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1、常用融合蛋白切割位点PROTEASECOMPANYProteaseCaptureThrombinLeu-Val-Pro-ArgGly-SerL-V-P-RG-SAmersham-Biosciences,Novagen,SIGMA,RocheBenzamidine-AgaroseFactorXaAmersham-Biosciences,Ile-Glu/Asp-Gly-ArgNewEnglandBiolabs,Benzamidine-Agarosel-E/D-GQRocheEnterokinaseAsp-Asp-Asp-Asp-LysD-D-D-D-KNewEnglandBiolabs,Novag
2、en,RocheTrypsinInhibitor-AgaroseTEVproteaseGlu-Asn-Leu-Tyr-Phe-GlnGlyInvitrogen一LifeTechnologiesNi-NTA(6Hisrecomb.TEV)E-N-L-Y-F-QGPreScissionLeu-Glu-Val-Leu-Phe-GlnGly-ProAmersham-BiosciencesGSTrapforGSTfusionenzymeL-E-V-L-F-QG-PTAGZymeHis-tagremovalbyExoproteolyticDigestionQiagenNi-NTA(6Hisrecomb.e
3、nzyme)InteinSitedithiothreitolcleavageNewEnglandBiolabsDTTeliminationbydialysisHRV3CProteaseLeu-Glu-Val-Leu-Phe-GlnGly-ProNovagenNi-NTA(6Hisrecomb.enzyme)L-E-V-L-F3G-PSUMOProteaserecognizethetertiarystructureoftheubiquitin-like(UBL)protein,SUMOInvitrogenLifeTechnologies,LifeSensorsNi-NTA(6Hisrecomb.
4、enzyme)Ni-NTA(6Hisrecomb.enzyme)Kex-2KEX2对arg的专一性高，要求最重要。-Arg-X-Lys/Arg-ArgInvitrogen一LifeTechnologies,Arg前为lys效率最高，不切-Arg-lys,Pro影响KEX2切割羧肽酶羧肽酶B可以切割C端的Lys或Arg；羧肽酶A可以切割C端除了Lys、Arg、Pro的氨基酸，但如果倒数第二个氨基酸为Pro两种羧肽酶均不能作用1.胰蛋白酶属肽链内切酶，能把多肽链中Lys和Arg残基中的羧基侧切断。2胰凝乳蛋白酶（亦称糜蛋白酶）属肽链内切酶，主要切断多肽链中的芳香族氨基酸（Phe、Trp、Tyr）残基的羧基一侧。3. 羧肽酶（分A和B型），一般的题目中没有特别指明的话就是两种类型的功能都具备，可以从羧基端切除氨基酸（若羧基端的第1个或第2个氨基酸为Pro的则不能切除）。4. 溴化氰处理，专一性的切割甲硫氨酸羧基端的肽键。
