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1、氯金酸是主要还原材料，常用还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。根据还 原剂类型以及还原作用的强弱，可以制备0.8nm150nm不等的胶体金。最常用的制备方法为柠 檬酸盐还原法。具体操作方法如下：将HauC14先配制成0.01 %水溶液，取100ml加热至沸。搅动下准确加入一定量的1 %柠檬酸三钠（Na3C6H5O7-2H2O）水溶液。继续加热煮沸15min。此时可观察到淡黄色的氯金酸水溶液在柠檬酸钠加入后很快变灰色，续 而转成黑色，随后逐渐稳定成红色。全过程约23min。冷却至室温后用蒸馏水恢复至原体积。用此法可制备16147nm粒径的胶体金。金颗粒的大小取决于制备时加入的柠檬
2、酸三钠的量。表19-1列举制备4种不同粒径胶体金时柠檬酸三钠的用量。表19-1四种粒径胶体金的制备及特性胶体金粒径（nm） 1%柠檬酸三钠加入量（ml） *胶体金特性呈色人max16 2.00 橙色 518nm24.5 1.50 橙红 522nm41 1.00 红色 525nm71.5 0.70 紫色 535nm*还原 100ml0.01%HauC14 所需量2.注意事项氯金酸易潮解，应干燥、避光保存。氯金酸对金属有强烈的腐蚀性，因此在配制氯金酸水溶液时，不应使用金属药匙称量氯金酸。用于制备胶体金的蒸馏水应是双蒸馏水或三蒸馏水，或者是高质量的去离子水。是以制备胶体金的玻璃容器必须是绝对清洁的，
3、用前应先经酸洗并用蒸馏水冲净。最好是经 硅化处理的，硅化方法可用5%二氯甲硅烷的氯仿溶液浸泡数分钟，用蒸馏水冲净后干燥备用。 胶体金的鉴定和保存：胶体金的制备并不难，但要制好高质量的胶体金却也并非易事。因此 对每次制好的胶体金应加以检定，主要检查指标有颗粒大小，粒径的均一程度及有无凝集颗粒等。 肉眼观察是最基本也是最简单和方便的检定方法，但需要一定的经验。良好的胶体金应该是清亮 透明的，若制备的胶体金混浊或液体表面有漂浮物，提示此次制备的胶体金有较多的凝集颗粒。 在日光下仔细观察比较胶体金的颜色，可以粗略估计制得的金颗粒的大小。当然也可用分光光度 计扫描入max来估计金颗粒的粒径。结制备的胶体
4、金最好作电镜观察，并选一些代表性的作显微 摄影，可以比较精确地测定胶体金的平均粒径。胶体金在洁净的玻璃器皿中可较长时间保存，加入少许防腐剂（如0.02%NaN3）可有利于保存。 保存不当时会有细菌生长或有凝集颗粒形成。少量凝集颗粒并不影响以后胶体金的标记，使用时 为提高标记效率可先低速离心去除凝集颗粒。呈色性微小颗粒胶体呈红色，但不同大小的胶体呈色有一定的差别。最小的胶体金（25nm） 是橙黄色的，中等大小的胶体金（1020nm ）是酒红色的，较大颗粒的胶体金（3080nm ）则 是紫红色的。根据这一特点，用肉眼观察胶体金的颜色可粗略估计金颗粒的大小。1%氯金酸，一般是指溶质的质量分数，计算公式：质量分数=溶质/（溶质+溶剂）*100%
