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1、项 目葡萄糖（GLU）方 法葡萄糖氧化酶终点法目 录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理在葡萄糖氧化酶的作用下，-D-葡萄糖氧化生成过氧化氢和葡萄糖酸。过氧化氢在过氧化物酶的存在下与苯酚、4-氨基安替比林氧化缩合成红色醌式染料。此染料在500nm处有最大吸收峰，其吸光度值与葡萄糖含量
2、成正比。GOD-D-葡萄糖 + H2O + O2 - H2O2 + D-葡萄糖酸POD H2O2 + 4-氨基安替比林 + 苯酚 - 醌亚胺（红色）+ H2O2标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。有些药物长期应用，可使患者糖代谢发生障碍，引起血糖增高，因而应当在使用这些药物期间定期监测血糖，避免引起高血糖。常用药物中可致血糖增高
3、的有以下几类。 糖皮质激素：糖皮质激素药物如强的松、氢化可的松、抗炎松等，临床应用广泛。糖皮质激素可通过三条途径影响糖代谢：（1）增强糖元分解；（2）使糖异生途径活动；（3）减少外周组织对葡萄糖的作用，因而血糖升高。如果大剂量或长期使用糖皮质激素治疗，应密切监测血糖，根据情况适当减少剂量或配合降糖药物应用。 甲状腺制剂：甲状腺激素（甲碘胺、甲状腺素、甲状腺球蛋白），可以促进葡萄糖的吸收，加速糖元分解及糖异生，使血糖增高。因而应用甲状腺制剂时应严密观察，特别是糖尿病病人需用甲状腺制剂时应慎重给药。 肾上腺素：肾上腺素可动员肝及肌肉的糖元分解，使血糖升高。一般来说，肾上腺素及拟肾上腺素制剂很少会长
4、时间就用，所以对血糖的影响不大。 利尿剂：噻唪类利尿剂长时间应用，可使病人的糖耐量降低而升高血糖，可能是抑制胰岛素分泌或使糖元分解的缘故。噻唪类利尿剂致高血糖大多出现在用药2-3个月后，停药能自行恢复。 避孕药：包括雌激素与黄体酮样衍生物，这些药物均具有降低糖耐量和升高血糖的作用。因此患有糖尿病的育龄妇女，不能服用这些避孕药。 异烟肼：异烟肼是抗结核病的一线药物，治疗结核病时用药期至少在半年以上。长期用异烟肼可影响糖代谢，使糖耐量降低，因此在用药期间应定期检查血糖并采取相应措施。当糖尿病合并肺结核时，异烟肼忌与磺脲类降糖药合用，否则可能产生不可逆糖尿病。 其它：如烟酸及其衍生物、吩噻嗪类药物、
5、生长素、促肾上腺皮质激素、双香豆素、去甲基麻黄碱等药物，均有增高血糖浓度的作用，使用时应注意监测血糖，避免引起高血糖或糖尿。2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3 抗凝剂：血浆使用EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。2.4 标本处理：血标本室温放置30min45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8保存。3试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳
6、光科技有限责任公司GLU试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下： 组 成浓 度磷酸盐缓冲液0.1mmol/L PH=7.5 葡萄糖氧化酶（GOD）15u/mL过氧化物酶 （POD） 1.5U/mL变旋酶2.0U/mL4-氨基安替比林0.25mmol/L苯酚0.75mmol/L稳定剂3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3 试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22稳定2
7、8天，试剂应避免污染。试剂颜色为无色至浅粉色，当试剂变色或者在546nm的吸光度高于0.15ABS，按照试剂失效处理。多项校准血清在2-8储存至标签所示失效日期，复溶后-20保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。试剂盒配备的水标准液在2-8储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8储存避免污染，可稳定2个月。4仪器KONELAB 30型号仪器。性能：波长500nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5操作样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6计算A测定C = C
8、0A标准 式中：c 测定葡萄糖浓度，g/L；A测定 标本管吸光度；A标准 标准管吸光度；CO 校准血清葡萄糖浓度，g/L；7操作性能7.1 精密度：批内CV 0.25%，批间CV 1.87%。7.2 准确度：检测结果的相对不准确度10%。7.3 灵敏度：葡萄糖浓度为：10mmol/L时，显色吸光度为0.5580.660。7.4 可报告范围：血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为27.8mmol/L。7.5 特异性：测量值在给定值的90%-110范围内。7.6 干扰：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸80mg/ml对测试结果无明显影响。8参考值4.166.44mmol/L。临床意义血糖(英文名称: glucose)测定试剂盒用于定量测定血清中葡萄糖的含量。葡萄糖是存在于人体血液中最主要的碳水化合物，葡萄糖浓度的测定常用于内分泌功能的检查。血糖增高常见于甲状腺机能亢进、糖尿病等；血糖降低常见于胰岛素增多症、胰腺癌等。附录A: 参数
