临床微生物SOP标本处理标准操作规程

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1、XXX医院检验科微生物实验室标本处理标准操作规程编号:MYCH/ 版本:第1版 第0次修改页数:第 1 页 共 4 页标本处理标准操作规程1.目的:规范标本处理标准操作规程。2.适用范围:临床微生物标本。3.职责:微生物检验人员严格执行本程序。4.程序:4.1 血液标本接收标本后,立即对标本进行编号、登记。门诊病人要同时登记住址、电话等信息。将血培养瓶置于全自动血培养仪中培养。4.2 痰标本4.2.1 接收编号、登记后的痰标本,加入痰消化剂或无菌生理盐水处理。4.2.2 用无菌棉签挑取标本分别涂布于血琼脂平板、麦康凯平板的第一区,然后接种划线第二、第三4.2.3 同时做痰涂片镜检。4.3 咽拭

2、子标本 涂布血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板的第一区,然后接种划线第二、第三4.4 脑脊液、胸腹水等穿刺液 床边抽取体液标本12ml 注入血培养瓶或用无菌容器,立即送实验室。接收标本后,立即标本进行编号、登记、置培养箱培养。脑脊液标本需离心涂片检查。4.5粪便或肛拭标本 接收标本后,立即对标本进行编号、登记,取粪便脓血部位标本根据申请单要求选择平板,立即接种。4.6 尿标本 接收标本后,立即对标本进行编号、登记,将尿标本混匀,定量接种血平板,分离细菌和菌落计数。5临床常见标本处理5.1 标本接种及培养见下表常见标本接种及培养标本平板环境痰、咽拭子血平板 . MC35 有氧分泌物、其它标本血平

3、板35 有氧血、骨髓、胸水(需增菌) 、CSF(需增菌)需氧培养血液增菌液瓶厌氧培养: 血液增菌液放入BACTEC 9120尿一般培养血平板35 有氧L菌培养 L型细菌增菌液 血平板大便一般培养SS平板 35 有氧真菌培养MC 平板 35 有氧厌氧培养厌氧平板 35 厌氧袋中脑脊液培养 血平板 35 有氧 巧克力平板 35 CO2环境备注 联系电话: 8060581 8710609 5.2 操作方法:按上表根据标本及检测目的选择不同的培养基进行相应的种。5.3 分区划线法:用棉签或接种环将标本涂布于原划区,接种环在酒精灯上消毒灭菌后划一区线,每区划线前均灭菌接种环。适用于痰、咽、脓、分泌物等标

4、本的接种。 原划线 一区 二区 四区 三区 5.4 棋盘划线法:将标本涂布于原划区后再划出第一线(1-2根),接种环灭菌后划第二线(4-6根),接种环灭菌划第三线(3-5根),接种环灭菌后划第四线(左右对称,各4-6根)。适用于大便、肠拭子、肛周拭子等标本的接种。 原划区 第一线 第二组线 第三组线 第四组线 5.5 定量培养法:将标准101铂环浸于混匀尿中,缓慢、垂直取出而得到边缘扁平的一铂环量尿(或直按用10ul定量加液器取10ul混匀尿),将环触于血平板中部,迅速直线推动环至平板一边,再距平板中心1cm沿同样路线折回,快速地从一边滑动到另一边,均匀接种平板的上2/3部分。应避免耽搁,以免

5、液体干燥而不能均匀接种。最后,用未烧灼的接种环末梢在平板上剩下的1/3部分呈之字形接种,勿接触已接种部分。适用于小便、体液标本的接种。 5.6 穿刺螺旋法: 沿管中央穿刺后原线返回并于斜面螺旋划线,适用于KIA等的接种。 沿斜面培养基螺旋状划线,适用于沙保弱接种。6 注意事项6.1 接种环消毒灭菌后要待冷却后方能接触标本或划线。接种过程应严格遵循“有菌观点,无菌操作”。6.2 咽拭子标本由于标本量少,在分区划线时可连续划线而不必灭菌接种环。6.3 未作消化或均质化的痰标本在接种时应注意采用搅拌方式取粘痰脓血部分,分区划线时,适当增加区与区之间的交叉线,并注意接种环的灭菌。6.4 CSF、胸腹水

6、、胆汁、腹透液等体液标本在接种时用接种环取二满环接种血平板,必要时用无菌试管离心后取沉淀接种。对于澄清的体液标本分区划线时可连续划线而不必灭菌接种环。6.5 尿液标本接种前一定要充分混匀,接种时注意定量接种环或加样器吸头中不要有标本遗留,划线时要快。整个接种过程不能灭菌接种环。6.6 带粘液脓血的大便标本在棋盘划线时应注意划每组线前灭菌接种环。6.7 骨伤科标本疑为气性坏疽时,标本的接种方法见厌氧菌标准操作规程中焦性没食酸法。6.8 阴道分泌物、尿道分泌物、尿液标本、眼分泌物等要求做淋球菌培养时,需事先将血平板和不含万古霉素的巧克力平板在37孵箱中预温30min后再接种。6.9 标本接种完毕后应尽快放入相应环境中培养。参考文献1 周庭银编著临床微生物学诊断与图解第二版上海:上海科学技术出版社,20072 叶应妩,王毓三,申子瑜主编全国临床检验操作规程第三版南京:东南大学出版社,2006编写人签名复审人签名审批人签名生效日期姓 名:XX编写日期:2011-05姓 名:XXX复审日期:2011-06姓 名:XXX批准日期:2011-062011-07

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