木质素的测定

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1、中性洗涤剂:按VanSoest方法配制;2M盐酸溶液:167ml浓盐酸(比重1.19)用蒸馏水定溶至1000ml;72%浓酸溶液:665mlH2SO4(比重1.84)加入300ml水中,冷至20C,补加水至1000ml。1.3方法取经80C3h烘至衡重的三个菌株各5g。1.3.1取1.0000g样品置于100ml碘瓶中,加入70ml中性洗涤剂,之后放入已沸的高压锅,100C保温40min,115121C保温20min,取出用3号30ml沙芯坩埚过滤至pH6.57.0,依次用95%乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤2次,将残渣置真空干燥器中,干燥20min。1.3.2 将残渣连同坩埚置于100ml烧杯中,

2、加入70ml2M盐酸溶液,然后放入已沸的高压锅,100C保温50min,过滤至中性,依次用95%乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤2次,残渣80C烘至衡重为W1。1.3.3将残渣连同坩埚置于150ml烧杯中,加入10ml致冷的72%硫酸,20C降解4h,后加入90ml蒸馏水,室温过夜,次日用蒸馏水洗残渣至pH6.5,烘干至衡重为W2,W1-W2为纤维素的含量。1.3.4将残渣在550C马福炉中灰化,干燥器中平衡至衡重为W3,W2-W3即为木质素的含第二种方法:1 纤维素纤维素的测定方法有硫酸与重铬酸钾氧化法、酸性洗涤法与酸碱醇醚处理法和差重法等。1.1改进方法1.1.1预处理称取0.10g玉米秸秆于刻度

3、试管(容量为15ml)中,加入醋酸和硝酸混合液(体积比1:1)5ml,盖上盖于沸水浴中加热30min,全部转至塑料刻度离心管(容量为50ml)中,加蒸馏水稀释至45ml刻度线,冷却后以8000转每分的转速离心15min,去除上清液,再加蒸馏水至45ml刻度线然后离心去上清夜,以同样的方法再洗两次后于烘箱80C烘干。1.1.2 测定取烘干样加入混合液(溶液中硫酸的质量分数为10%;重铬酸钾的浓度为0.1mol/L)10ml,摇匀后沸水浴15min,全部转入干净的三角瓶中冷却后滴定。加入质量分数为20%KI溶液5ml,用0.2mol/L的硫代硫酸钠滴定至溶液刚显蓝色且半分钟内不变色,另作一未加秸秆

4、的空白。纤维素含量按下式计算:X=k(a-b)/(nx24)式中:“24”为1molC6H10O5相当于硫代硫酸钠的摩尔数;k为硫代硫酸钠浓度,mol/L;a为空白滴定所耗硫代硫酸钠体积,ml;b为溶液滴定所耗硫代硫酸钠体积,ml;n为稻壳质量,g。2 半纤维素2.1.1预处理称取0.10g秸秆于烧杯(容量为100ml)中,加质量分数为80%硝酸钙溶液10ml,加热煮沸5min,然后稀释过滤,沉淀用蒸馏水洗三遍。于80C烘干后,转入刻度试管(容量为15ml),加入摩尔浓度为2mol/L的HCl10ml后沸水浴45min,全部转到三角瓶(容量为150ml)中,滴一滴酚酞,用NaOH中和至恰显玫瑰

5、色后过滤,用蒸馏水洗滤渣,留取滤液和洗涤液混匀后测体积。2.1.2 标准曲线的制作取8支洗净烘干的20ml具塞刻度试管,分别加入葡萄糖标准溶液(1.0mg/mL)0、0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml,补充蒸馏水至2ml,再各加入1.5mlDNS后摇匀沸水浴5min,冷却后定容至15ml,用分光光计测定540nm时候的波长。测定结果如表2.1.3半纤维素含量测定取2ml滤液加DNS溶液1.5ml,沸水浴5min,冷却后定容至15ml,于540nm的波长下测定吸光度。3木质素取0.10g秸秆于烧杯中,加体积分数1%醋酸10ml浸泡30min

6、后过滤,再用体积分数1%醋酸洗涤,滤渣烘干后于刻度试管中加乙醇和乙醚的混合液(体积比1:1)4ml浸泡5min,去上清液,沉淀洗涤三次后水浴蒸干,加质量分数72%硫酸3ml摇匀室温静置16h,加蒸馏水10ml,摇匀后沸水浴5min,再加蒸馏水5ml和质量分数10%氯化钡溶液0.5ml,摇匀后离心去上清;再用蒸馏水洗涤2次,水浴蒸干。3.1.2测定沉淀加入混合液(溶液中硫酸的质量分数为10%,重铬酸钾的浓度为0.1mol/L)10ml,摇匀沸水浴15min,全部倒入三角瓶。加入质量分数为20%KI溶液5ml,用0.2mol/L的硫代硫酸钠滴定至溶液刚显蓝色且半分钟内不变色,另作一未加秸秆的空白。木质素含量按下式计算:X=k(a-b)/(nx48)3,5-二硝基水杨酸(DNS)

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