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1、华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文否如需保密，解密时间年月日是否保密独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指VF进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,指导教师对此进行了审定。与我一同作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意.研究生签名:5佩钐时闻:d。口Z年石月，争日 学位论文使用授权书本人完全了解.华中农业大学关于保存.使用学位论文的规定。，印学生必须按 照学校要求提交学位论文的印刷
2、本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电7-版，并提供日录检索和阅览服务，可以采用影印缩印或扫描等复制手段保存，- 编学位论文本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表,传播学位论 文的全部或部分内容。注：保密学位论文在解密后适用于本授权书学位论文储豁j心琵导臌：孝褥签名日期：扣口Z年多月乒日 签名日期：2妒z年占月乒日注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间 / 喹赛多对仔猪及幼龄牛羊生长的影响研究喹赛多对仔猪及幼龄牛羊生长的影响研究 研究生：丁明星导师:袁宗辉教授 华中农业大学国家兽药残留基准实验室/农业部食品安全评价重点开放实验室，武汉300，中国摘要喹嗯啉类药物为动
3、物专用药,具有促进动物生长和提高饲料转化率作用。该类药 物中喹乙醇曾广泛用于猪、鸡、牛、羊等动物的饲料添加剂.近年束大量报道显示 喹乙醇在畜禽，特别在禽类使用过量易引起中毒。喹赛多为喹嚼啉类药物新品种， 毒性极低，具有较好的应用前景现有研究表明喹赛多可促进仔猪生长,提高饲料 转化率，改善胴体品质。由于喹嗯啉类药物对动物的促生长作用受日粮蛋白质水平、 饲养管理条件等多种因素影响,喹赛多的促生长效果还需进一步确定.人们从动物 营养生理、代谢调控和肠道微生物的改变等角度对抗菌药促生长作用进行过大量研 究,但其机制仍未完全阐明。抗菌药物(包括喹嗯啉类药物）在畜禽幼龄阶段促生 长效果显著，而这阶段正处于
4、机体免疫系统迅速发育时期。因而,抗菌促生长剂 的免疫调节作用引起了人们的关注。有关研究主要集中在抗菌药对全身免疫功能的影响方面，其结果不一，有的甚至相互矛盾。由于机体半数以上淋巴细胞集中在肠 道黏膜，并受饲用药物和肠道微生物的直接作用，抗菌促生长削对肠黏膜免疫的调 节作用值得探讨。本项目研究饲料中添加喹赛多对仔猪、山羊和犊牛生长的影响，探讨其促生长作用与肠道抑菌，小肠绒毛发育、免疫调节和机体代谢之间的关系， 为喹赛多的推广应用提供理论依据同时,这些研究结果有助于阐明抗菌促生长剂 的作用机制。喹赛多对仔猪大肠杆菌感染的预防作用和促生长作用150头去势杂交仔猪，35日龄断奶,随机分为组，每组5个重
5、复，用于评价 喹赛多抗仔猪大肠杆菌感染和促生长效果及其对机体免疫和小肠绒毛形态的影响。 试验采用23因子设计，即（1）大肠杆菌接种和非接种;（2）基础日粮中无任何 抗菌药物、基础日中分别添加100 mg喹乙醇和100 mg/kg喹赛多因而，6个处 理组分为三个非大肠杆菌接种组和三个大肠杆菌接种组.在喹乙醇或喹赛多使用第7 天，接种猪灌服50 m大肠杆菌碱性肉汤（39：K81 10加CFUL）非接种猪灌服华中农业大学205届博士学位论文等量无菌碱性肉汤。喹赛多影响的评价包括（1)平均日增重(veragely gain,A）和饲料转化率（Fecoversn rte，CR）;（2）直肠粪便中大肠杆菌
6、总数 和接种血清型大肠杆菌数;（3)全身免疫反应：白细胞数、淋巴细胞数、自细胞杀 菌力、淋巴细胞转化率及血清lgG、IgM、le含量和溶血总补体活性；(）肠黏膜免疫:肠上皮内淋巴细胞(ntraepitheia lymphcyes，EL)和IgA分泌细胞（mmuoglobulinAsecretin cls,AS)数。（5)小肠上皮绒毛形态。100me#g喹赛多提高仔猪ADG和FCR分别为95和1.7。100m/l【g喹乙 醇提高ADG和FCR分别为8。和78。喹赛多显著减少接种仔猪直肠粪便中大 肠杆菌总数和接种血清型大肠杆菌数。喹赛多饲喂猪大肠杆菌感染率为1.%，与喹 乙醇饲喂猪相同,比接种非药
7、物组下降76%。这些结果显示喹赛多对仔猪不仅有较 好的促生长作用，而且对大肠杆菌感染有较好的预防作用。大肠杆菌接种仔猪白细胞数、自细胞杀菌活性、血清溶血补体总活性、血清lA 含量和淋巴细胞转化率显著增高。但喹赛多饲喂猪及喹乙醇饲喂猪血液自细胞数、淋巴细胞数、自细胞杀菌力、淋巴细胞转化率及血清gG、IgM、gA含量和血清溶血总补体活性均无显著变化。这表明喹赛多和喹乙醇对全身免疫无显著影响，但可抑制大肠杆菌刺激所引起的全身细胞免疫和体液免疫水平的升高.喹赛多减少空肠和回肠IEL.喹赛多饲喂猪空肠和回肠EL均与喹乙醇饲喂猪差异不显著.喹赛多极 显著减少空肠和回肠黏膜固有层腺周区ASC，显著减少空肠绒
8、毛固有层、回肠绒毛 固有层及回肠淋巴小结区ASC。在接种14 d喹赛多饲喂猪空肠黏膜固有层腺周区 A显著低于喹乙醇饲喂猪。结果显示喹赛多对大肠杆菌接种猪肠道黏膜免疫有抑 制作用。营养物质通过小肠绒毛上皮吸收进入体内。喹赛多增加十二指肠和空肠绒毛高 度，增加空肠绒毛高度与隐窝深度的比值。这表明喹赛多能增加小肠绒毛表面积，以促进营养物质的吸收。喹赛多对山羊生长影响只3月龄左右山羊被随机分为6组,即空白对照组、喹乙醇0m眺组、喹 赛多25 mg瓜g组、喹赛多50 /g组、喹赛多1 g瓜g组和喹赛多50 mg/kg组, 用于研究喹赛多对山羊抗腹泻和促生长作用以及对胃肠内环境、血清生化、免疫功能、胴体和
9、肉品质的影响。于试验0、0、60和90 d早饲前颈静脉采集血液样品,哇赛多对仔猪及幼龄牛羊生长的影响研究作血清生化和免疫学测定；90 d各组随机取5只羊宰杀，测定瘤胃纤毛虫数和细菌总数、胃肠H值、胴体和肉品质。喹赛多2、50和0 meg分趴改善山羊ADG 4%、45和。2,提高FC59%、2.0和74。喹赛多250mgk提高FC 8%，但降低ADG 1。喹赛多50mg/kg组山羊ADO和FR均高于喹乙醇50g瓜g组山羊。可见，喹赛多50m/kg 剂量对山羊有较好的促生长作用.喹赛多抗山羊腹泻的适宜剂量为0 /kg,其降 低山羊腹泻频率3%。随着剂量的增加,喹赛多抗腹泻作用下降。喹赛多各剂量对瘤
10、胃纤毛虫和细菌数量影响不显著.喹赛多5和50mg/k显著 提高瘤胃H值,但对空肠pH无显著影响.喹赛多25 g/kg显著降低瘤胃和空肠p值山羊腹泻频率增加可能与其有关.喹赛多各剂量组山羊血清酶（肌酸激酶、乳酸脱氢酶、门冬氨酸氨基移换酶、 丙氨酸氨基移换酶和碱性磷酸酶)活性及血清尿素、葡萄糖，总胆固醇和甘油三酯 含量与空白对照组差异不显著,表明喹赛多对山羊心、肝、肾功能及血脂和血糖代谢无显著影响.喹赛多饲喂山羊血清无机盐（钾、钠、钙和磷)和蛋白质(总蛋白、 白蛋白和球蛋白）含量均在生理值范围,但喹赛多高剂量组（50mg)血清钾和白蛋白含量在90 d显著升高在检测的19种氨基酸中，喹赛多25150
11、 m&g饲喂山羊多数氨基酸含量下降。 喹赛多饲喂山羊血液自细胞数、淋巴细胞数、自细胞吞噬率和淋巴细胞转化率均与空白对照组山羊差异不显著，表明喹赛多对山羊全身免疫功能无显著影响。喹赛多25、50、10和0me&g分别提高山羊屠宰率2。5、9。O、50和.0,分别增加眼肌面积4.8、34。%、16.1和14O。喹赛多50mgkg提高山羊净肉率 40，高于其它各组。喹赛多各剂量均显著升高肌肉pH值，平均降低滴水损失值3.7。可见,喹赛多（尤其50 g）对山羊胴体和肉品质有较好的改善。 抗菌药引起小肠质量减轻或肠壁变薄被认为是有利于营养物质的吸收。喹赛多平均降低山羊小肠相对质量11。%。3。喹赛多对犊
12、牛生长影响为了解喹赛多对犊牛抗腹泻作用、促生长效果和对机体血液生理生化的影响,32头犊牛随机分为4组,即空白对照组，喹赛多2:kg组、50班组和100mg/ 组于试验0、15、3和5 d早饲前采集血液样品，作血液学和血清生化测定华中农业大学2005届博十学位论文喹赛多25、50与0 gkg分别提高犊牛AD %、2和93%,降低腹 泻频率556、66。7%和6%。喹赛多各剂量对犊牛血清酶(肌酸激酶、乳酸脱氢 酶、门冬氨酸氨基移换酶、丙氨酸氨基移换酶和碱性磷酸酶）活性、血脂(总胆固醇和甘油三酯）、血清无机盐离子(钾、钠、钙和磷）、葡萄糖、蛋白质（总蛋白、 白蛋白和球蛋白)和尿素含量以及血液学(血液
13、白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量和红细胞压积容量）均无显著影响。 综上所述，喹赛多可抑制肠道大肠杆菌,降低仔猪大肠杆菌感染率，抑制肠道大肠杆菌刺激引起的免疫水平升高，特别是肠道免疫水平升高；减少山羊和犊牛腹泻 频率；增加小肠绒毛高度及绒毛高度与隐窝深度比值,降低小肠相对质量,以促进 营养物质吸收喹赛多的这些作用可能与其促进动物生长有关。本研究使用断奶仔 猪大肠杆菌肠道感染模型证实了喹嗯啉类药物的促生长效果与肠道病原菌的抑制作用之间的关系；研究喹赛多在动物体内的抑菌作用以及对动物机体免疫状态、营养 生理和机体代谢的影响，从多方面阐述喹嚯啉类药物促进动物生长的机制；从饲喂喹赛多对肠黏膜免疫调节及对
14、局部免疫激活状态与全身免疫反应之间关系的影响角 度，研究喹嗯啉类药物的促生长作用,为探索抗菌药物促进动物生长机制寻找一条 新的思路。关键词:喹赛多;生长；免疫;仔猪;山羊羔;犊牛4喹赛多对仔猪及幼龄牛羊生长的影响研究Efets of cadox n row igets nd young umnantsCandidae：ingxing DinSupervisor:nghuiYuanNatonaleferenceLaboaoofVteinar Drug Reids/MOA y aoraory of Fd Safet Ealuaon,Hazhon Agiulralniversy，uan4307,PL iABSRCTQixalines,exclv used in aims，promte rowth nd to impredonversion
