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1、找本实验书 一般均有附磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2ml/L)H值；0.2mol/LN2HP溶液（mL)；02molaH2PO4溶液(L).8;.0； 2.05.9 ;00 ； 90.06； 1 ; 76.1；15. ； 8506.2;18.5 ; 81.5;22.5； 77.564;.； 73.56.5 ；31. ; 68.56.6;37.5; 62.56.7 ;43.5 ； 56.568 ；4.0； 516.； 5.0 ; 07.;6.0 ； .0 ；.0 ; 33.072 ;2.0 ； 2.07.3 ;770; 237. ；81.0； 19.07.5 ；8.0 ； 16.07.6
2、;87.0; 13.0.7;895; 1.;91.5； 8.79 ；93 ; .58.0；94.7 ； 53NaH2P42H2O:Mr=178.，0.m/L溶液为351g/L;PO12H2O:Mr=38.22，0.molL溶液为71.4g;NH2PO4H2：Mr1.03，0.2molL溶液为3.1g/L；NaHPO2：Mr=138.01,0.2moL溶液为6g/L。0M PSP(1 mM Nl, .7 mM KCl， 1.5 MKH2PO4，n 8 mMK2HPO4，pH .2)B缓冲液(pH.27.4)：NaC 137mmol/L，C 2.7mmo/,N2HPO44.3mmol/, KPO
3、1.mo/L称7.9 NCl,0.KC,0.g KH2PO4(or 1.4ga2P4）和1. 2HPO4,溶于8 ml蒸馏水中，用HC调节溶液的pH值至4，最后加蒸馏水定容至1 。保存于4冰箱中即可。需要注意的是，一般所说的浓度.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非N离子或 离子的浓度,Na 离子和K离子只是用来调节渗入压的。母液的配制:0.M NaHPO4：称取 1.6g N2PO12H2O,溶于 000ml 水0.2M NaHPO4:称取 1.2N2PO42H2，溶于1000m 水多种浓度PB(pH7.4)的配制：先配 0.2B(p=7，10ml)：取19 02ml/的 NH2
4、P,81m 0.2mol/ 的 NaPO, 即可。然后 只需将0.2 PB(pH=.4)按相应比例合适稀释 即可,如：0.1P（PH=7.） :取 500 0.2 B，加水稀释至10l 即可。.01 PB （PH=7.4)：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 100m即可。002MPB (H7.4）：取10ml 02 M P,加水稀释至100ml 即可。若需要 Nal的话，加入 Nal 至0.（g/100ml）即可。另:其他多种另 PH值的 0.2M PB（0l)配方 :pH0. NH2PO4(ml) 0.2 NaH4(m)57 9.565.8985.90106.0 87.7 1.31 8
5、5 1562.518.5.377. 2.567.5 2.56.5 68 31.56.6 62537.6.7 56.543.56. 5 496.9 4555 38627.1 33 77. 2872.327419m 81m187. 1387 1.590.57.8 .5 9.57.9 7 98. 5.3 94.0.1M 磷酸盐缓冲液（BS)配制措施称取8g NaC、0g KCl、1.44g Na2HPO4和02 KHPO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的p值至.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。在f/in2(1340Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟),保存存于室温或4冰箱中。需要注意的是
6、，一般所说的浓度001 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非离子或K 离子的浓度,Na离子和K 离子只是用来调节渗入压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配备的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调P、定容、灭菌消毒。H 7.6 7.2 .0O00 100 00100NaC .5 8.5 8.5 .5Na2PO4 2.2 22 2.2 2aH2P4 0.12 0. .4根据经验来看，新鲜配备的S搅匀后其值约在7.7.4之间，可是在温度的影响下,特别在夏天,其电离常数发生了变化,在通过昼夜的时间后,P值会明显变化（我亲自测过偏酸）。因此做实验的同窗可要注意了,P值也许会影响实验成果,
7、甚至也许导致阴性。因此务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最佳用试纸测一下过夜了的PS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。PB缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2,NHPO4?12H2O.6, K4 024g,溶于900l双蒸水中,用盐酸调pH值至4，加水定容至L，常温保存备用。BT缓冲液取300lTeen20加入PBS00ml中，混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍，配备为浓缩液，工作时候十倍稀释,那么，在刚配好浓缩液时,PH在6.5左右,明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更以便的措施。十倍稀释后来,H自动升高到所需要的值。不需
8、要其他任何解决。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次PH8.0的PS配方具体1. NaCl 17mmlL，Cl 2.7molL,a2PO4 4.3mol/L， KH2O4 14mmol/2.向烧杯中加入约0 ml的去离子水,充足搅拌溶解。.滴加浓盐酸将H值调节至8，然后加入去离子水将溶液定容至1 。. 高温高压灭菌后,室温保存。注意:上述PBS uffe中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM aCl2和.5 mM Cl2。0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phoshate Bffe olton，PBS)的配制:甲液:0.0mol/L NHPO溶液 :称取磷酸氢二钠.45 7.9g,加蒸 馏水至100ml； 乙液：0.5m KHP04溶液: 称取磷酸二氢钾， .07 6803g，加蒸馏水至1000m1。 将甲乙液分装在棕色瓶内,于4冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需p的缓冲液,见下表:pH甲液ml 乙液5.2 2. 97.55.59 5.0 9.91 .0 9.6.24 20.80.0.4 30.0 70.06 00
