抗原抗体反应及应用

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1、最新资料推荐抗原抗体反应及应用不论天然的还是人工合成的分子,只要能被机体的免疫系统识别的都可以诱导机体的免疫应答,产生相应的抗体。大多数抗体和抗原本身是既有免疫原性(诱发产生特异抗体), 又有反应原性(与特异的抗体相结合)。抗原与抗体的特异性反应不仅可以在体内进行,而且可以在体外进行。一切利用血清学技术方法所进行的各种测试都是基于这一根本的特性。抗体反应技术的应用之广泛已经远远超出了免疫学、医学、甚至生命科学的范围,成为类微量, 灵敏,快速的检测分析方法。本章着重介绍抗体制备, 抗体抗原反应原理及技术方法的应用。第一节抗体的制备环境中的大部分生物(包括病原生物)及其产物分子和一些化合物对哺乳动

2、物的免疫系统而言是外源抗原, 这些抗原能通过侵染或其他的途径刺激免疫系统,产生以抗体为主的体液免疫应答。同样用抗原人工免疫实验动物, 可以获得含有特异性抗体的血 清,称为抗血清(antiserum),因血清中抗体是多个抗原决定簇刺 激不同B细 胞克隆而产生的抗体, 所以称多克隆抗体(polyclonal an tibody) 。一个B细胞克隆所分泌的抗体即为单克隆抗体用免疫动物的B细胞与骨髓瘤细胞融合, 在体外可以分离出许 多单个B细胞克隆, 以此方法可制备单克隆抗体 (monoclonal an tibody) 。随着分子生物学技术的发展,已经可以用抗体基因文库 (an tibody com

3、b in atorial library)筛选制备单克隆抗体。应用基因工程技术,根据需要对抗体进行改造,获得基因工程抗 体(engineeringantibody), 以 及催化 性抗体(catalyticantibody 或 abozyme) 等的全新的抗体。一、抗血清的制备1 .免疫动物(1) 抗原:免疫动物是制备抗血清的第步。免疫所用的抗原可用病毒、 细菌或者其他蛋白质抗原, 如果使 用半抗原如小分子激素等,必须与大分子载体连接, 连接剂见表71。抗原的用量视抗原种类及动物而异, 次注射小鼠可以少至几个 微克,免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加, 从几百g /次至几mg/ 次。2)佐剂及乳化:佐剂可以帮助抗原在注射部位缓慢释放,以增加免疫刺激的效果。佐剂有完全和不完全佐剂之分。完全佐剂加有灭活的分枝杆菌(如卡介苗)或棒状杆菌。福氏佐剂可从试剂公司购买,也可用羊毛脂和石蜡油按1 :最新资料推荐24 混合自行制备。佐剂与抗原按1 :1的比例混合乳化为均匀的乳液,放置后不会发生油水分离。(3) 免疫动物:常用于制备抗血清的动物打豚鼠、家免、小鼠、大鼠等,如果大量生产可用动物羊、马等,动物接受免疫的乳液量小鼠为1. 02 . 0 mL ,家兔为 24mL。抗原免疫动物的

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