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1、考试说明“镜检技能测试”部分试题中随机抽取1道必考。本项测试比赛时间15分钟，满分50分。参赛选手需提前5分钟进场，到指定位置准备比赛。5分钟后比赛正式开始，期间选手可穿戴实验服、整理实验台面、阅读考卷、并填写原始记录单，但不能开始正式操作。违者取消比赛资格。赛会现场将按准备通知单上所列项目提供实验器材。比赛正式开始后，参赛选手在所提供的实验器材范围内，依据考卷要求，任选器材、自由实验。每名选手须单独操作，选手间不得交流，更不能代替操作。违者取消比赛资格。如有实验器材问题，可举手向赛场主裁提出。计时至实验台清洁完毕止。学生须在规定时间内完成操作，每超时1分钟扣1分，超时5分钟，停止操作，评分也
2、相应截止。提前结束不加分，但在总分相同时排名优先。除参赛选手、裁判、赛场志愿者外，其余人员不得到赛场或赛场附近走动、大声喧哗等影响考核效果或干扰参赛选手操作。违者将严肃处理。首届全国生物技术技能大赛“微生物发酵组”基础技能测试考卷第一部分：镜检技能测试（一）革兰染色技术比赛时间：15分钟 满分：50分 一、操作内容现有两支斜面微生物样品，由于标签破损，无法区分，只知道是大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌中的一种。请在不污染样品的前提下进行革兰染色鉴定，区分样品种类。二、操作要求1、无菌操作正确合理，样品无污染；2、菌涂片的制作正确，操作规范； 3、革兰染色步骤正确无误；4、正确使用显微镜观察染色结果；
3、5、显微镜下观察到染色结果后，立即举手提交裁判员观察，要求：视野均匀，明暗合适，对比度合适，染色结果正确清晰；6、染色报告（原始记录单）简明准确；7、操作完毕整理台面。提示：提供的实验器材可以不选用。准备通知单、试剂与材料准备序号名称规格数量备注1金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌斜面培养物支各1 无标注2无菌生理盐水瓶13结晶紫染液瓶14番红染液瓶1595%乙醇瓶16碘液瓶17香柏油瓶18二甲苯瓶19擦镜纸包110滤纸包111吸水纸卷112酒精棉球瓶1、工具、设备准备序号名称规格数量备注1普通光学显微镜台12酒精灯台13载玻片片24接种环支15打火机个16镊子支17记号笔支181000mL烧杯支19
4、洗瓶支1蒸馏水10玻璃棒支2基础技能测试原始记录单（参赛考生用）项目：比赛场次：座位号：记录人： 日期： 微生物发酵组基础技能测试评分表项目：革兰染色技术比赛场次：座位号：序号操作项目操作内容分值分项分值评分要点评分得分备注1准备1. 实验着装331. 着工作服顺序正确，仪容整洁2. 整理实验台面2. 各种实验器材、试剂摆放有序合理3. 检查、清洁载玻片3. 操作动作到位2灭菌1. 以酒精棉球擦拭手331. 操作动作到位2. 擦拭实验台面2. 操作动作到位、擦拭范围合理3. 擦拭菌种试管管口3. 操作动作到位3制片1. 滴加无菌生理盐水1111. 手法正确，液滴大小合适2. 点燃、熄灭酒精灯1
5、2. 火焰适宜，熄灭及时3. 灼烧接种环23. 操作动作到位4. 接种环冷却并取一环菌种4. 无菌操作动作到位5. 涂片并合理稀释15. 涂片薄且均匀，操作动作到位6. 灼烧多余菌液16. 接种环灼烧红7. 干燥27. 操作动作到位8. 固定8. 操作动作到位，无过度加热9. 操作熟练度及整理印象30 1 2 34染色1. 初染911. 操作动作到位2. 媒染12. 操作动作到位3. 脱色13. 操作动作到位4. 复染14. 操作动作到位5. 干燥15. 操作动作到位6. 水洗16. 操作动作到位7. 操作熟练度及整理印象30 1 2 36镜检1. 显微镜的安置1421. 显微镜取、放方法正确
6、2. 载玻片的放置2. 正确使用标本夹和移动器3. 显微镜观察操作23. 显微镜使用正确，得到清晰物象4. 染色结果观察54. 染色结果明显5. 显微镜的维护25. 显微镜清理动作到位6. 操作熟练度及整理印象30 1 2 35实验报告1. 原始记录631. 记录完整、清晰2. 检验报告32. 报告结果正确、简洁、规范6文明操作1. 有无器皿的破损421. 无损坏2. 操作结束后整理现场22. 废液处理、清理操作台面7操作时间起： 止：用时：15分钟内完成。每超出1分钟扣1分。总分50裁判员签字：裁判长签字：备注：1、评分过程中，裁判员只需在评分项对应处划“”号或“”号：满足所有评分点要求划“”号，反之划“”号。“操作熟练度及整理印象”评分点在相应分值处划“”号。2、评分结束后在得分对应处填上各操作项目得分值，除去超时扣分后即为该名参赛选手总分。
