PBS缓冲液配制精编版

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1、PBS缓冲液配制0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸储水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸储水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034M05Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4c冰箱中。需要注意的是,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。NaCl8.0g;KCl0.

2、2g;Na2HPO41.44g;KH2PO40.24g;力口蒸储水至1000ml,调节pH到7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。用于免疫反应时可加入0.1%叠氮钠(0.1g/100mlPBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。PBS缓冲液配方PHH2ONaCl7.610008.5Na2HPO4 2.2NaH2PO4 0.17.410008.52.20.27.210008.52.20.37.010008.52.20.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜

3、的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。PBS缓冲液称取NaCl8g,KCl0.2g,Na2HPO4?12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。PBST缓冲液取300口Tween-20加入PBS100ml中,混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩

4、液时,PH在6.5左右,明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法。十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次PH8.0的PBS配方详细1 .NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L2 .向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3 .滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1L。4 .Wj温Wj压火菌后,室温保存。注意:上述PBSBuffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mMCaCl2和0.5m

5、MMgCl2。0.05mol/LPBS(磷酸缓冲液PhosphateBufferSolution,PBS)的配制:甲液:0.05mol/LNa2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠9.465g7.099g,加蒸储水至1000ml;乙液:0.05mol/LKH2P04溶液:称取磷酸二氢钾,9.07g6.803g,加蒸储水至1000m1。将甲乙液分装在棕色瓶内,于4c冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH甲液ml乙液mI5.292.597.55.595.095.05.9110.090.06.2420.080.06.4730.070.06.6440.060.06.8150.050.06.9860.040.07.1770.030.07.3880.020.07.7390.010.08.0495.05.0你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可。

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