实 验 六 维 生 素 C 注 射 液 的 处 方 考 察 与 制 备一、实验目的1 、通过维生素C注射液处方稳定性考察，熟悉注射剂处方设计的一般思路2 、掌握延缓药物氧化分解的基本方法3 、掌握注射剂 （小针） 的生产工艺流程和操作要点二、实验指导 注射剂的处方设计应根据剂型特点、主药的理化性质及临床使用要求，从制剂的 稳定性（物理、化学及生物学稳定性 ） 、安全性（毒副作用）和有效性（速效、长效等 ）三 个主要方面综合考虑，统筹兼顾，分清主、次因素，用科学方法进行原、辅料 （ 品种、 用量） 的选择，还要考虑生产条件和成本等问题本实验通过对维生素C注射液处方组成的稳定性影响因素的考察，确定并设计处 方，再按拟定的处方进行制备初步掌握注射剂 （ 小针） 的研制和生产过程维生素C（抗坏血酸）的干燥固体较稳定，但在潮湿状态或溶液中，则很快变色，含 量下降这是由于维生素C的分子结构中，在羰基毗邻的位置上有二个烯醇基，很容 易被氧化生成黄色的双酮化合物，再迅速水解、氧化，生成一系列有色的无效物质 其反应如下因此，维生素C注射液的处方设计应重点考虑如何延缓药物的氧化分解，以提高 制剂的稳定性维生素C的氧化过程常会受到溶液的pH值、空气中的氧、重金属离子 和加热时间 （如加热溶解与灭菌时间 ）等因素的影响。
通常延缓药物氧化分解可采用下 列措施：（1） 除氧 溶液中的氧和安瓿空间的残余氧对药物稳定性影响很大，应设法排除 在维生素C注射液生产过程中，应尽量减少药物与空气接触，可在配液和灌封时通入 惰性气体配液前，注射用水应通入二氧化碳 （或氮气）去除溶剂中溶解的氧二氧化 碳在水中的溶解度大于氮气，采用二氧化碳驱除维生素 C溶液中的氧，其效果优于氮 气但应注意二氧化碳可使溶液的 pH下降，呈酸性，也可能与某些药物发生反应，影 响其稳定性由于氮气的化学性质稳定，故驱除安瓿空间的氧，用氮气较好2) 加抗氧剂 常用于偏酸性水溶液的抗氧剂有焦亚硫酸钠 (Na2S2O5) 、亚硫酸氢钠 (NaHSO、亚硫酸钠(NazSO)等，用量一般为〜g /L盐酸半胱氨酸有时也用作抗氧 剂，用量约 g ／L3) 调节pH pH影响药物的稳定性，一般调节溶液的pH,除增加药物的稳定性外， 还要兼顾到药物的溶解度及刺激性一般认为，将维生素 C注射液的pH用碳酸氢钠调 节至〜时较稳定，也有文献报道 pH为时分解速度常数最小《中国药典》规定其 pH 应为〜4) 加金属离子螯合剂微量的重金属离子如Fe2+、CiT等对维生素C在水中的氧化 分解有显着的催化作用，故维生素 C注射液中可加入依地酸二钠或依地酸钙钠螯合溶 液中的金属离子，以增加稳定性。
根据上述原则，对于维生素C注射液处方组成的稳定性影响因素主要考察下列几 方面：①加热时间的影响；②溶液pH对维生素C氧化的影响，并求出最稳定pH(pH); ③含氧量的影响，以及在通入CO和加抗氧剂后的抗氧化效果；④重金属离子的影响以 及加入螯合剂的效果注射剂生产过程包括原辅料的准备、配制、灌封、灭菌、质量检查、包装等步骤三、仪器与材料仪器：721型可见分光光度计，pH计，灌注器，水浴，电炉，G4玻璃漏斗，安瓿 (2 m1) ，熔封机，量瓶等材料：维生素C,无水碳酸钠，注射用水，氮气(钢瓶)，亚硫酸氢钠，硫酸铁，硫 酸铜，依地酸二钠，浓硫酸，高锰酸钾、蒸馏水等四、实验内容(一) 处方稳定性影响因素的考察1 ．加热时间的影响取注射用水80 ml，加入维生素C g，分次加入无水碳酸钠5 g，边加边搅拌使完 全溶解，补加注射用水至100 ml，测定pH值应为〜(如未达要求可再加碳酸钠调节)， 用G4玻璃漏斗过滤2〜3次使澄明，取溶液10m1容器保存，其余均灌封于2 ml处理 过的安瓿中将安瓿放人沸水中煮沸，按表 1 所示，间隔一定时间取出 5 支安瓿，放 入冷水中冷却后，将每次取出的 5支安瓿内的样液于小烧杯中混合均匀，以蒸馏水作空白，用721型可见分光光度计，在420nm波长处测定各样液的透光率，按下式计算 透光率比，将结果记录于表1中。
透光率比（％ ）=加热后透光率加热前透光率100表1 加热时间对维生素C溶液稳定性的影响煮沸时间/min透光率/%透光率比/%加热前加热后01530602、含氧量的影响用注射用水及通CO气体饱和5 min的注射用水，按工艺分别配成125 g /L的A、 B两种维生素C溶液各50 ml，分别测定透光率然后将 A、B溶液分别分成两份，按 表2的附加条件进行操作溶液分别灌封于 2 ml安瓿中，并作标记然后置沸水中煮沸40 min，取出后放入冷水中冷却每类各取 5支安瓿中的样液分别于小烧杯中混合 均匀，同1法测定透光率，计算透光率比，并将结果填于表 2中表2含氧量和抗氧剂对维生素C溶液稳定性的影响样品编号附加条件透光率/ %透光率比/%加热前加热后AA1加BB1在CO气流下灌封3 、重金属离子的影响按工艺配成250 g / L维生素C溶液80 ml，精密量取15 ml置25 m1量瓶中，共5份，按表3所示，加入各种试剂，用注射用水稀释至刻度，立即测定每一份样液的透 光率然后将每份溶液灌封于2 m1安瓿中，作好标记，放入沸水中煮沸 40 min后取出各取5支安瓿，将安瓿内样液混匀，以蒸馏水作空白测定透光率，并计算透光率 比，将结果填于表3中。
表3重金属离子对维生素 C溶液稳定性的影响样品编号添加试剂加热前透光率%加热后透光率%1————234+L550g/+4 、pH的影响称取维生素C15 g,配成125 g/L溶液120 ml,过滤精密量取溶液20 ml 置50 ml烧杯中，共量取6份分别加适量碳酸氢钠粉末，调节 pH为、、、、、(用pH 计测定)，立即测定每一份样液透光率，然后将它们灌封于 2 ml安瓿中，作好标记，放人沸水中煮沸40min后取出，冷却，各取5支安瓿，混匀，以蒸馏水为空白，测定 透光率，计算透光率比，并将结果填于表 4中表4 pH对维生素C溶液稳定性的影响样品编号pH加热后透光率%1234565、注意事项(1) 用碳酸氢钠调节pH时，要将其分次加入，边加边搅拌，否则易产生大量气泡而使溶液溢出(2) 灌注时，勿使药液溅到安瓶颈的上端，以防熔封时出现焦头(3) 待水浴沸腾时再将样品放入，并开始计算时间4) 5支安瓶的样液应于洁净干燥的小烧杯中充分混匀，以免影响透光率的测定5) 各重金属离子的溶液要于量瓶中配制⑹因实验时间限制1, 2, 3项分别由一组同学测定，三组得出维生素 C处方，设 计结果二)维生素C注射液处方设计与制备1、处方和工艺流程的拟定(1) 学生根据实验(一)中各因素的考察结论，拟定维生素C注射液的处方。
处方 用量 处方分析维生素C 主药注射用水 加至200mL 溶剂(2) 学生根据主药，辅料的性质，自己拟定工艺流程3) 由实验指导老师对学生拟定的处方，工艺流程进行审定2、注射剂的制备(1) 备料：按经过老师审定的处方，准确称取(或量取)处方中规定的量(需另一同学核 对)，填入表5中表5制备维生素C注射液用料单药品(或试剂)规格用量，g维生素C注射用原料(2) 工艺流程：按处方量取配量 80%的注射用水，通入二氧化碳气体(约2?3min)使 其饱和，先加入稳定剂NqSQ EDTA，搅拌溶解，混匀，后加入药物，使溶解，混匀， 用NaCQ调节药液pH为？，用G4玻璃漏斗过滤，并从滤器上补加经二氧化碳饱和的 注射用水至全量在二氧化碳气流下一次性灌注于洁净，灭菌，干燥的 2ml安瓿瓶中, 封口放于沸水中煮沸15min灭菌，并趁热放进冷的10.0g/L亚甲蓝水溶液中检漏，冲 洗，擦干后剔除封口不严的带色安瓿瓶3、澄明度检查：照卫生部标准《澄名度检查细则和判断标准》的规定检查，将有 浑浊、玻璃屑、纤维、色点和焦头等情况者作废品计，计算成品率4、pH 值测定：应为 ?5、操作注意：(1) 配液时，注意将碳酸氢钠撒入维生素 C 溶液中的速度应慢，以防产生的气泡使 溶液溢出，同时要不断搅拌，以免局部过碱。
2) 维生素 C 容易氧化变质使含量下降，颜色变黄，尤其当金属离子存在时变化更 快故在处方中加入抗氧化剂并通二氧化碳，一切容器 、工具、管道不得露铁、铜等 金属3) 掌握好灭菌温度和时间，灭菌完毕立即检漏冷却，避免安瓶因受热时间延长而 影响药液的稳定性，同时注意避光 三 ) 质量检查与评定(1) 装量：按2010年版药典二部附录装量项下检查方法进行， 2mL安瓶检查5支,每支装量均不得少于其标示装量2) 澄明度：按卫生部关于注射剂澄明度检查规定进行3) pH 值测定：应为 ?(2010年版药典二部附录 pH 项下测定 )(4) 颜色：取本品，加水稀释成每1mL中含维生素C50mg的溶液，照分光光度法 (2010年版药典二部附录测定)，在420nm的波长处测定，吸收度不得过 四) 成品印字和包装每支安瓿瓶上印字应包括品名、规格、批号、字迹必须清晰、不得磨灭标签的 内容至少包括：批准文号、品号、批号、生产日期、贮存期、生产单位等使用说明 书上至少应印有药品的批准文号、药品名称、主要成分、用法、用量、药理作用、毒 副反应、适应症、禁忌、注意事项、贮存条件等内容五、实验结果(1) 整理表 1、表 2、表 3 中的数据，并对结果进行讨论。
2) 将表4中的数据，以透光率比的倒数为纵坐标， pH为横坐标，作图，由图中曲线求出最稳定 pH(pHm)3) 将澄明度检查结果记录于表 6，计算成品率表 6 维生素 C 注射剂澄明度检查结果检查总数，支废品数，支白点玻璃屑 焦头纤维总数成品数，支成品率，%(4) 对其它质量检查结果进行分析讨论六、思考题1•影响药物氧化的因素有哪些？如何防止？2. 影响注射液澄明度的因素有哪些？3. 维生素C注射液可能产生的质量问题是什么？如何从工艺过程中进行控制？4. 你是如何进行维生素C注射液处方设计的(从理论和实验两方面进行讨论)？。