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1、不同生物药厂禽流感疫苗对蛋鸡免疫效果评估【摘要】禽流感病毒是由A型流感病毒引起的禽类(包括家禽和野禽)的感染和/或感染综合症。目前危害最严重是H5N1亚型高致病性禽流感病毒及其变异株，不仅给养禽业带来巨大经济损失，而且威胁人的公共卫生安全。世界卫生组织(OIE)和我国都将高致病性禽流感列为A类动物传染病。我国高致病性禽流感的防控的关键环节是主要通过接种疫苗来控制H5N1病毒，实行强制免疫政策，所以疫苗的免疫效果对养禽业尤为重要。为了解不同企业生产的禽流感疫苗的免疫效果，为防疫疫苗的选择提供参考依据，我们进行了比对实验，实验选择六种不同企业生产的H5亚型禽流感重组疫苗（以下分别称为 “A疫苗”、
2、“B疫苗”、“C疫苗”、“D疫苗”、“E疫苗” 、“F疫苗”）分别免疫鸡群，定期对鸡场开展禽流感免疫抗体检测，比较不同企业禽流感疫苗的免疫效果，对不同企业的禽流感疫苗进行免疫效果评价，选择免疫效果好的疫苗作为本市防疫之用。关键词：禽流感;疫苗;免疫效果禽流感病毒（Avian Influenza Virus, AIV）是正粘病毒科，流感病毒属，单链负股分阶段RNA病毒。禽流感病毒的亚型众多，病毒表面糖蛋白血凝素（HA）有16种为H1-H16和神经氨酸酶（NA）有9种为N1-N9共9个亚型，HA和NA的抗原变异是相互独立的,各亚型之间缺乏交叉保护，同一亚型病毒有不同的变异株，所有亚型的病毒均可以在
3、这些宿主中分离到，野生鸟类是其天然宿主2，禽流感病毒根据其致病性分为高致病性和低致病性，H5N1为高致病性禽流感病毒。禽流感的发生给养禽业带来的经济损失不可估量，同时还严重威胁到人类的身体健康，因此控制禽流感病毒尤为重要。我国主要采取“扑杀与强制免疫相结合”的综合防制措施，取得比较理想的预防与防制的效果。目前国内有多家企业生产H5亚型禽流感灭活苗，为了解不同疫苗的免疫效果，提高疫苗的保护水平，本次比对实验选择A、B、C、D、E、F 六种禽流感重组二价灭活疫苗分别免疫鸡群，并制定了严格的免疫程序，免疫后定期检测血清的HI抗体效价，观察不同企业生产的六种疫苗免疫鸡群后鸡体内产生抗体的消长规律及差异
4、，为我市防疫工作提供科学依据。1材料与方法1.1试验材料:96孔V型微量血凝板、可调微里移液器，微量振荡器、普通离心机、1%红细胞悬液、0.85%生理盐水。1.2试剂：H5禽流感病毒抗原和H5禽流感病毒阳性血清，由哈尔滨维科生物技术开发公司生产。1.3 试验疫苗:禽流感重组二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株），来自不同生产企业，分别为：“A疫苗”， “B疫苗”， “C疫苗”， “D疫苗”， “E疫苗” “F疫苗”。1.4试验鸡群和方法:试验在淮安市四个鸡场实施，分别为XY场、HZ场、HA场、JH场。每个养鸡场自由选择两种H5亚型禽流感疫苗对鸡场进行高致病性禽流感免疫。试验动物：每个鸡场整栋中
5、的鸡群分成二组，每组约1000只鸡左右，XY场用“A疫苗”和 “B疫苗”免疫二组雏鸡；HZ场用“C疫苗”和 “D疫苗” 免疫二组雏鸡；HA场用“E疫苗”和“F疫苗” 免疫二组雏鸡；JH场“C疫苗”和 “E疫苗” 免疫二组雏鸡。鸡场在雏鸡15日龄进行首免，颈部注射0.5ml/只，首免后每隔一周进行一次抗体检测水平(首免后第一周、第二周、第三周共三次)；首免21天后进行第二次免疫，第二次免疫以后继续每隔一周监测一次抗体，抗体水平达到峰值时每隔4周监测一次抗体，直到下次强化免疫开始时结束抗体监测。1.5血凝（HA）与血凝抑制（HI）试验方法:采用中华人民共和国国家标准GB/T18936-2003高致
6、性禽流感诊断技术。2试验结果（log2）之间，雏鸡在14日龄前都具体相对好的抗体保护水平。四个养鸡场母源抗体水平、首免和二免抗体水平平均值具体检测数据见表1-表5。表1：XY场禽流感HI抗体检测数据疫苗批 号检测方法样本数14日龄母源抗体水平平均值（log2）首免日龄首免抗体水平平均值（log2）二免日龄二免抗体水平平均值（log2）1周2周3周1周2周3周4周8周12周16周20周A疫苗140840301HAHI804.03154.135.337.31367.539.91010109.89.689.53B疫苗20141006HAHI804.23154.033.96367.99.5310101
7、09.789.659.4表2：HZ场禽流感HI抗体检测数据疫苗批 号检测方法样本数14日龄母源抗体水平平均值（log2）首免日龄首免抗体水平平均值（log2）二免日龄二免抗体水平平均值（log2）1周2周3周1周2周3周4周8周12周16周20周C疫苗2014028HAHI1604.09151.790.575.08366.938.28.858.087.449.48.586.98D疫苗140170301HAHI804.11150.930.031.653657.037.657.655.589.386.956.75表3：HA场禽流感HI抗体检测数据疫苗批 号检测方法样本数14日龄母源抗体水平平均值（
8、log2）首免日龄首免抗体水平平均值（log2）二免日龄二免抗体水平平均值（log2）1周2周3周1周2周3周4周8周12周16周20周E疫苗2014092HAHI803.981503.374.7368.98.959.039.019.77.28.28.6F疫苗201432HAHI803.971505.336.9369.089.69.459.229.78.658.58.9表4：JH场禽流感HI抗体检测数据疫苗批 号检测方法样本数14日龄母源抗体水平平均值（log2）首免日龄首免抗体水平平均值（log2）二免日龄二免抗体水平平均值（log2）1周2周3周1周2周3周4周8周12周16周20周E疫苗
9、2014110HAHI804.01152.62.831.93366.48.258.99.239.459.448.838.3C疫苗2014028HAHI1604.09151.790.575.08366.938.28.858.087.449.48.586.98表5：各疫苗免疫效果检测数据汇总表疫苗批 号检测方法样本数14日龄母源抗体水平平均值（log2）首免日龄首免抗体水平平均值（log2）二免日龄二免抗体水平平均值（log2）1周2周3周1周2周3周4周8周12周16周20周A疫苗140840301HAHI804.03154.135.337.31367.539.91010109.89.689.5
10、3B疫苗20141006HAHI804.23154.033.96367.99.531010109.789.659.4C疫苗2014028HAHI1604.09151.790.575.08366.938.28.858.087.449.48.586.98D疫苗140170301HAHI804.11150.930.031.653657.037.657.655.589.386.956.75E疫苗2014092HAHI803.981503.374.7368.98.959.039.019.77.28.28.6E疫苗2014110HAHI804.01152.62.831.93366.48.258.99.23
11、9.459.448.838.3F疫苗201432HAHI803.971505.336.9369.089.69.459.229.78.658.58.93讨论3.1 XY鸡场选择A疫苗和B疫苗进行免疫(见表1)，首免后两种疫苗1周后抗体滴度基本相同， 2周后A疫苗抗体上升明显，第2周抗体水平已经高达5以上，具有很好免疫保护作用，B疫苗2周抗体水平略有下降，两种疫苗首免后第2周后抗体滴度两者相差1（log2）滴度以上，两种疫苗差异明显。二免后抗体水平两组都急剧上升，二免第3周抗体滴度达最高值，12周后稍有降低，但是仍维持在较高的抗体水平，两种疫苗在二免后抗体滴度没有显著差异。两种疫苗免疫效果均较好、
12、抗体水平较为整齐。3.2 HZ鸡场用C疫苗和D疫苗进行免疫(见表2)，首免后2周内两种疫苗的抗体水平下降明显，呈渐下降趋势，3周后C疫苗抗体滴度明显高于D疫苗3.43（log2）抗体滴度。二免后C疫苗抗体上升幅度大，增长速度明显比D疫苗快，两种疫苗抗体水平前三周相差有至少1（log2）滴度，两组疫苗存在明显差异。3.3 HA鸡场用E疫苗和F疫苗进行免疫(见表3)，首免后鸡群出现抗体滴度下降，1周抗体水平为0，到第2周才产生抗体， F疫苗首免后第2周、3周抗体高出E疫苗2（log2）滴度，首免情况两种疫苗存在显著差异。二免后两种疫苗产生的抗体明显增长，高出首免2（log2）滴度以上，到第8周达到
13、高峰，二免后两种疫苗的抗体增长水平基本相同，无明显差异。3.4 JH鸡场用E疫苗和C疫苗进行免疫(见表4),首免后的1-2周内，两种疫苗抗体滴度都不高，但是3周后的E疫苗的抗体滴明显低于C疫苗，两种疫苗首免后抗体水平稍有差异。二免后两种疫苗的抗体增长趋势明显，E疫苗抗体上升幅度大于C疫苗，而且高峰值维持的时间也比C疫苗长。尊敬的读者，如果您申报职称，需要发明专利证书或实用新型专利证书，可以联系本文作者为您提供帮助或指导，联系方式：3.5由表5可知，A疫苗首免后抗体水平快速上升，免疫效果显著，二免后3周抗体滴度达到10（log2），12周后抗体滴度才略有下降；B疫苗首免后第1、2周抗体滴度相近，第3周抗体滴度与A疫苗有一点差异。二免后A疫苗和B疫苗抗体水平基本相同，没有明显差异，抗体水平都很高，对鸡群都有较强的免疫保护作用 ；F疫苗首免后第一周没有抗体，略逊于A疫苗，第2周、3周抗体水平与A疫苗基本相同，二免后抗体滴度平均在9（log2）左右与A疫苗和B疫苗也没有明显的差异；E疫苗（2014092）和C疫苗首免后2周抗体水平都低，2周后抗体滴度E疫苗（2014092）高于C疫苗，到第3周抗体水平基本相同，差异不明显，相比较前三种疫苗有显著差异；D疫苗和E疫苗（2014110）首免后抗体滴度很低，二免后抗体滴水平增长明显，达到保护鸡群的水平，但是E疫
