FC酚法测定总酚

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1、王华.葡萄与葡萄酒实验技术操作规范.陕西:西安地图出版社,1999单宁的测定也是参考王华,1999以没食子酸为对照品(FC酚法)总酚的含量测定方法Folin-Ciocalteu 比色法(FC 酚法)一、仪器UV- 2401 PC型紫外分光光度计;超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司KQ- 2508型)恒温水浴锅二、试剂没食子酸标准品;钨酸钠,磷钼酸,85%磷酸,Na2CO3,以上试剂均为分析纯;水为蒸馏水。1.3福林试剂的配制在250mL的圆底烧瓶内加入20g钨酸钠、5g钼酸钠、140mL蒸馏水,85%的浓磷酸 10mL及浓盐酸20mL,充分混匀,以小火回流10h,再加入3g硫酸锂及15mL双

2、氧水, 开口继续煮沸15min,待双氧水完全挥发,呈亮黄色。冷却后移入250mL容量瓶中,定容 置于棕色试剂瓶中,放入冰箱中备用。1.4 Na2CO3溶液的配制称取40g Na2CO3,溶于200mL蒸馏水中,即为20%(g/L)的Na2CO3溶液。二、方法与结果1. 对照品溶液的制备并绘标准曲线精密称取没食子酸标准品0.0110g,用蒸馏水溶解并定容至100mL,得浓度为0.11mg /mL 的标准液。准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL置于25mL的棕色容量瓶中, 加蒸馏水至6.0mL,然后分别加入FC试剂0.5mL,混匀,在0.58min内加入1.5mL

3、 20%的 Na2CO3溶液,充分混合后定容,30C避光放置0.5h,以不加标准液的6.0mL蒸馏水为空白 对照,760nm下测定吸光值,每个样品平行测定三次。2、供试品溶液的制备样品溶液总酚含量的测定:准确量取制备好的乙醇粗提液0.5mL于50mL容量瓶中, 加入9.5mL蒸馏水,摇匀,再加入0.5mL福林试剂,混匀,在0.58min内加入1.5mL 20% 的Na2CO3溶液,充分混合后定容,30C避光放置0.5h,以没食子酸标准液为空白对照, 760nm下测定吸光值,每个样品平行测定6次(A为6次平行测得的吸光度)。3以没食子酸为标准品的总酚的标准曲线:Co=0.0110mg/ml4、以没1寰子酸在反应体系匚尸的质量法艮度C为横坐标,吸光度值A为纵坐标R,绘制标准曲线。次数12345678样品XV (ml)00.40.60.81.01.21.41.6A

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