河北省邢台市2017届高三生物二轮复习基因工程二选修3

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1、基因工程(二)1.纤维素分子不能进入酵母细胞,为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,构建了含3种不同基因片段的重组质粒,下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。据图回答:(1)本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶,其识别序列如下图,为防止酶切片段的自身环接,可选用的限制酶组合是_或_(2) 设置菌株为对照,是为了验证_不携带纤维素酶基因。(3) 纤维素酶基因的表达包括_和_过程,与菌株相比,在菌株、中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有_。(4)在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株、,菌株_不能存活,原因是_。(5)酵母菌生产酒精的细胞部位是_,产生酒精时细胞的

2、呼吸方式是_,在利用纤维素生产酒精时,菌株更具有优势,因为导入的中重组质粒含有_。使分泌的纤维素酶固定于细胞壁,减少因培养液更新而造成的酶的流失,提高酶的利用率。2.胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白 A、B分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题: (1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 _ 。 (2)图1中启动子是 _ 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 _ 。 (3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 _

3、。 (4)-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于 _ 。 (5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为 _ 。 (6)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是 _ ,理由是 _ 。 3.将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中Ti质拉上只有TDNA片段能转移到植物细胞中)。(1)过程需用同种酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程获得的含重组质

4、粒的农杆菌筛选出来,应使用培养基。(2)过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是_。(3)若过程仅获得大量的根,则应在培养基中增加_以获得芽;部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是_。(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是_。种植转基因抗虫棉能减少的使用,以减轻环境污染。4. 生物选修3:现代生物科技专题(15分)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题:(1)理论上,基因组文库含有生物的 基因;而cDN

5、A文库中含有生物的 基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中 出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物 的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的 _,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的 是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时,则可推测该耐旱基因整合到了 (填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。5.(12分)嗜热土壤芽胞杆菌产生的-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为

6、使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:.利用大肠杆菌表达BglB酶(1)PCR扩增bglB基因时,选用_基因组DNA作模板。(2)右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为_。.温度对BglB酶活性的影响(4) 据图1、2可知,80保温30分钟后,BglB酶会 ;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在 (单选)。A.50 B.60 C.70 D.80.利用分子育种技

7、术提高BglB酶的热稳定性。在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。(5) 与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中 (多选)。A. 仅针对bglB基因进行诱变 B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变基因工程(二)1.【答案】(1)B (或C) C (或B) (2)质粒DNA和酵母菌基因组(3) 转录 翻译 内质网、高尔基体 II 缺少信号肽编码序列,合成的纤维素酶

8、不能分泌到胞外,细胞无可利用的碳源(5)细胞质基质 无氧呼吸 A基因片段2. (1)终止子 (2)RNA 聚合 作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来(3)限制酶和 DNA 连接酶 (4)防止胰岛素的 A、B 链被菌体内蛋白酶降解(5)-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸,而胰岛素 A、B 链中不含甲硫氨酸(6)至少2 个 两条肽链的一端各有一个游离的氨基,氨基酸 R 基团中可能还含有游离的氨基3.答案:(1)限制选择(2)TDNA片段筛选出含目的基因的受体细胞(3)细胞分裂素部分细胞也能产生生长素(4)接种害虫农药4.【答案】(1)全部 部分(2)筛选(3)乙 表达产物 耐旱性(4)同源染色体的一条上5.【答案】(1)嗜热土壤芽孢杆菌(2)Nde BamH(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶(4)失活 B(5)A、C1

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