免疫组化流程

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1、石蜡切片脱蜡至水,微波炉抗原热修复3%H2O2,温室10min内灭活内源性酶 正常山羊血清封闭兔抗人Myf5多克隆抗体(1:600),兔抗人TGF-B1多克隆抗体(1:400) ,4C孵育过夜 一一 一- 丿生物素标记羊抗兔IgG链酶卵白素工作液DAB显色,室温,镜下控制显色时间,复染脱水,透明,封片*10%甲醛液固定蜡块包埋石蜡切片脱蜡至水,微液炉抗原熱修复 3%出0厂温室10min内灭活内源性酶正常山羊血清封闭兔抗人Myf5克隆抗休(1:600),兔抗人TGF-P1 克隆抗体(1:400) ,4匚務肓过夜生物素标记羊抗兔IgG链酶卵白素工作液DAB显色,室温,镜下控制显色时间,复染脱水,透

2、明,封片制作外斜视猫模型,经外源性IGF-I干预后,采用免疫组织化学法观察组别nMyf5 平均光密度值%2P实验A1组333.340017.1565无菌水对照B1组321.30397.43894.6460.098空白对照C1组318.94686.5863|实验A2组339.237515.2508无菌水对照 B2 组319.43064.753121.8640.000空白对照C2组317.99657.2897实验A3组347.701719.3943无菌水对照 B3 组34.82092.664531.8140.000空白对照C3组35.8640土 2.6160组别nTGF- B 1 平均光密度值%2

3、P实验A1组30.79550.1182无菌水对照B1组31.9080 0234130.8010.000空白对照C1组32.00670.3132|实验A2组30.5291 0.0902无菌水对照B2组32.29591.026840.2780.000空白对照C2组32.62051.1112实验A3组30.4164 0.0841无菌水对照 B3 组31.81980.716535.1770.000空白对照C3组31.82620.6700组别nTGF- B 1 平均光密度值咒2 (F)P实验Al组30.79550.1182实验 A2 组30.5291 0.090272.863a0.000实验A3组30.

4、4164 0.0841无菌水对照B1组31.9080 0.2341无菌水对照 B2 组32.29591.02682.209b0.331无菌水对照B3组31.8198 0.7165空白对照C1组32.00670.3132空白对照 C2 组32.62051.11124.202b0.122空白对照C3组31.8262 0.6700a表示咒2, b表示F组别nMyf5平均光密度值咒 2 (F)P实验A1组333.340017.1565实验 A2 组339.237515.25083.114a0.049实验A3组347.7017+19.3943无菌水对照B1组321.30397.4389无菌水对照B2组3

5、19.43064.753131.814b0.000无菌水对照B3组34.8209 + 2.6645空白对照C1组318.94686.5863空白对照C2组317.99657.289717.964b0.000空白对照C3组35.8640 + 2.6160a表示咒2, b表示F组别nMyf5平均光密度值X2 (F)P实验A1组333.340017.1565实验 A2 组339.237515.25083.114a0.049实验A3组347.701719.3943无菌水对照 B1 组321.30397.4389无菌水对照B2组319.4306 4.753131.814b0.000无菌水对照B3组34.

6、8209 2.6645空白对照 C1 组318.9468 6.5863空白对照C2组317.99657.289717.964b0.000空白对照C3组35.8640 2.6160a表示咒2, b表示F组别nTGF- P1平均光密度值咒2P实验A1组30.7955 土0.1182无菌水对照B1组31.90800.234130.8010.000空白对照C1组32.0067 土 0.3132实验 A2 组30.52910.0902无菌水对照 B2 组32.29591.026840.2780.000空白对照C2组32.6205 1.1112实验A3组30.4164 0.0841无菌水对照 B3 组31

7、.81980.716535.1770.000空白对照C3组31.8262 0.6700健康幼猫黔只4-6周龄 雌雄不限体重400克左右 常规检查排除外眼、屈光直1组W周组)实验组加只)H也2组“周组)酮组(空周组)H B1组(4周组)无菌水对黑组佃只)LTB2组佃周组)厂0蹈组(12周组):C1组W周组)L+空白对黑组(9只)1TC2组佃周组)C3组(12周组)湖北孝感市泰维电子设备有限公司 天津市尖圣医疗电子仪器有限公司 中国上海仪器厂孝感市宏业医用仪器有限公司 青岛微澜品有限公司 中国山东浅坊医疗器械厂 青岛海尔公司(组织脱水机(TC-120S)冷台(JLTA型)石蜡切片机(RM2125)

8、摊片烤片机(CS-V1)微波炉(HR7752T)电热恒温培养箱(WMK-08) 冰箱(-20C和4C) 高清度彩色病理图文分析系统 Simple PCI图像分析软件湖北孝感市泰维电子设备有限公司、天津市久圣医疗电子仪器有限公司 中国上海仪器厂孝感市宏业医用仪器有限公司青岛微波制品有限公司中国山东潍坊医疗器械厂青岛海尔公司日本Olimpus公司美国 C-imaging组织脱水机(TC-120S型)冷台(JLT-A型) 石蜡切片机(尺昵也弓) 摊片烤片机(CSVI型) 微液炉(HR7752T) 电熱恒温培养箱(WMK8型) 冰箱(2012!和4匸)高清度彩色痈SHPIAS-1000Simple PCI團像分析软件日本Olimpu与公司 美国C-imaging公司

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