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1、Experimental Study on Influence of Bao Sheng Decoction on Testis Tissue and Sperm of Spermatogenic Lesion Letdown in MiceMajor:Clinical Basis of TCMPostgraduate:Zhou XiaoPingTutor:Prof.Dai JingChengABSTRACTObjective:To investigate the influence of Bao Sheng Decoction (given BCD)on sperm lesion letdo
2、wn in mice and provided data for further study and clinical practice.Methods:The testises of male mice were taken into the warm bath in 43 within 20 minters changing the spermatogenic lesion letdown model, and those mices were randomly divided into three groups, respective ig BSD,Wu Zi Yan Zong Deco
3、ction(given WZYZD)and Normal Saline and having taken medicine for two weeks. Another mices was builted the normal group.The testicular tissue was observed as well and measure the number ,motility of sperms ,the weight of the testicles,epididymis and body.Result: 1.The pathology of the injured testic
4、ular organs were restored remarkably by BSD group and better than that in WZYZD group and Model group in mice.2.The number and motility of sperms could remarkably raise by BSD group than that in WZYZD group(p0.01) in mice.3.BSD group could raise the weight of the testis and Epididymis better than th
5、at in WZYZD group(0.01p0.05) and Model group(p0.01).Conclusions:BSD could remarkably promote the spermatogenetic function of testis and could remarkably restore the pathology of the injured testicular organs in mice. These functions were led by BSD group better than that by WZYZW group and Model gro
6、up.MESH: Bao Sheng Decoction /pharmacology Spermatogenic lession letdown, experimental/tcd therTesticular organs/pathTestis number/drug effMotility/ drug effTestis weight/ drug effBody weighy/ drug effEpididymis/ drug effMice宝生汤对生精障碍小鼠睾丸组织及精子影响的实验研究专 业：中医临床基础研究生：周小平导 师：戴锦成 教授摘 要目的：研究宝生汤对生精障碍模型小鼠的影响，
7、为临床应用和进一步研究宝生汤提供客观的实验和理论依据。方法：雄性小鼠，把其睾丸浸没于43温水浴20分钟造模，随机分成三组，分别灌服宝生汤（简称宝生组），五子衍宗汤（简称五子组）和生理盐水（简称模型组），连续2周。另设正常组，常规喂养相同时间。处死后，睾丸组织做电镜及光镜病理切片；检测精子密度、活动率；称睾丸、附睾的重量以及动物体重。结果：1、宝生汤能明显促进损伤睾丸病理恢复正常，优于五子衍宗组及模型组；2、宝生汤能明显提高小鼠精子活动率，优于五子组（p0.01）及正常组(0.01p0.05)；增加小鼠精子密度优于五子组(p0.01)；3、宝生汤能增加小鼠睾丸和附睾重量，优于五子组(0.01p0
8、.05)及模型组(p0.01)；结论：宝生汤有明显的促生精、恢复睾丸病理正常的作用，优于五子组与模型组。主题词：宝生汤/药理学 生精障碍，实验性/中药疗法 睾丸组织/病理学 精子数/药物作用 活动率/药物作用 睾丸重量/药物作用 体重/药物作用 小鼠宝生汤对生精障碍小鼠睾丸组织及精子影响的实验研究专 业：中医临床基础方 向：金匮方论治疗男性病研究生：周小平导 师：戴锦成前 言生殖健康1是指与生殖（和性）相关的机体的结构、功能和行为过程中的生理、心理和社会的完满和谐的良好状态，而不仅仅是指一个人没有疾病或不健康。1994年9月在开罗召开的“国际人口与发展大会”上，180多个国家的代表一致认识到男
9、性生殖健康的重要性。明确决定把“生殖健康”作为“全球最优先考虑的问题”。WHO推荐，夫妇婚后同居一年以上，未采用任何避孕措施，由于男性方面的原因造成者称为男性不育症。从全球范围来看1，不育症的发病率达810%，目前全球至少有5000-8000万对不育患者，并有逐渐上升的趋势。我国不育症患病率与国际水平接近。男性不育正在成为一个社会问题。现代中西医学家正在作出自己的努力，双方各自发挥特长，为治疗这一疾病探索各种方法。西方生殖辅助技术异军突起，先后走过了人工授精、体外授精和胚胎移植（IVF-ET）、显微操作助孕技术三个阶段。开辟了人类生殖的全新局面。但是，它也带来了一些副作用和社会伦理问题。如结构
10、异常的染色体和突变基因，诸如点突变、微缺失和重排等。使用这些精子通过ICSI技术而出生的下一代就完全有可能在其成年后重演其父辈的悲剧。因为已知如Y染色体微缺失是可以代代相传的2。人类渴望自然妊娠过程，体验由此而带来的和谐与幸福。中医学依靠它得天独厚的理论和药物，在治疗不育症方面显示了勃勃生机。中药物具有疗效确切、稳定、低毒、无创伤、少痛苦、经济方便等优点，符合“人类向自然回归”的科学思潮，符合生物心理社会医学模式的特点，在治疗男性不育方面具有广阔的前景。因此，从依据中医理论、结合现代科技手段的角度出发，研究开发新的治疗不育及促进生殖的药物，具有现实和长远的意义。戴锦成教授的宝生汤即是这方面努力
11、的典型，其在临床用之多验，但缺乏动物试验的支持。本课题即从这一立场出发，从动物试验方面提供客观依据，为它的进一步研究打下基础。材料与方法1、 材料：1.1 动物：清洁级ICR小鼠45只，体重2530克，福建医科大学实验中心提供，医动字23-009（质）号。所用小鼠常规喂养一周。1.2 药物；宝生汤、五子衍宗汤药物均由福建中医学院国医堂提供，由有经验药工验明系正品，其中五子衍宗汤配方按95年中华人民共和国药典法定剂量。两组药物均自煎至2g/ml，4冰箱冷藏备用。1.3 仪器：HH6 数显温控仪 常州国华电器有限公司JEM1200EX 透射电子显微镜 日本OLYMPUSFA1004 精密电子天平
12、上海天平仪器厂XS212103 生物显微镜 日本JNOEC2.方法：参考文献法3，取体重2530克雄性小鼠45只，随机分为四组，取其中一组11只为正常组，常规喂养。另34只分别先用乙醚麻醉，然后将四肢绑于立式支架上，使阴囊浸没在43温水中20分钟进行造模。造模后第九天，把34只小鼠随机分为三组，一组12只，另两组各11只，分别灌服宝生汤、五子衍宗汤、生理盐水，均8ml/kg体重，每日灌胃一次，连续14天，于最后一次给药后24小时称重，将动物脱臼处死，迅速摘取睾丸、附睾。2.1 双侧睾丸称湿重，然后一侧睾丸用10%福尔马林溶液固定，另一侧睾丸按电镜标本固定要求置入电镜固定液中。2.2 两侧附睾称
13、湿重，迅速置于盛有4ml生理盐水的平皿中适当剪碎，于37温水浴中温浴20分钟，使其充分游离，按红细胞计数法，测得悬液中每毫升精子数4。2.3 精子活动率测定：将上述37温浴20分钟后的精子悬液12滴滴于载玻片上，高倍镜下记录200个精子中活动精子的百分率，整个过程应在2025下进行，并于10分钟内完成。2.410%福尔马林固定标本24小时后，序列酒精脱水，石蜡包埋切片，HE染色，制成光镜病理片。电镜标本2%戊二醛液前固定，1%锇酸后固定，梯度酒精脱水，渗透，苯二甲酸二丙酯包埋后用超薄切片机切成50nm的超薄切片，电镜下观察细胞超微结构。结 果1、实验结果1.1 正常组、宝生汤组（简称宝生组）、
14、五子衍宗组（简称五子组）精子密度与精子活动率的比较。表1：正常组、宝生组、五子组精子密度与精子活动率的比较（X）组别 动物数（只） 精子密度（106/ml） 精子活动率（%）正常组 11 18.182.09 88.872.58五子组 11 16.822.56 80.892.89宝生组 12 20.082.50 91.693.04 *各组经方差齐性检验，满足F检验条件.示与五子组相比，P0.05,有可比性;示与五子组比较P0.01有显著性差异；*示与正常组相比0.01P0.05，有统计学意义。1.2 正常组、模型组、五子组与宝生组体重、睾丸和附睾重量的比较： 组 别 动 物 数 体 重 睾 丸
15、附 睾 （只） （g） （mg） （mg）正常组 11 41.182.25 23421.3 * 83.1614.05模型组 11 38.354.46 18113.8 67.337.11五子组 11 42.182.46 21327.0 74.9411.64宝生组 12 44.463.45 23916.5 * 8.1211.99各组经方差齐性检验，满足F检验条件。示与模型组比较P0.01有显著性差异；*示与五子组相比0.01P0.05，有明显的统计学意义。2、光镜观察：正常小鼠睾丸组织结构正常（图一）。曲细精管内各级生精细胞层次多在57层，依次为精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞、精子。精原细胞紧贴生精上皮基膜，圆形或椭圆形，核圆形或椭圆，核染色深；初级精母细胞位于精原细胞近
