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1、水电医院 ABO 血型鉴定1. 目的: 保证 ABO血型检验结果的准确、可靠。2. 测定原理: 根据红细胞上有或无A 抗原或 / 和 B 抗原,将血型分为A 型AB型及 O型 4 种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定AB所谓正定型,是用已知抗-A 和抗 -B 分型血清来测定红细胞上有无相应的或 / 和 B 抗原;所谓反定型,是用已知A 细胞和 B 细胞来测定血清中有无抗 -A或 /和抗-B 。3.操作步骤3.1. 试管法( 1)取洁净小试管 ( 内径 10mm 60mm)3支,分别标明抗 -A、抗 -B 和用滴管分别加抗 -A 、抗 -B 和抗 -A+B 分型血清各 l 滴(约 5
2、0 l )于试管再以滴管分别加入受检者 5红细胞盐水悬液 1 滴,混和。( 2)另取洁净小试管 ( 内径 10mm 60mm)3支,分别标明 A、B 和 O细滴管分别加入受检者血清 l 滴于试管底部, 再分别以滴管加入 A、B 和 O 剂红细胞悬液 l 滴,混和。( 3)立即以 1000r/min 离心 3 min 。( 4)将试管轻轻摇动, 使沉于管底的红细胞浮起, 先以内眼观察有无溶血 ) 现象。如内眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查( 5)观察结果时既要看有无凝集, 更要注意凝集强度, 此有助于 A、类 B 或 cisAB 的发现。( 6)凝集强度判断标准4+红细胞凝集成一
3、大块,血清清晰透明。3+红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。2+红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。1+肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞。镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细胞。MF混合凝集外观 (mixedfield)是指镜下可见少数红细胞凝集,而数红细胞仍呈分散分布。表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。3.2 玻片法( 1)取清洁玻片 1 张( 或白瓷板 1 块 ) ,用蜡笔划成方格,标明抗 - 和抗 -A+B,分别用滴管滴加抗 -A 、抗 -B 和抗 -A+B 分型血清 l 滴于标明的再各加受检者 2红细胞悬液 1 滴,混和。( 2) 另取洁净玻片一张( 或白瓷板1 块 ) ,用蜡笔划成方格,标明B细胞和 O 细胞,用滴管各加受检者血清1 滴,再分别用滴管滴加A型试剂红细胞悬液1 滴。( 3) 将玻片 ( 或白瓷板 ) 不断轻轻转动, 使血清与细胞充分混匀, 连min,先以肉眼观察有无凝集 ( 或溶血 ) 反应;再在低倍镜下观察结果。4. 结果判定分型血清 +受检者红细胞受检者血型受检者血清 +试剂红细抗 -A抗 -B抗 -A+BA 细胞B细胞O+A+B+O+AB注: +为凝集;为不凝集。