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1、衣藻的培养1、藻株野生型衣藻藻株：21gr(+)和6145c(-)2、培养基培养基贮存液配制表贮存液试剂浓度硼酸1g/L硫酸锌1g/L硫酸锰0.303g/L微量元素贮存液氯化钻0.2g/L钼酸钠0.2g/L硫酸铜0.0625g/L柠檬酸钠贮存液柠檬酸钠100g/L氯化铁贮存液氯化铁10g/L氯化钙贮存液氯化钙53g/L硫酸镁贮存液硫酸镁100g/L硝酸铵贮存液硝酸铵100g/L磷酸二氢钾贮存液磷酸二氢钾100g/L磷酸氢二钾贮存液磷酸氢二钾131g/L乙酸钠贮存液乙酸钠180.47g/LM培养基：用于衣藻的正常生长微量元素贮存液1ml/L，柠檬酸钠贮存液5ml/L，氯化铁贮存液1ml/L，氯化
2、钙 贮存液1ml/L，硫酸镁贮存液3ml/L，硝酸铵贮存液3ml/L，磷酸二氢钾贮存液1ml/L， 磷酸氢二钾贮存液1ml/L。R培养基：用于衣藻的大量扩增微量元素贮存液1ml/L，柠檬酸钠贮存液5ml/L，氯化铁贮存液1ml/L，氯化钙 贮存液1ml/L，硫酸镁贮存液3ml/L，硝酸铵贮存液3ml/L，磷酸二氢钾贮存液3ml/L， 磷酸氢二钾贮存液3ml/L，乙酸钠贮存液10ml/L。M-N培养基：用于衣藻产生配子微量元素贮存液1ml/L，柠檬酸钠贮存液5ml/L，氯化铁贮存液1ml/L，氯化钙 贮存液1ml/L，硫酸镁贮存液3ml/L，磷酸二氢钾贮存液1ml/L，磷酸氢二钾贮存液 1ml/
3、L。3、培养环境衣藻的生长需要光暗周期，因此需要在光照培养箱中进行培养衣藻培养的光照/黑暗时间为14h/10h，温度为22C,湿度为65%，光照强度为 40%。T A1 iHUfj 4 | Vi衣藻培养采用特制的300ml锥形瓶，培养时以130rpm振荡培养，并通入空气。大量培养时采用3L锥形瓶。3、培养方式保种：将原始藻株划线保藏于 R培养基平板上，置于培养箱中，平均1个月-1个半月转接于一新平板上继续保存。普通培养：在特制300ml锥形瓶中加入200ml M培养基，在超净工作台里用接 种环挑取少量衣藻接于培养基中，培养 56天即可传代接于新鲜培养基中或大量培 养。大量培养：提取鞭毛或者 Pull down需要大量细胞，因此需要大量培养。在 3L 的培养瓶中装入2L R培养基，取普通培养的衣藻细胞 100ml接入培养基中，23天 即可使用。
