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1、一种可吸收医用膜材料预防家兔术后肠粘连效果研究 钟振东第一作者：钟振东（1974- ）男，助理研究员，硕士，研究方向：药理，毒理病理，E-mail:,电话：13568922768通讯作者：傅荣 刘洲1 傅荣2 杨玲1 廖世平1（1.四川省医学科学院四川省人民医院实验动物研究所，邮编610072；2四川省人民医院四川省人民医院整形外科，邮编610072）摘要 目的 研究一种可吸收医用生物膜材料对家兔术后肠粘连的预防作用。方法 48只家兔按体重随即分为A组（假手术组）和B组（实验组），每组24只，B组家兔复制腹壁缺损/盲肠损伤模型，于损伤腹壁表面缝合可吸收生物膜；A组家兔制作腹腔切割假手术以作对照
2、。分别于术后3天、7天、30天，家兔人道处死后，观察腹壁处肠粘连情况；另取适当大小的粘连处组织，FAA液固定后，石蜡包埋切片，HE染色，于显微镜下观察粘连处病理形态。结果 与A组比较， B组家兔肠粘连率明显降低，粘连处炎症、水肿、组织异常增生等病变显著减少。结论 该可吸收医用生物材料可明显抑制家兔术后肠粘连。关键词 肠粘连 可吸收生物膜 预防 Prevention of an Absorbable Medical Biofilm Material on Rabbit Intestinal Adhesion Abstract Objective To study an absorbable me
3、dical biofilm material on rabbit intestinal adhesion prevention. Methods 48 rabbits were randomly divided into group A (sham group) and group B (experimental group) (n = 24), group B rabbits Copy abdominal wall defects / the cecum injury model, the damage to the abdominal wall surface suture absorba
4、ble biological film; A group of rabbits produced celiac cutting sham operation as the control. Respectively after 3 days, 7 days, 30 days, rabbits humanely killed after intestinal adhesion observe the abdominal wall at; Another adhesions at the organization of the appropriate size the FAA were fixed
5、, paraffin-embedded sections, HE staining in microscopy observed under pathological adhesions at. Results compared with group A, group B rabbit intestinal adhesion rate was significantly lower, a significant reduction in adhesion at inflammation, edema, tissue dysplasia lesions. Conclusion The absor
6、bable biological materials could significantly inhibit rabbit postoperative intestinal adhesionKey Words Intestinal Adhesion Absorbable Medical material;Prevention1872年，Bryant 首次报道l 例术后肠粘连引起致命性肠梗阻病人以来，人们为防止术后肠粘连的发生进行了大量动物实验和临床研究。尽管外科无菌术、抗生素的应用和外科技术的改进均有助于预防术后肠粘连的发生，但术后肠粘连仍是腹部手术后并发症中的一大难题，是引起肠梗阻最常见的原
7、因1。本实验以成都迪康药业自主研制的一种医用生物材料为研究对象，通过观察其对家兔术后肠粘连的干预效果，初步评价该生物材料预防肠粘连的生物活性，为该生物材料推向临床提供理论依据。1实验材料1.1 实验动物 新西兰家兔，SPF级，雌雄各半，体重1.81g-2.25g。由成都达硕生物科技有限公司提供，动物合格证号为SCXK（川）2008-24。1.2受试材料 一种可吸收医用生物材料，成都迪康药业提供。1.3实验试剂 FAA液：95乙醇(AR级），批号：20111008，成都科龙化工试剂厂生产；冰乙酸(AR级），批号：20110709，成都科龙化工试剂厂生产；甲醛(AR级），批号：20120813，成
8、都科龙化工试剂厂生产。1.4实验仪器 切片机（徕卡-1015，德国）；TSJ-Q型全自动封闭式组织脱水机；BMJ-型包埋机；PHY-型病理组织漂烘仪（常州市中威医疗仪器有限公司）；显微镜Motic BA400等；图像分析软件Motic Images Advanced。2实验方法2.1实验分组 家兔适应性喂养一周后，按体重随即分为A组和B组，其中A组为假手术组，B组为生物膜材料组，每组24只，所有动物单笼饲养于IVC动物房内。2.2家兔腹壁缺损/盲肠损伤模型制备 按参考文献2所述方法制备家兔腹壁缺损/盲肠损伤模型，但将右侧腹壁损伤改为盲肠同侧腹壁损伤。家兔过夜禁食后，按300mg/kg剂量经腹腔
9、注射10水合氯醛麻醉，剃除腹部被毛，仰卧位固定。碘伏消毒腹部皮肤，手术采用无菌操作，在腹部皮肤中线做5cm切口，腹壁中线做4cm切口进入，视盲肠所在方位牵拉暴露同侧腹壁，在距腹壁中线1cm外，锐性刮除壁层腹膜及其下部分肌层，形成2cm1cm的腹壁缺损。将盲肠提出切口外，用手术刀片轻刮浆膜表面，直至表面点状出血，刮伤盲肠面积约2cm1cm。将腹壁缺损处和盲肠刮伤表面在空气中暴露10min后，纱布吸除表面血液，假手术对照组家兔不做进一步处置，即将腹壁缺损/盲肠损伤处相对接触放置，回纳入腹。试验组家兔做相应处置， B组在损伤腹壁表面四角缝合固定一片3cm2cm可吸收医用膜，然后再将各试验组家兔腹壁缺
10、损/盲肠损伤处相对接触放置，回纳入腹。用1号丝线连续缝合关腹，以1号丝线间断缝合皮肤切口。2.2粘连评价 2.2.1常规观察 分别于术后3天、7天、30天，家兔人道处死后，U形切口掀起腹壁观察粘连情况，并照相记录。参考Belluco 4对每只家兔粘连情况进行评分，评分标准见表1。表1 家兔盲肠损伤和腹壁缺损模型的粘连评分粘连面积比例（指粘连总面积与腹壁损伤面积2cm2的百分比）评分0（无粘连）0025%126%50%251%75%376%42.2.2病理学检查 取适当大小的粘连处组织，FAA液固定后，石蜡包埋切片，HE染色，于显微镜下观察粘连处病理形态。2.3统计方法 采用SPSS 18.0统
11、计学软件进行分析，对各组家兔的粘连率采用卡方检验（X2检验）或四格表确切概率法（Fishers Exact Test）进行两两比较，P0.05时有统计学显著性差异；对各组家兔的粘连评分采用Kruskal-Wallis H法进行秩和检验统计分析，P0.05时有统计学显著性差异，并采用Nemenyi法3进一步做组间两两比较的秩和检验。3实验结果3.1.粘连评价在制备家兔腹壁缺损/盲肠损伤模型后，按对照组和各试验组的设定给予相应处置。术后3天，A、B组取8只家兔人道处死后，U形切口掀起腹壁观察粘连情况。3天时，假手术对照组（A组）、可吸收医用膜试验组（B组）大鼠腹腔内粘连率分别为100、62.5，有
12、显著性差异，B组粘连病变情况明显较A组减轻。见表2和图12。表2 3天时各组家兔粘连评分 粘连评分分组粘连评分01234A组00440B组35000图1 对照组（第3天）图2生物膜组（第3天）7天时，假手术对照组（A组）、可吸收医用膜试验组（B组）大鼠腹腔内粘连率分别为100、75，有显著性差异，B组粘连病变情况明显较A组减轻。见表3和图34。表3 7天时各组家兔粘连评分 粘连评分分组粘连评分00000A组01430B组25100图3对照组（第7天）图4生物膜组（第7天）30天时，假手术对照组（A组）、可吸收医用膜试验组（B组）大鼠腹腔内粘连率均为100， 但B组粘连病变情况明显较A组减轻，评
13、分结果见表4。表4 30天时各组家兔粘连评分 粘连评分分 组粘连评分01234A组00340B组044003.2组织学观察（见图2）3天时，假手术对照组（A组）试验标本HE染色切片显微镜下观察可见相连的盲肠及腹壁组织。可见手术创伤致盲肠浆膜层、外纵行肌层消失，紧邻的腹壁横纹肌变性坏死，其间有大量纤维素渗出沉积，有较明显的出血，可见成纤维细胞，有散在淋巴细胞、吞噬细胞浸润，也可见嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞，主要以急性炎细胞为主，少部分切片可见由成纤维细胞和毛细血管构成的疏松肉芽组织；可吸收医用膜试验组（B组）8例试验标本HE染色切片显微镜下观察可见相连的盲肠及腹壁组织。可见手术致盲肠浆膜层、外纵
14、行肌层创伤，表面有纤维素覆盖，可见散在出血；腹壁表层横纹肌变性坏死，有大量纤维素渗出沉积及散在出血，可见增生的成纤维细胞，有散在淋巴细胞、吞噬细胞浸润，也可见嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞。盲肠和腹壁间通过呈不规则网状孔隙的条带区（即植入的可吸收医用膜）相连，可吸收医用膜网状孔隙内可见散在出血，成纤维细胞增生，淋巴细胞、吞噬细胞浸润。见图56。图5对照组（第3天）HE100图6生物膜组（第3天）HE1007天时，假手术对照组（A组）8例试验标本HE染色切片显微镜下观察可见盲肠浆膜层、肌层外纵行层部分缺失，通过结缔组织与腹壁横纹肌粘连。大部分切片显示粘连的结缔组织很厚，为数十层成纤维细胞和胶原纤维，
15、内仍可见变性的横纹肌，分布有微小血管和毛细血管，有少量散在淋巴细胞浸润，偶见吞噬细胞、嗜酸性粒细胞。少部分切片上粘连的结缔组织为中等厚度，有十数层成纤维细胞和胶原纤维，但在盲肠和腹壁横纹肌粘连的边界处，结缔组织变得很厚。在2例未粘连的家兔标本HE染色切片上，显示分离的盲肠、腹壁横纹肌；盲肠浆膜层、肌层外纵行层部分缺失，横纹肌表面有较均匀的中厚结缔组织覆盖，为二、三十数层成纤维细胞和胶原纤维；可吸收医用膜试验组（B组）8例试验标本HE染色切片显微镜下观察可见粘连的盲肠及腹壁组织。盲肠浆膜层、肌层外纵行层部分缺失，通过较厚的结缔组织与腹壁横纹肌粘连。该结缔组织层主要由二、三十层成纤维细胞组成，有少量胶原纤维，可见大量多核异物巨细胞、吞噬细胞包绕可吸收医用
