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1、脱落细胞学技术1.常用固定液（填空）（1）95乙醇固定液（2）乙醚乙醇固定液 （3）氯仿乙醇2.固定时间:（填空）一般为1530min。3.染色方法（填空） （1）H-E染色 （2）巴氏染色 （3）瑞-吉氏染色 4.封固涂片（填空）用二甲苯调配的中性树脂胶进行封固。标本固定的目的：主要是保持细胞的自然形态，防止细胞自溶和细菌所致的腐败；固定液能沉淀和凝固细胞内的蛋白质，并能破坏细胞内的溶酶体，从而细胞结构清晰并易于着色，所以固定愈快，细胞愈新鲜，染色效果愈好。巴氏五级法：（问答题）级：涂片中只见正常细胞和少量一般炎症细胞。级：涂片中有较多一般炎症细胞或有少量轻度核异型细胞。级：涂片中有较多核异
2、型细胞，怀疑为恶性肿瘤。级：涂片中有较多重度核异型细胞，高度怀疑为恶性肿瘤。级：涂片中有典型恶性肿瘤细胞而且数量较多，肯定为恶性肿瘤。液基细胞学技术的优点：（问答题） 涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景清晰。 筛检简便、快速。 能提高诊断的灵敏度和特异度。 能显著降低标本的不满意率。 可用于原位杂交和免疫细胞化学染色。宫颈脱落细胞学概述细胞病理学(cytopathology)：是检验医学的一个分支，是通过检查细胞的形态结构，进行健康和疾病的筛查、诊断和研究，即对无症状个体进行癌前病变的筛检，对有症状或有体征患者进行诊断和鉴别诊断。脱落细胞学的概念：脱落细胞学是利用各种采集器采取人体各个部位，
3、特别是官腔、器官表面的脱落细胞或用细针直接吸取病变器官及肿物获得的细胞，经不同方法染 色后，在显微镜下观察这些细胞形态，从而做出诊断的一门临床检验学科，故又称为临床细胞学、诊断细胞学或细胞病理学。脱落细胞学是病理学的一个分支，也是病理学的一个重要组成部分。根据上皮细胞功能分为4种：鳞状上皮、分泌性腺上皮、纤毛上皮和间皮细胞。鳞状上皮由多层上皮组成，通常分为4层。基底层细胞：最小，直径约为10m，正常情况下罕见，是唯一具有有丝分裂能力的细胞，核浆比为1:（0.51）。副底层细胞：直径约为10-15m，由2-3层圆形细胞组成，核浆比为1:（12）。中层细胞：直径约为15-40m，由数层多边形细胞组
4、成，核浆比为1:（23）。表层细胞：最大，直径约为40-60m，由各种多边形细胞组成，核浆比为1:（35）。基底层、副底层、中层的细胞核呈球圆形或卵圆形，染色质颗粒疏松，直径约8m。表层非角化型鳞状上皮细胞有小的胞核，但致密、染色深，核质交界处有狭窄空晕，核多固缩。宫颈脱落细胞炎症反应性改变细胞炎症反应性改变时，基本病理变化包括：退行性变化 、细胞再生、化生、细胞增生性变化细胞的退行性变化包括：细胞的变性 和 坏死。细胞的退行性变化根据发生起因可分为：生理性、病理性 和 人工性 三种。在较大的癌细胞中，核周围绕多个小空泡并呈淡灰蓝色是粘液腺癌细胞的特点。子宫颈鳞状上皮细胞：癌前病变细胞与癌细胞
5、：（由轻到重）1、非典型鳞状上皮细胞2、低度鳞状上皮内病变3、高度鳞状上皮内病变4、鳞状细胞癌细胞变性：细胞内或间质内出现某些异常物质或原有物质沉积过多。如细胞水肿，空泡变性。细胞坏死：细胞的病理性死亡。再生：细胞死亡或消失后由同类细胞新生来补充。化生：一种已分化成熟的组织在慢性炎症或其他理化因素作用下，在形态和功能上均转变为另一种成熟的组织的过程。增生（指非肿瘤性增生）：多由慢性炎症或其它理化因素刺激所致的上皮细胞分裂增殖增强，数目增多，常伴有细胞体积增大。肿瘤：是机体在各种致瘤因素或过度分化作用下，局部组织的细胞在基因水平上失去了对其生长的正常调控，导致异常增生而形成的新生物。这种新生物常
6、形成局部肿块。异型性：肿瘤组织无论在细胞形态和组织结构上，都与其发源的正常组织有不同程度的差异，这种差异称为异型性。化生的鳞状上皮细胞分为：未成熟型 和 成熟型两种。细胞的退行性变化包括：细胞的变性 和 坏死。非典型鳞状上皮细胞 （1） 无明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞 （2）非典型鳞状上皮细胞，不除外高度鳞状上皮内病变细胞坏死（三种表现）a.核固缩：细胞核体积缩小，着色深，形状不规则。b.核碎裂：细胞核破裂，形成数个染色深的碎片分散于细胞浆内。c.核溶解：细胞核只留下隐约可见的影子，核结构完全不存在。未成熟鳞化细胞形态特点：因增生的储备细胞只达深棘层细胞的成熟度，所以涂片中的鳞化细胞与外底
7、层细胞相似。多数成圆形或椭圆形，少数呈星形，梭形或蝌蚪形；胞核轻度增大，但形状规则，染色质分布较均匀，略深，细胞排列紧密，并组成细胞群。细胞增生的形态变化：细胞核体积增大，染色质结构清晰，颗粒增粗，着色加深，分布均匀。细胞核可有轻度大小不等，但核形仍为圆形或椭圆形，核畸形不明显，核质比比正常增大。良性肿瘤的细胞学特点：良性肿瘤，瘤细胞分化成熟，异型性小，与其原有组织的形态相似。核分裂象无或稀少，不见病理性核分裂。恶性肿瘤的细胞学特点：一、 细胞核的变化1. 核大小异常2. 核形态异常3. 核数量增多4. 核染色质结构异常5. 核仁：核仁异常对判断恶性肿瘤细胞极为重要。1）.大小异常：核仁明显增
8、大。同一细胞内，核仁明显大小不等也提示为恶性特征。 2）.形态异常：核仁可呈锯齿状、三角形或多边形、不规则等。3）.数目异常：正常细胞有时可见13个小核仁，若细胞中有4个或4个以上大小不等的核仁是恶性肿瘤的标志之一。6、核分裂异常7、核退行性变化8、裸核2. 低度鳞状上皮内病变HPV（人乳头状瘤病毒）感染包括在其中。（1）病变多为表层细胞。（2）细胞单个或片状排列。细胞边界清楚可见。（3）细胞核面积增大，至少比中层细胞大3倍。核大小形状中度不一致。双核或多核常见。（4）核深染，但染色质分布均匀，核膜稍呈不规则。（5）如果胞质有HPV感染改变时，核表现退变或模糊状。核仁少见或不明显。非典型增生如
9、合并感染16、18、33型高危型人乳头状瘤病毒，则有较高的促恶变倾向。HPV（人乳头状瘤病毒）感染时细胞学特点：（考）涂片中常有大量黏附、成团或成片的鳞状上皮细胞。胞界不清，核不同程度的增大，染色质增多，多数细胞核结构不清或固缩。挖空细胞可以单个或成团出现在涂片中，还可见到成片角化不良或角化不全细胞。（挖空细胞为HPV（人乳头状瘤病毒）特征性细胞）高度鳞状上皮内病变 (HSIL和CIN2.3) ：（1）病变以中底层细胞为主。（2）细胞常常单个或成片或像合胞体样排列：细胞核异常，其大多数鳞状上皮具“不成熟”胞质；花边状或致密化生型胞质。（3）细胞核增大：在低度鳞状上皮内病变范围内，但胞质面积减少
10、，而使核质比明显增大.（4）核深染：较CIN-I时明显，染色质可能为细颗粒状或块状，但分布尚均匀，核仁常常不明显。核轮廓可能不规则。（5）病变累及腺体时：会见到不典型的腺上皮。鳞状细胞癌：为向鳞状细胞分化的恶性侵袭性肿瘤。 分为：角化型鳞状细胞癌 和非角化型鳞状细胞癌。鳞癌细胞的一般特点：（镜下特点）1.核的变化：核增大，核质比例失常，核染色质增多，核畸形。2.核膜的变化：核膜增厚明显，核仁增多、变大，畸形裸核常出现并可见异常有丝分裂及多核细胞。3.胞浆的变化：分化差的鳞癌细胞，其胞浆呈嗜碱性，染成紫红色；分化好的则呈嗜酸性，染成鲜红色或橘红色。4.细胞畸形：大多数癌细胞出现畸形，分化好的鳞癌
11、，出现纤维形癌细胞、蝌蚪形癌细胞。5.细胞包涵物：有些细胞具有吞噬能力，能吞噬其他癌细胞或细胞碎片。特异性阴道炎特异性阴道炎：一 、霉菌性阴道炎二 、滴虫性阴道炎三 、细菌性阴道病四 、萎缩性阴道炎一 、霉菌性阴道炎镜下看:真菌菌丝成竹节状，锐角分支，有折光性，孢子呈葵花籽形，有折光 性。背景炎性细胞多，鳞状上皮细胞核稍大，染色质增粗。胞质折叠明显。 看到霉菌菌丝及孢子即可诊断。二 、滴虫性阴道炎镜下看：滴虫性阴道炎背景较脏，有多量黏液和中性粒细胞。鳞状 上皮细胞炎性退变，较多碎屑。滴虫上端圆，底部尖细，呈倒梨形，顶 端有细长鞭毛，因退变不易看到。虫体灰蓝色，虫体内有着色极淡的卵圆形细 胞梭样
12、形态。看到滴虫即可诊断。三 、细菌性阴道病为阴道内正常菌群失调所致的一种混合感染，但临床及病理特征无炎症改变。正常阴道内以产生过氧化氢的乳杆菌占优势。细菌性阴道病时，阴道内能产生过氧化氢的乳杆菌减少，导致其他细菌大量繁殖。促使阴道菌群发生变化的原因仍不清楚，推测可能与频繁性交、多个性伴侣或阴道灌洗使阴道碱化有关。涂片背景无乳酸杆菌，白细胞少，小杆菌和球菌混在（称球杆菌）。单个鳞状上皮细胞被一层球杆菌覆盖，使细胞模糊不清，形成有诊断特征性的“线索细胞。当线索细胞量达涂片细胞量2/3以上时可诊断。四 、萎缩性阴道炎镜下看：1.萎缩鳞状细胞或外底层样细胞核增大而不深染。2.裸核常见、细胞自溶所致。常见核碎裂。3.出现外底层样细胞，其胞浆嗜桔红或嗜曙红并核固缩，类似角化不全细胞。4.多量炎性渗出物、嗜兰颗粒状背景，类似癌性背景。5.无定形嗜兰物成为涂片背景，可能外底层样细胞退变所致。 4
