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1、影响血液凝固的因素一、 实验目的1.熟悉家兔耳动，耳缘静脉，颈总静脉，心脏采血方法； 2.观察纤维蛋白原在血液凝固过程中的作用； 3.观察并比较内源性凝血和外源性凝血过程； 4.观察不同因素对血液凝固的影响，观察水蛭素和阿司匹林对血液凝固的影响。二、 实验原理血液凝固是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成的凝血酶最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白的过程。因此，凝血 过程可分为凝血酶原酶复合物的形成、凝血酶的激活和纤维蛋白的生成三个基本步骤。在此过程中有多种凝血因子参与，根据凝血过程中的第X因子所依赖的凝血因子来源不同，可将血液凝固分为内源性凝血途径和外源性凝血途径。内源性凝血途径是指参与血液凝固的所有
2、凝血因子在血浆中，外源性凝血途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后，与血管内的凝血因子共同作用而启动的凝血过程。第X凝血因子一旦激活，最终使纤维蛋白原转变成纤维蛋白，形成血凝块。本次实验通过多次操作，探究不同因素，不同物质对于凝血过程的作用。三、 实验结果1.实验观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用在1，2号烧杯中加入颈总动脉血，用竹签搅拌2号烧杯约30s，用生理盐水洗去竹签上的血液，在竹签上可看到白色纤维蛋白细丝。放置60min，可观察到1号烧杯血液凝固呈深红色，二号烧杯血液未凝固，呈鲜红色。2.影响血液凝固的因素取2ml耳中央动脉血；4000rmp/min，离心10min制备贫血小板血浆，吸
3、取上清液备用；1000rmp/min，离心10min制备富血小板血浆，此时仅红细胞白细胞下沉，血小板仍然悬浮，吸取上清液备用贫血小板血浆中加入兔脑悬液是为了增加组织因子，贫血小板是经离心后去除大部分血小板可阻断内源性凝血过程，加入的脑悬液内含有大量组织因子。可以准确反映纤维蛋白原降解为纤维蛋白的时间如下表加入试剂于1，2，3号试管，观察三个试管的血浆凝固时间，实验结果如下 3. 加速和减慢血液凝固的观察实验条件和凝血时间如下： 四、 结果分析1.实验观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用竹签搅拌后血液不会凝固的原因是因为缺少纤维蛋白，即纤维蛋白原激活形成纤维蛋白单体聚合形成纤维蛋白细丝，被吸附在了竹
4、签上，2号烧杯的血液中缺少纤维蛋白，所以不会凝固2. 影响血液凝固的因素：1. 从试管2可以看出，在缺乏内源性凝血途径和外源性凝血途径的情况下，无法发生凝血2. 从试管1，2可以看出，丰富的血小板促进了血液的凝固，即血小板的数量越多，凝血的速度越快3. 从试管1，2，3可以看出，当3中加入兔脑悬液后，启动了外源性凝血途径，从而使血液发生了凝固，但因为血浆中的血小板浓度低，所以速度不如1号试管来的快3. 加速和减慢血液凝固的观察棉花：棉花给血液凝固提供粗糙表面，使血小板容易附着，凝集，然后解体释放凝血因子，此外棉花带有的负电荷也能激活凝血因子，启动内源性凝血途径润滑油：与棉花相反，润滑油光滑，无
5、法提供附着部位，从而不易让血小板发挥作用，且润滑油作为绝缘体，阻断了血液与带负电试管的接触，也抑制了凝血过程37水浴，冰水浴（温度）：只有当温度适宜时，酶的活性才能最高，在冰水浴时，低温导致凝血因子活性降低，凝血速度减慢草酸钾：草酸钾可以与钙离子发生反应，而钙离子在凝血过程中起到重要作用，没有钙离子时血液就不会发生凝固阿司匹林：阿司匹林使血液中的环氧化酶(COX)失活，无法生成血小板的致聚剂血栓烷素(TXA2)，抑制血小板的聚集，抑制凝血过程。水蛭素：水蛭素会抑制凝血酶对纤维蛋白原的作用，无法形成纤维蛋白网状结构，所以无法发生凝血。肝素：肝素可以增加抗凝血酶的活性，抑制凝血过程。五、 结论1.
6、 血液凝固可分为三个阶段2. 内源性影响血液凝固的因素纤维蛋白，取出后血液不再凝固3. 血小板可以促进血液凝固4. 血液凝固的速度还受到多种理化性质的影响，其中棉花，适宜温度可促进凝血过程，管壁上的润滑油，添加草酸钾，阿司匹林，水蛭素，肝素，低温等则会抑制凝血过程。六、 思考题1. 血液凝固主要有包括哪几个阶段？ 血液凝固包括三个阶段，按顺序分别是：凝血酶原激活物形成、凝血酶原激活成凝血酶、纤维蛋白原转变为纤维蛋白2. 根据本实验观察项目的结果比较血液凝固的内源性途径与外源性途径的区别是什么?区别内源性凝血外源性凝血参与凝血的凝血因子数量多，且全部位于血管中数量少，因子在血管外，其余在血管内X因子的激活需要因子复合物需要因子复合物凝血时间慢，数分钟快，约几十秒凝血过程复杂简单
