见肝脏小叶周边出现凝固性坏死。肺泡隔核小叶质增宽，淋巴细胞、单核细胞浸润。 六、诊断鉴别 根据疾病的临诊症状，结合流行病学，可做出初步诊断，确诊必须进行实验室检查。同时要注意与猪细小病毒、流行性乙型脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、弓形虫及布鲁氏菌等引起的母猪繁殖障碍相区别。 1病毒分离鉴定病毒的分离是诊断伪狂犬病的可靠方法。患病动物的多种病料组织如脑、心、肝、脾、
10、肺、肾、扁桃体等均可用于病毒的分离，但以脑组织和扁桃体最为理想，另外，鼻咽分泌物也可用于病毒的分离。病料处理后可直接接种敏感细胞，如猪肾传代细胞(PK-15和IBRS-2)、仓鼠肾传代细胞(BHK-21)或鸡胚成纤维细胞(CEF)，在接种后2472h内可出现典型的细胞病变。若初次接种无细胞病变，可盲传3代。不具备细胞培养条件时，可将处理的病料接种家兔或小鼠，根据家兔或小鼠的临诊表现做出判定，但小鼠不如家兔敏感。分离到病毒后再用标准阳性血清做中和试验以确诊本病。 2组织切片荧光抗体检测取患病动物的病料如脑或扁桃体的压片或冰冻切片，用直接免疫荧光检查。其优点是快速，在几小时内即可获得可靠结果，对于
11、新生仔猪，其敏感性与病毒分离相当，但对于育肥猪与成年猪，该法则不如病毒分离敏感。 3PCR检测猪伪狂犬病病毒利用PCR可从患病动物的分泌物如鼻咽拭子或组织病料中扩增猪伪狂犬病病毒的基因，从而对患病动物进行确诊。PCR与病毒分离鉴定相比，具有快速、敏感、特异性强等优点，能同时检测大批量的样品，并且能进行活体检测，适合于临诊诊断。 4血清学诊断多种血清学方法可用于伪狂犬病的诊断，应用最广泛的有中和试验、酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、补体结合试验及间接免疫荧光等。其中血清中和试验的特异性、敏感性都是最好的，并且被世界动物卫生组织(OIE)列为法定的诊断方法。但由于中和试验的技术条件要求高、时间长，
12、所以主要是用于实验室研究。酶联免疫吸附试验同样具有特异性强、敏感性高的特点，34h内可得出试验结果，并可同时检测大批量样品，广泛用于伪狂犬病的临诊诊断。另外，近几年来，乳胶凝集试验以其独特的优点也在临诊上广泛应用，操作极其简便，几分钟之内便可得出试验结果。 5鉴别诊断猪伪狂犬病病毒鉴别诊断方法是在使用基因标志疫苗的基础上应用的一类诊断方法。由于PRV中存在多个非心需糖蛋白基因，缺失这些基因的病毒突变株不能产生被缺失基因所编码的糖蛋白，但又不影响病毒在细胞上的增殖与免疫原性。将这种基因缺失标志疫苗注射动物后，动物不能产生针对缺失蛋白的抗体。因此，可通过血清学方法将自然感染野毒的血清学阳性猪与注苗
13、猪区分开来。目前，缺失疫苗缺失的糖蛋白基因主要为gE和gG基因，也有缺失gC、gB基因的。针对缺失的糖蛋白已利用大肠杆菌或酵母等表达系统的表达产物建立了相应的鉴别诊断方法：gE-ELISA(酶联免疫吸附试验)、gG-ELISA、gC-ELISA、gB-ELISA以及gE-LAT(乳胶凝集试验)、gG、LAT等，实验证实这些方法的特异性强、敏感性高，可用于临诊检测，同时乳胶凝集还具有简单、快速的特点。目前，在我国已有gE-ELISA、gG-ELISA和gE-LAT、gG-LAT问世。 七、防治措施 本病尚无特效治疗药物，紧急情况下，用高免血清治疗，可降低死亡率。疫苗免疫接种是预防和控制伪狂犬病的
14、根本措施，目前国内外已研制成功伪狂犬的常规弱毒疫苗、灭活疫苗以及基因缺失疫苗(包括基因缺失弱毒苗和灭活苗)，这些疫苗都能有效地减轻或防止伪狂犬病的临诊症状，从而减少该病造成的经济损失。消灭牧场中的鼠类，对预防本病有重要意义。同时，还要严格控制犬、猫、鸟类和其他禽类进入猪场，严格控制人员来往，并做好消毒工作及血清学监测等，这样对本病的防制也可起到积极的推动作用。此外，对猪群采血做血清中和试验，阳性者隔离，以后淘汰。以34周为间隔反复进行，一直到两次试验全部阴性为止。另外一种方式是培育健康猪，母猪产仔断乳后，尽快分开，隔离饲养，每窝小猪均须与其他窝小猪隔离饲养。到16周龄时，做血清学检查(此时母源抗体转为阴性)，所有阳性猪淘汰，30日后再做血清学检查，把阴性猪合成较大群，最终建立新的无病猪群。【猪伪狂犬病】上：神经症状，转圈【猪伪狂犬病】神经紧张，眼发直【猪伪狂犬病】母猪产出的死胎及木乃伊胎儿【猪伪狂犬病】仔猪大批死亡【猪伪狂犬病】软脑膜充血，其下脑沟积有出血性水肿液【猪伪狂犬病】扁桃体有出血点【猪伪狂犬病】扁桃腺及咽喉头有明显坏死【猪伪狂犬病】仔猪小肠内充满黄色稀便和气体 /
