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1、常用大肠杆菌感受态JM109, DH5a , BL21等的区别1:DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pU C系列质粒载体 转化时，可与载体编码的。-半乳糖苷酶氨基端实现a-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别 重组菌株。基因型:F -, 980dlacZAM15, (lacZYA-argF U 169, deoR , recA 1, endA 1, hsdR17(rk-, mk+, phoA , supE44, X-, thi-1, gy rA 96, relA 12:BL21(DE3 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列的
2、基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于X噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体 上。该菌适合表达非毒性蛋白。基因型:F -, ompT , hsdS (rBB-mB -, gal , dcm (DE33:BL21(DE3 pLysS 菌株该菌株含有质粒pLy sS，因此具有氯霉素抗性。PLy sS含有表达T7溶菌酶的 基因,能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达 毒性蛋白和非毒性蛋白。基因型:F -, ompT hsdS(rBB-mB -, gal , dcm (DE3, pLy sS , C amr4:JM109 菌株该菌株在使用pU C系列质粒载体进行DNA转化
3、或用M13 phage载体进行转 染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的La cZAM15进行a-互补，从 而显示。-半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA 1, endA 1, gy r A 96, thi -1, hsdR17, supE44, re lA 1, A(lac -proA B /FtraD36, proAB+, lacIq , lacZAM15 5:TO P10 菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。基因型:F -, mcr A A(mrr-hsd RMS-mcrBC , 98O , lacZAM15,A
4、lac X 74, recA 1 , araA139A(ara-leu7697, galU , galK , rps , (Strr endA1, nupG6:HB101 菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型:supE44, hsdS20(rB-mB -, recA 13, ara -14, proA 2, lacY1, galK2, rpsL20, xy l-5, mtl-1, le uB6, thi-17:M110 或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GA TC序列中腺嘌吟N-6位上引入甲基,后者在CCA /TGC序列
5、的第一个胞嘧啶C -5 位置上引入甲基。常用的菌株都会产生dam,dcm，从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割，如F baI和MboI等，一般生物公 司提供的内切酶说明中均有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响，如XbaI, BclI等。而且甲 基化只发生在特定序列，以XbaI为例，只有在位点序列旁出现GA或TC，该XbaI位 才会被甲基化。而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法：(1选用上述酶的同功酶，如Sau3AI , DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲 基化影响；(2利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备，如E.coli JM110和
6、链霉菌 等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞 中抽提的DNA就能被上述酶切割。8:E.coli JM110要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110如果由JM110或SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化.各种感受态细胞的区别用途特征Xl1-Blue 菌株基因型:endA 1 gyr A 96(nalR thi-1 recA 1 relAl lac glnV44 FTn10 proAB+ lacIq A(lacZM15 hsdR17(rK- mK+。特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。
7、用途:分子克隆和质粒提取。BL21(DE3 菌株基因型:F ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB- X(DE3 lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5。特点:该菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿 主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于入噬菌体DE3区的lacU V 5启动子, 该区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。用途:蛋白质表达。BL21(DE3ply 菌株基因型:F - ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB- X(DE3 pLysS(cmR。特点:该菌株带有p
8、Ly sS，具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达。适合于毒性蛋白和非毒性蛋 白的表达。用途:蛋白质表达DH 5a菌株基因型:F - endAl glnV44 thi-1 recAl relAl gyr A 96 deoR nupG O80dlacZAM15 (lacZYA-argF U 169, hsdR17(rK-, X-特点:一种常用于质粒克隆的菌株。其O80dlacZAM15基因的表达产物与pU C 载体编码的。-半乳糖苷酶氨基端实现a互补，可用于蓝白斑筛选。recA 1和endA 1 的突变有利于克隆DNA
9、的稳定和高纯度质粒DNA的提取。用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。JM109菌株基因型:endA 1 glnV44 thi-1 relAl gyr A 96 recA 1 mcrB+ A(lac-proA B e14- F traD36 proAB+ laclq lacZAM15hsdR17(rK-mK+。特点:部分抗性缺陷，适合重复 基因表达,可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。DH10B菌株基因型:F - mcr A A(mrr-hsdRMS-mcrBC O80dlacZAM15 AlacX74 endA1 recA1 deoRA(ara,leu
10、7697 araD139 galU galK nupG rpsL X-The most widely used E. coli strain for BAC cloning is DH10B 。host for pUC and other a-complementation vectors; pBR322useful for generating genomic libraries containing methylated cytosine or adenine residues, useful for plasmid rescue procedures o ELECTROMA X DH10
11、B T1 CELLS说明：DH10B细胞是高转化效率的E. coli,可以完美应用于大多数实验应用。DH10B基因型具有以下特点：? lacZAM15用于重组克隆的蓝/白斑筛选?消除了 m crA、mcrBC、mrr和hsdRMS限制系统，允许构建更多具有代表 性的基因组文库(1,2? endA1突变，可以增加质粒产量和数量?高效率转化大小为150 kb的质粒，用于产生cDNA或基因组文库DH10B?可以表达tonA的基因型,tonA能够提供对T1和T5噬菌体感染的抗 性(DH10B? T1R。DH10B?的基因型:F mcrA A(mrr-hsdRMS-mcrBC 80lacZAM15 AlacX74 recA1 endAl araD139 A(ara, leu7697 galU galK X rpsL (StrR nupGDH10B? T1R 的基因型:F mcrA A(mrr-hsdRMS-mcrBC 80lacZAM15 AlacX74recA1 endA1 araD139 A(ara, leu7697 galU galK X rpsL (StrR nupG tonA
