《全血RNA提取步骤》由会员分享，可在线阅读，更多相关《全血RNA提取步骤（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Trizol法提取全血总RNA实验前准备：Trizol，氯仿，异丙醇，75%乙醇（用RNase-Free水配制），RNase-Free水，柠檬酸钠抗凝管。1ml注射器，1.5、3 ml EP管（DEPC处理过），大、中、小号枪头（DEPC处理）150250 ul全血加入10倍体积TRIzol（主要是异硫氰酸胍）（1.5 ml2.5 ml），充分吹打混匀，室温静置5min（使核酸蛋白复合物完全分离）。每1毫升的TRIzol试剂加入200 ul的氯仿（300 ul500 ul），静置3min，离心12000g，4，15min。将上层水相转移到1.5 ml EP管中，加500 ul的异丙醇，上下颠倒
2、混匀10 s，室温静置10min，离心12000 g，4，10 min，弃上清。加入1 ml的75%乙醇，上下颠倒混匀10 s，离心7500 g，4，10 min，弃上清。室温下干燥5-10 min（充分干燥不好溶解），加入50 ul的RNase-free-water充分溶解RNA。分光光度计测OD值。（取2l进行电泳，其余-80保存？）#加入TRIzol后可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-810000g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。分光光度计检测质量 取出2 ul定量，测量buffer: 10mM TrisCl(pH7.8)。A260/A280=1.82.1，说明RNA质量可靠；A260/A2802.1，说明RNA存在降解。 电泳检测RNA电泳检测RNA完整性：配制1%的凝胶，上样，120V电泳20min，紫外灯下观察结果，若能看到28S和18S两条带，且亮度约为2：1，说明RNA完整性较好。
