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大肠菌群检验原始记录-平板计数法-2016版-5样

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大肠菌群检验原始记录-平板计数法-2016版-5样_第1页
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大肠菌群检验原始记录(平板计数法)检验单位检验员检验日期至环境条件温度 ℃,相对湿度 %检验依据GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》第二法样品名称产品批号仪器设备及耗材:电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、PH计、移液器培养基及试剂:结晶紫中性红胆盐琼脂培养基(VRBA): m1. 配制日期: 煌绿乳糖胆盐肉汤(BG1.B): m1. 配制日期: 无菌生理盐水: m1. 配制日期: 实验过程:1 .样品处理和稀释:1 .1如需要,使用Imo1./1.氢氧化钠或ImOI/1.盐酸将样品调整PH在6.5~7.5之间2 .2制备样品稀释液根据样品状态,无菌操作,称取/无菌吸取25g(m1.)样品,加入到225m1.无菌生理盐水中充分混匀,制成1:10样品匀液用Im1.无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液Im1.,沿管壁缓慢注于盛有9m1.稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),在振荡器上振荡混匀,制成1:IoO的样品匀液按上面步骤操作,制备10倍系列稀释样品匀液每递增稀释一次,换用1次Im1.无菌吸管或吸头。

从制备样品匀液至样品接种完毕,全过程不得超过15min.2 .接种VRBA选择适宜的2~3个连续稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),吸取Im1.于无菌平皿内,每个稀释度接种两个平皿同时分别吸取1m1.生理盐水加入两个无菌平皿内作为空白对照及时将15~20m1.融化并恒温至46℃的VRBA倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀,待琼脂凝固后,再加3~4m1.VRBA覆盖平板表层同时再以只加VRBA的平皿,作为VRBA的空白对照将平板翻转,培养3 .培养将以上VRBA平板倒置于36.0±1.°C,培养18h~24h( / / 时〜 /_/ 时)并分别计数可疑和典型菌落4 .平板菌落数选择选取菌落数在15~150CFU之间的平板,分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落典型菌落为紫红色,菌落周围有红色的胆盐沉淀环5 .证实试验(接种BG1.B)从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落,少于10个菌落的挑取全部典型和可疑菌落,分别移种于BG1.B肉汤管内,36°C±1°C培养24h~48h,( // 时〜 /_/ 时)观察产气情况凡BG1.B肉汤管产气,即可报告为大肠菌群阳性6 .结果与报告6.1 每g(m1.)样品中大肠菌群数:证实为大肠菌群阳性的试管÷接种总管数X平板菌落数X稀释倍数按“四舍五入”原则修约,保留2位有效数字,无菌落生长以VI乘以最低稀释倍数报告。

6.2 称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/m1.为单位报告样品1稀释度第一稀释度第二稀释度第三稀释度结果CFU∕m1.□CFU∕g□VRBA疑似大肠菌群菌落数接种BG1.B管数BG1.B阳性管数样品2稀释度第一稀释度第二稀释度第三稀释度结果CFU∕m1.□CF∪∕g□VRBA疑似大肠菌群菌落数接种BG1.B管数BG1.B阳性管数样品3稀释度第一稀释度第二稀释度第三稀释度结果CF∪∕m1.□CFU∕g□VRBA疑似大肠菌群菌落数接种BG1.B管数BG1.B阳性管数样品4稀释度第一稀释度第二稀释度第三稀释度结果CF∪∕m1.□CFU∕g□VRBA疑似大肠菌群菌落数接种BG1.B管数BG1.B阳性管数样品5稀释度第一稀释度第二稀释度第三稀释度结果CFU∕m1.□CFU∕g□VRBA疑似大肠菌群菌落数接种BG1.B管数BG1.B阳性管数糊也VRBA空白(仅VRBA)生理盐水+VRBABG1.B空白(仅BG1.B)报告人报告日期复核人复核日期。

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