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1、【引用】常用大肠杆菌感受态JM109 , DH5a , BL21等的区别生命科学 2011-03-31 14:48:42 阅读80评论0字号：大中小 订阅本文引用自xxrrzq常用大肠杆菌感受态 JM109，DH5a，BL21等的区别1: DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的半乳糖苷酶氨基端实现a-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-,()80dlacZ AM15 , (lacZYA-argF)U169 , deoR , recA1 , endA1 ,hsdR17(rk-, mk+) , phoA ,
2、supE44 , k, thi-1 , gyrA96 , relA12: BL21(DE3)菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如 pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于 入噬菌体DE3区，该区整合于 BL21的染色体上。该菌适合 表达非毒性蛋白。基因型：F-, ompT , hsdS (rBB-mB ) , gal, dcm ( DE3) 3: BL21(DE3) pLysS 菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。 PLysS含有表达T7溶菌酶的基因， 能够降低目的基因的背景表达水平， 但不干扰目的蛋白的表达。 该菌适合表达毒性蛋白和非 毒性蛋白。
3、基因型：F-, ompT hsdS (rBB-mB ) , gal, dcm ( DE3, pLysS , Camr 4: JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行 DNA转化或用M13 phage载体进行转染时， 由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZ AM15进行a-互补，从而显示半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1 , endA1 , gyrA96 , thi 1, hsdR17 , supE44 , relA1 , A (lac proAB ) /F traD36 , proAB+ , lacIq , lacZ AM155: TOP10
4、 菌株该菌株适用于高效的 DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。基因型：F- , mcrA A(mrr-hsd RMS-mcrBC),松0 , lacZ AM15 , lac X 74, recA1 , ara A139 A(ara-leu)7697 , galU , galK , rps, (Strr) endA1 , nupG6: HB101 菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44 , hsdS20 (rB-mB ) , recA13 , ara 14, proA2 , lacY1 , galK2 , rpsL20 , xyl-5 , mt
5、l-1 , leuB6 , thi-17: M110 或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在 GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。常用的菌株都会产生 dam,dcm，从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割，如Fbal和Mbol等，一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影响，如XbaI, BclI等。而且甲基化只发生在特定序列，以 XbaI为例，只有在位点序列旁出现 GA或TC,该XbaI位才会被 甲基化。而要解除这种限制
6、修饰作用通常有两种方法：(1)选用上述酶的同功酶，如Sau3AI , DNA识别切割位点与 Mbol相同；但不受甲基化影响；(2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行 DNA的制备，如E.coli JM110和链霉菌等， 前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶， 从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。8: E.coli JM110要排除dam,dcm 甲基化的影响，需要用特定的 dam-,dcm-的菌株，女口 JM110 如果由JM110或SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化.各种感受态细胞的区别用途特征XI1-Blue 菌株基因型：endAI gy
7、rA96(naIR) thi-1 recAI relAI lac glnV44 F Tn10 proAB+ laclq (lacZ)M15 hsdR17(rK- mK+)。特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。用途：分子克隆和质粒提取。BL21(DE3)菌株基因型：F-ompT gal dcm Ion hsdSB(rB- mB-)?(DE3 lacI lacUV5-T7 ge ne 1 ind1 sam7nin5)。特点：该菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于 入噬菌体DE3区的lacUV5启动子，该区整合于BL21的
8、染色体 上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。用途：蛋白质表达。BL21(DE3)ply 菌株基因型：F- ompT gal dcm Ion hsdSB(rB- mB-)A(DE3) pLysS(cmR)。特点：该菌株带有 pLysS，具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达。适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。用途：蛋白质表达DH5 a菌株基因型：F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG 80dlacZ AM15 A(lacZYA-argF)U169, hsdR17
9、(rK-,入-特点：一种常用于质粒克隆的菌株。其80dlacZ AM15基因的表达产物与 pUC载体编码的3-半乳糖苷酶氨基端实现 a互补，可用于蓝白斑筛选。 recA1和endA1的突变有利于克隆 DNA的稳定和高纯度质粒 DNA的提取。用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。JM109菌株 基因型：endA1 glnV44 thi-1 relAI gyrA96 recAI mcrB+ (lac-proAB) e14- F traD36 proAB+ lacIq lacZ M15hsdR17(rK-mK+)。特点：部分抗性缺陷，适合重复基因表达，可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。用途：分子
10、克隆、质粒提取和蛋白质表达。DH10B菌株基因型：F- mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC) 80dlacZ AM15 AacX74 endA1 recA1 deoR (ara,leu)7697 araD139 galU galK n upG rpsL 人The most widely used E. coli strain for BAC clo ning is DH10B。host for pUC and othera-compleme ntati on vectors; pBR322useful for generatinggenomic libraries containin
11、g methylatedcytosine or adenineresidues , useful for plasmid rescue procedures 。ELECTROMAX DH10B T1 CELLS说明：DH10B细胞是高转化效率的E. coli，可以完美应用于大多数实验应用。DH10B基因型具有以下特点：? lacZ AM15用于重组克隆的蓝/白斑筛选?消除了 mcrA、mcrBC、mrr和hsdRMS限制系统，允许构建更多具有代表性的基因组文库(1,2)? en dA1突变，可以增加质粒产量和数量?高效率转化大小为150 kb的质粒，用于产生 cDNA或基因组文库DH10B?可以表达to nA的基因型，tonA能够提供对 T1和T5噬菌体感染的抗性(DH10B? T1R)。DH10B?的基因型：F mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC)$80lacZ AM15 4acX74 recA1 endA1araD139 (ara, leu)7697 galU galK 入-rpsL (StrR) nupGDH10B? T1R 的基因型：F mcrA A(mrr-hsdRMS-mcrBC)松OlacZ AM15 4acX74 recA1endA1 araD139 (ara, leu)7697 galU galK 入-rpsL (StrR) nupG tonA
