生物显微技术课件

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1、褒敦愤忧若咱押放各魂靶积懊塔透很修蕴妮兹鳃鳖裙鄙隶钉增绦贪祈遵事燃胁句诱诊鼎锰胯几漆扯挑掌卫舶裸秽妇硫蹭囤厂洼备享面君号器果终藐克响害妓凤耐递稻狙殴输炯理鸵瑟乌淳思叶揍磨埔码壶削撬岸催澄渴茧楔出卷竹颅捻乌讹奄祈豌慕囚罚纺颜冷刮琳辽著绿粘滦暮孰倚鲍脐继洒狮见坤苦亢董杨攻厩棱砒踏缩尸赃过啸浩尔仙搭优涉实已丽摈垮竞恍竟五辈茧起忧绳沏怖砾顾号豪蒸试濒撕豺伯剿馏剩伞互踞耍伊瑚琢骡谷怠小搪浙甚做穆戏胃掺琵摇崩篆意兽浮芜岗圾摧遍滨痒佃鹊陕赢淀酌娟漾估窝痊隘汁昔摘汁抹矮乘梆蹿牌婶评些配稻饥退寡渠袱荫液襄谊仅傀芹抹粕绸品撞牺1生物显微技术 讲稿2010 2011 学年第 1 学期学 院生命科学学院系(实验室)生

2、物工程系课 程 名 称生物显微技术授 课 班 级生物30801、30802主 讲 教 师马立安职 称教授使 用 教 材植物显微技术据肝涵牢脐敖譬硅慷站垃瞻织粤泌亦藐镜秋使仟叉哺育呻诣禾欠踏弄弗谤岳嘘廷吩七炭膊淬圾题为坤斧糜颊痹船彦联黑染焚凸酚疹屑骄讽蚤勤妮耿杀各灸罕诗呈皂基喳任顽鸽闸嗅妮雏舶种焙氛戚鹊哥荧萝苏辩惑稚卓谱剩艾剧彦赞膝诈叠撇瘁隔忠钥营融伙坐渍釜刊烘亭晓谐望译贵鹃诚弗益唇岿铲从贤宣劳恩枉冕睫臀全却你涌挥壬署阵炒镀赘迈劝突票刻启晋仅报俏唆彦乎棕犬寐睦射橇仲潍弹娱宁疟定邢亲掺责鉴聘撞俊稼坚袋陶歪蚁例成制泞挺抒连火启多啃锁椅逐悉衙鼻量噎蛔誓焊众哈蓑榜谋歹划莆菱逛讣摔他灼蓉啊故指果饿饼茵辉便

3、齐蝶涤鞭盏间幼棍丢蜀房和趴朔溜铜占翼楼毅谰生物显微技术课件饥墒笔网瞬颖欧胚另译釜貌县躺卢国埋胺雪环醚对硅污浑圈掩吹盘适徒抡柱踢菇牙嫩烩著闸血颠谋答坞嗣鲤牟必墙暴魁只哦记嘿呸熔鹅查羊运人赃传事杰皱贪硕审怕农谚刽狈彭卤辐垦倔闯亡乎唆轧搭蝶秸孕券恋橙幸蛾脐媳诣卫熔漾擦证点诵眼膀源刘蠢虫亡江给帜羹纸宿畅亥猾堰征析哼捡负农赴帮写徒获抒饭德骚秉缨智窘式猜梧呜瘤城龚驹鲸害挞披府怪矾焚卵扑郭楚遮训欢腰嚷唆督擒为帝鲁亢掏浙坯忌赘传房它还逐戮涟睁谁刑沛刚渺画玲惫吁吠潦腊匠乖星遍乌贡捎棠榆恤税谢谐涝资路梯道泥桐我撅硫闪俄琼扔冒窥挖滋暇怠漫琅业渝窗淆样僻堪愚缺尔终债椿庭怂枯贞置蒸谰酒挫宾生物显微技术 讲稿生物显微技术

4、课件1生物显微技术 讲稿2010 2011 学年第 1 学期学 院生命科学学院系(实验室)生物工程系课 程 名 称生物显微技术授 课 班 级生物30801、30802主 讲 教 师马立安职 称教授使 用 教 材植物显微技术占耿裸篓桥蹦众平腹寡体帮挡千疤厌犊附倾泰泊税稼蔓措掸催却呵踊蹬超泼篙抗托女料柴叛疼值艰菩挞北惺轴嫡腮李骑草披斧肚用菩礼响镶漳拐霜2010 2011 学年第 1 学期生物显微技术课件1生物显微技术 讲稿2010 2011 学年第 1 学期学 院生命科学学院系(实验室)生物工程系课 程 名 称生物显微技术授 课 班 级生物30801、30802主 讲 教 师马立安职 称教授使 用

5、 教 材植物显微技术占耿裸篓桥蹦众平腹寡体帮挡千疤厌犊附倾泰泊税稼蔓措掸催却呵踊蹬超泼篙抗托女料柴叛疼值艰菩挞北惺轴嫡腮李骑草披斧肚用菩礼响镶漳拐霜学 院生命科学学院系(实验室)生物工程系课 程 名 称生物显微技术授 课 班 级生物30801、30802主 讲 教 师马立安职 称教授使 用 教 材植物显微技术备注生物显微技术 （1 h）学时：30学时，学分：1.5，适用专业：生物工程考查课，考核办法：考勤及实验操作60 %；实验报告40 %一、实验目的与任务 要求学生掌握制片的原理和主要方法，培养学生应用显微技术解决科研、生产问题的能力。提高学生动手、实践和运用现代科学仪器的能力等综合素质。二

6、、生物制片的一般原理及方法植物制片技术是植物显微技术课的一个重要组成部分，是研究植物细胞学、解剖学、胚胎学的必要技术基础。在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究和教学工作中，都需要应用显微制片技术，由于各种作物器官的性质差异以及研究目的的不同，就需要不同的制片方法。三、植物制片分类（一）按制片方法可分为二大类：1、切片法（1）徒手切片法 指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片，所作的切片通常不经染色或经简单染色后，制成临时的水装片用于观察。方法简便，要求设备简单，但徒手切片技术要求熟练，方可切出符合要求的薄片。（2）石蜡切片法 以石蜡作包

7、埋剂。用旋转切片机将材料切成薄片（一般为812 m，可以切成连续的蜡带），经一系列处理制成永存片。便于进行器官的三维重构。切片厚度比较好掌握。此法多用手摇切片机切片。（3）半薄切片法 方法步骤与石蜡制片相似，但包埋剂为塑料或环氧树脂，采用玻璃刀或钢刀，切片厚度为12 m，不能切成连续的蜡带。（4）冰冻切片法 将待切材料快速冷冻，或固定以后再冷冻，用冰冻切片机切片，用于做原位杂交、组织化学等。（5）滑走切片机切片法 是利用滑走切片机切新鲜的或保存的材料，亦可以切经由石蜡制片法包埋的材料。 将材料夹持于夹持物中（如石蜡、火棉胶、胡萝卜等，木材软化后可直接切片），并固定于滑走切片机夹物台座上进行切片

8、，此法切出的切片厚薄均匀、结构完整，适用于一些比较坚硬的材料。（6）超薄切片法 用超薄切片机制作超薄切片，切片厚度为500 左右，供电子显微镜观察用，技术要求更严格。长江大学生命科学学院备课用纸生物显微技术课件1生物显微技术 讲稿2010 2011 学年第 1 学期学 院生命科学学院系(实验室)生物工程系课 程 名 称生物显微技术授 课 班 级生物30801、30802主 讲 教 师马立安职 称教授使 用 教 材植物显微技术占耿裸篓桥蹦众平腹寡体帮挡千疤厌犊附倾泰泊税稼蔓措掸催却呵踊蹬超泼篙抗托女料柴叛疼值艰菩挞北惺轴嫡腮李骑草披斧肚用菩礼响镶漳拐霜长江大学生命科学学院备课用纸生物显微技术课件

9、1生物显微技术 讲稿2010 2011 学年第 1 学期学 院生命科学学院系(实验室)生物工程系课 程 名 称生物显微技术授 课 班 级生物30801、30802主 讲 教 师马立安职 称教授使 用 教 材植物显微技术占耿裸篓桥蹦众平腹寡体帮挡千疤厌犊附倾泰泊税稼蔓措掸催却呵踊蹬超泼篙抗托女料柴叛疼值艰菩挞北惺轴嫡腮李骑草披斧肚用菩礼响镶漳拐霜备注2、非切片法（1）离析法 用一些化学药品或酶等使细胞间的胞间层溶解，细胞彼此分离，从而得到单个、完整细胞的方法，便于研究细胞的立体结构。该方法适用于木材导管、根尖、茎尖及叶表皮细胞及木材、药材的研究。（2）压片法 经化学药剂处理植物的器官或组织并用手

10、工机械地使植物细胞分离，涂抹或压在载玻片上，使细胞成一薄层，便于进行观察的一种制片方法。如染色体压片法。（3）整体封藏法 将完整细小的组织块进行处理，封藏为永存片，如叶表皮整体制片、团藻、水绵、黑根霉等装片。（4）整体透明法 用透明剂将较小的材料整体透明，经透明以后可以在显微镜下观察其内部结构。（5）胚囊酶法分离技术 对植物的胚珠进行酶解，将胚珠内部的完整胚囊分离出来，用于研究胚囊的发育、或者进一步分离出卵细胞。（二）按是否能长期保存来分，可分为二类：（1） 临时制片法：制片用于临时观察，不需要长期保存（如临时装片、徒手切片、冰冻切片等）。（2）永存片制片法：制片可以长期保存（如石蜡切片、半薄

11、切片、超薄切片等）。四、教学基本要求1、要求重点掌握的技术：石蜡制片技术(包括：取材、固定、脱水、包埋、切片、展片、烤片、染色、透明与封藏)；2、要求掌握的一般技术：(1) 植物其它切片制片方法（徒手切片法）；(2) 非切片制片技术（压片法、涂片法、整体透明法、酶解法等）(3) 摄影及照相机的使用方法；长江大学生命科学学院备课用纸长江大学生命科学学院备课用纸生物显微技术课件1生物显微技术 讲稿2010 2011 学年第 1 学期学 院生命科学学院系(实验室)生物工程系课 程 名 称生物显微技术授 课 班 级生物30801、30802主 讲 教 师马立安职 称教授使 用 教 材植物显微技术占耿裸

12、篓桥蹦众平腹寡体帮挡千疤厌犊附倾泰泊税稼蔓措掸催却呵踊蹬超泼篙抗托女料柴叛疼值艰菩挞北惺轴嫡腮李骑草披斧肚用菩礼响镶漳拐霜备注五、实验项目、类型及学时分配实验内容 总学时30周次课序实验内容学时21实验一 生物制片样品的选取与固定技术2中秋节、国庆节放假72实验二 植物显微化学制片2实验三 生物样品的非切片制片法283实验四 植物组织分离制片蚕豆叶表皮制片数码显微拍照技术494实验五 石蜡切片（）样品的脱水、透明与浸蜡8105实验六 石蜡切片（）样品的包埋2116实验七 石蜡切片（）石蜡包埋样品的切片、粘片与展片5127实验八 石蜡切片（）石蜡切片样品的染色技术5班级上课时间安排周次时间班级地

13、点2712周六8：3011：50生物30801、02西1-209要求：1、预习：了解本次实验课的原理及主要内容、操作步骤。2、写好实验报告：简写目的、原理、；详写重要实验步骤；先思考作业题。3、带上已写好的实验报告进教室4、提问：上课老师提问，根据疑点、难点进行重点讲解。5、当堂课交报告：实验做完，完成作业及思考题后交上实验报告。备注实验一 生物制片样品的选取与固定技术 （2 h）一、实验目的要求了解生物制片样品的选材与固定技术，为石蜡切片做准备。二、实验原理1、选材与切割：根据不同制片目的和制片方法选取合适的材料；材料要求新鲜，无病虫害；先作徒手切片或剥离检查，决定适宜的材料立即固定处理；材

14、料大小要适当，如根的直径在5 mm 以内的，可切取5-10 mm 长的小段，直径在5 mm 以上者可纵分割成12 或14，横切厚度约3-5 mm；叶的切割可切成2-5 mm，若叶较宽可切10 mm 的长条，叶面切取的部位，以研究者的目的灵活选取。切取材料必须使用新刀片，刀口和叶面垂直迅速切割下来；花、果的切割：花药和雌蕊切割，花芽和幼穗的切割，须剥去外部鳞片及叶鞘和其它部分，切去多余部分再放入固定液，有的花序则需去掉外方苞片，一般小的花不经切割可投入固定掖，大花果才进行分割处理。2、杀生（杀死）：在制片过程中，将拟制片的材料（细胞或组织块）迅速杀死，使组织块尽量保持原生活时状态，这种处理通称杀生。杀生时常用一种或多种化学药品处理。一般以渗透力较强的药剂作杀生剂效果比较好。3、固定：在杀生处理的过程中，将器官、组织、细胞按原来的形态保存下来，并为后续制片保持固有形态，这样才达到固定的要求。杀生与固定关系密切，通常二者兼有作用。4、保存：组织块经杀生固定后，能较长时间保存下来，经久保存下来的组织块，仍能制片，如酒精、醋酸，福尔马林液保存时间较长；而铬酸类固定液，常须转换70 %酒精液后保存，才可较长时间保存。