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1、-布鲁氏菌病诊断标准WS268-2007 1范围 本标准规定了人群布鲁氏菌病的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。 本标准适用于各级各类医疗卫生机构及其工作人员对布鲁氏菌病诊断与报告。2诊断依据2.1流行病学史 发病前病人与家畜或畜产品、布鲁氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区，或与疫苗生产、使用和研究有密切关系。其他流行病学参见附录A。2.2临床表现2.2.1出现持续数日乃至数周发热(包括低热)，多汗，乏力，肌肉和关节疼痛等。2.2.2 多数患者淋巴结、肝、脾和睾丸肿大，少数患者可出现各种各样的充血性皮疹和黄疸；慢性期患者多表现为骨关节系统损害。具体临床表现参见附录B。2.3实验室检查操作方
2、法见附录C)2.3.1 实验室初筛2.3.1.1平板凝集试验(PAT)(见C.1.1)或虎红平板凝集试验(RBPT)(见C.1.2)结果为阳性或可疑。2.3.1.2皮肤过敏试验(见C.2)后24h、48h分别观察1次，皮肤红肿浸润范围有一次在2.0cm2.0cm及以上(或4.Ocmn2以上)。2.3.2血清学检查2.3.2.1试管凝集试验(SAT)(见C.1.3)滴度为1：l00+及以上，过2周-4周后应再检查，滴度升高4倍及以上。2.3.2.2补体结合试验(CFT)(见C.1.4)滴度1：lO+及以上。2.3.2.3抗人免疫球蛋白试验(Coombs)(见C. 1.5)滴度l：400+及以上。
3、2.3.3别离细菌 从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物等任一种培养物中别离到布鲁氏菌。3诊断原则 布鲁氏菌病的发生、开展和转归比拟复杂，其临床表现多种多样，很难以一种病症来确定诊断。对人布鲁氏菌病的诊断，应是综合性的。即结合病人流行病学接触史，临床表现和实验室检查。4诊断4.1疑似病例 应同时符合2.1.2.2和2.3.l中任一项者。4.2确诊病例 疑似病例和2.3.2或2.3.3中任何一项者。4.3隐性感染符合2.1和2.3.2或2.3.3中任何一项者，但不具备2.2者。5鉴别诊断主要应与风湿热、伤寒、副伤寒、肺结核、风湿性关节炎等做出鉴别诊断参见附录D。 附录A 资料性附录布鲁氏菌病流行病
4、学A1贮存宿主及传染源 布鲁氏菌以下简称布氏菌的贮存宿主很多，有六十多种动物家畜、家禽、野生动物、驯化动物可以作为布氏菌贮存宿主。布鲁氏菌病以下简称布病往往先在家畜或野生动物中传播，随后涉及人类，是人畜共患的传染病。 疫畜是布病的主要传染源，我国大局部地区羊是主要传染源；有些地方牛是主要传染源；南方有的省份，猪是主要传染源；鹿和犬是次要传染源。A2传播途径及传播因子 布氏菌可以通过体表皮肤粘膜、消化道和呼吸道等侵入机体。人的感染途径与职业、饮食、生产生活习惯有关。含有布氏菌的各种污染物及食品均可成为传播媒介，主要有病畜流产物，病畜的乳、肉、内脏，被布氏菌污染的皮毛、水、土壤、尘埃等。A3易感人
5、群 人群对布氏菌普遍易感。人群感染率与传染源和传播媒介密切接触的时机、程度有关。布病患者可重复感染布氏菌。A4分布A4.1职业 有明显的职业性，凡与病畜、染菌畜产品接触多者发病率高。牧民、兽医、皮毛和乳肉加工人员感染率比一般人高。A4.2性别 人对布氏菌易感，无性别差异，主要取决于接触时机。A4.3年龄 一岁以上各年龄组均有惑染发病报道。由于青壮年是主要劳动力，接触病畜频繁，因而感染率比其他年龄组高。A4.4季节 一年四季各月均可发病。羊种布氏菌流行区有明显的季节性顶峰。我国北方牧区人群发病顶峰在45月。夏季剪羊毛和乳制品增多，也可出现一个小的发病顶峰。猪种菌和牛种菌流行区，发病季节性不明显。
6、A4.5地区 一般情况下，牧区感染率高于农区，农区高于城镇。牧区牲畜多，人与之接触频繁，感染时机多。牧区草原辽阔，居住分散，因此病人分布广，很少集中爆发和流行。在农区或半农半牧区，以农业生产为主，兼有少量牲畜，感染时机相对减少，但由于居住较密集，发病易呈点状爆发。城市病人多集中在一些皮毛乳肉加工企业或城郊养畜户。A5不同疫区流行特点由于传染源的种类、病原菌的种型、毒力和人群免疫水平不同，表现不同的流行病学特点。A5.1羊种布氏菌疫区 羊种布氏菌疫区的主要传染源是病羊。羊种菌各生物型对人、畜均有较强的侵袭力和致病力，易引起人、畜间布病爆发和流行，疫情重。大多出现典型的临床病症和体征。A5.2牛种
7、布氏菌疫区 牛种布氏菌疫区的主要传染源是病牛。牛种菌生物型较多，毒力不一，有的菌株毒力接近羊种菌强毒株。就总体而言，牛种菌毒力较弱，但有较强的侵袭力，即使是弱毒株，也可使牛发生爆发性流产或不孕，严重影响畜牧业开展。但对人致病较轻，感染率高而发病率低，呈散发性，临床病症和体征多不典型；病程短，后遗症少。A5.3猪种布氏菌疫区 猪种布氏菌疫区主要传染源是病猪。通常由猪1型和猪3型菌致病，毒力介于羊种菌和牛种菌之间。同一生物型菌株，既有强毒株，也有弱毒株。猪种菌对猪致病力强。对羊、牛致病力较低。对人致病力比牛种菌强，但也是感染率高，发病率低，除少数病例病情较重外，大多数无急性期临床表现。A5.4犬种
8、布氏菌疫区 犬种布氏菌疫区主要传染源是病犬。犬种菌除了侵犯犬，引起犬流产外，也可使猫、牛、猪、兔、梅花鹿、鼠等动物感染，产生抗犬种布氏菌抗体。人也可被感染，但病症较轻。A5.5混合型布氏菌疫医 两种或两种以上布氏菌同时在一个疫区存在，这与羊、牛在一个牧场放牧或圈舍邻近有关。由于彼此接触密切，菌种可以发生转移，羊种菌转移到牛多见，也有羊种菌转移到猪；猪种菌、牛种菌也可以转移到羊。混合型疫区流行特点取决于当地存在的主要菌种。 附录B 资料性附录布鲁氏菌病临床表现 布病的临床病症多种多样，病情的差异也很大。潜伏期一般为l周3周，平均2周，最短仅3天，最长可达1年。B1主要病症B1.1发热 是布病最常
9、见的临床表现之一，发热多在午后或晚上开场，可见于各期病人，热型不一、变化多样，也有典型的波状热热型，多数为低热和不规则热型。发热常伴有寒战等病症。 布病患者在高热时神志清醒，痛苦也较少，但体温下降时自觉病症恶化，这种高热与病况相矛盾的现象为布病所特有。B1。2多汗 也是布病患者的主要病症之一，尤其急性期患者，出汗非常严重，体温下降时更为明显，常可湿透衣裤，使患者感到紧张、烦躁，甚至影响睡眠。B1.3骨关节和肌肉疼痛 骨关节和肌肉疼痛也是布病最常见的病症，大关节多见，常呈游走性疼痛。有的慢性期病人，关节强直，活动受限。B1.4乏力 这一病症几乎为全部病人所具有，尤以慢性期患者为甚。B1.5头痛
10、为急性期的常见病症之一。慢陛期患者在疲乏无力的同时，也经常伴有头痛。个别头痛剧烈者常伴有脑膜刺激病症。当大脑皮层功能降低时，往住反响迟钝，记忆力减退。局部病人可有眼眶内疼痛和眼球胀痛等。B1.6其他症妆 心悸、神经痛、食欲不振、腹泻、便秘等。B2主要体征 急性期患者可出现各种各样的充血性皮疹，多数患者淋巴结、肝、脾和睾丸肿大，少数患者可出现黄疸；慢性期患者多表现为骨关节系统损害。B3临床分期B3.1急性期 发病3个月以内，凡有高热和有明显其他病症、体征包括慢性期患者急性发作，并出现较高滴度的血清学反响者。B3.2亚急性期 发病在36个月，凡有低热和有其他病症、体征即有慢性炎症，并出现血清学阳性
11、反响或皮肤变态反响阳性者。B3.3慢性期 发病6个月以上，体温正常，有布病病症、体征，并出现血清学阳性反响或皮肤变态反响阳性者。B3.4剩余期 体温正常，病症、体征较固定或功能障碍往往因气候变化，劳累过度而加重者。 附录C 标准性附录布鲁氏菌病诊断的特异性实验室检查技术C1特异性血清学检查C1.1平板凝集试验(PAT)C1.1.1器材及试剂 赫德逊凹玻板或一块清洁无油脂玻璃板，平板凝集抗原，被检血清，阴性和阳性血清，0. 2mL吸管或微量加样器，牙签或细铁丝。C1.1，2操作方法C1.1.2.1备方形干净的玻璃板，划成25个方格，横数5格，纵数5格，第一列各格写下血清。C1.1.2.2用0.
12、2mL吸管按以下剂量加受检血清于任何一行的各格中：第一格0.08mL，第二格0. 04mL，第三格0.02mL，第四格0.OlmL。C1.1.2.3加平板凝集抗原0. 03mL于各血清格中，用牙签或细铁丝混合，由血清量最小的格混起，每份血清用一根牙签昆合即可，用后烧毁；假设用细铁丝混合时，每份血清混合后用酒精棉球擦净，然后再用作另一份血清。C1.1.2.4混匀后将玻璃板置于酒精灯火焰或凝集反响箱上，均匀加温，使其到达30左右，5min内记录反响结果。C1.1.2.5每次试验用阴、阳性血清各1份作对照。C1.1.2.6按以下标准用加号记录反响强度： +：出现大的凝榘片或小的粒状物，液体完全透明1
13、00%凝集。 +：有明显的凝集片，液体几乎完全透明7J%凝集。 +：有可见的凝集片，液体不甚透明，50%凝集。 +：液体混浊，只有少量粒状物，25%凝集。 一：液体均匀混浊。C1.1.2.7平板凝集反响与试管凝集反响的关系 0. 08mL血清量出现凝集相当于试管法1：25的血清稀释度，0.04mL相当于1：50，0.02mL相当于1：100，0.OlmL相当于1：200。C1.1.3判定 人血清0. 02mL出现+及以上凝集程度判为阳性，0. 04mL出现+及以上凝集程度判为可疑。C1.2虎红平板凝集试验(RBPT)C1.2.1器材及试剂 清洁脱脂玻片或有凹型孔的玻片，0. ImL吸管或微量加
14、样器，牙签或细铁丝，虎红平板凝集抗原，被检血清。C1.2.2操作方法 在玻片上加0. 03mL被检血清，然后参加虎红平板抗原0.03mL，摇匀或用牙签混匀，在5min内判定结果。C1.2.3判定 判定凝集程度一至+同平板凝集反响；亦可只分为(+)阳性，一阴性两类。C1.3试管凝集试验(SAT)C1.3.1器材及试剂 试管凝集抗原，被检血清，0. 5%的石碳酸生理盐水，吸管，凝集试管，温箱和试管架等。C1.3.2操作方法C1.3.2.1被检血清的稀释：在一般情况下，每份血清用5支小试管(口径8mmlOmm)，第一管参加2. 3mL石碳酸生理盐水，第二管不加，第三、四、五管各加0.5mL。用ImL吸管吸取被检血清0.2mL，参加第一管中，混匀。混匀后，以该吸管吸取第一管中血清参加第二管和第三管各0. 5mL，以该吸管将第三管混匀，并吸取0. 5mL参加第四管，混匀。从第四管吸取0.5mL参加第五管，混匀。再从第五管吸取0. 5ml。弃去。如此稀释后，从第二管到第五管血清稀释度分别为1：12.5，1: 25，1：50和1: 100。C1.3.2.2参加抗原：先以0. 5%石碳酸生理盐水将抗原原液作适当稀释一般是作1：10稀释
