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1、保健食品中原花青素含量的测定方法2009-10-09 00:00:00 北京中卫绿源健康技术发展有限公司1、原理原花青素易溶于含羟基的溶剂如甲醇等，本方法是将样品中的前花青素，用甲醇提取， 加入盐酸家温水解后将其转化为深红色氤定(C15H10O6HCL)后进行高压液向色谱 测定。2、试剂:2.1二氯甲烷分析纯2.2甲醇色谱纯2.3异丙醇分析纯2.4甲酸分析纯2.5盐酸分析纯3、检验方法3.1样品称取约500mg油溶性样品于100ml锥形瓶中，加入5.0ml二氯甲烷，振摇使 其溶解。加入45.0ml甲醇，振摇5min后过20pm滤膜。取5.0ml滤液于25ml容量瓶 中，加入5.0ml3mol/
2、L盐酸，振摇并用异丙醇定容至刻度。立即过5pm滤膜，取出一 部分置于试管中，塞紧瓶塞并在1005C烘箱中放置45min进行水解，取出后放置至 室温后进行液相色谱分析。3.2标准 除称取25.0mg标准品于100ml锥形瓶中外，其余步骤均同样品。3.3定量方法 标准曲线外标法定性定量分析。4、色谱分析条件4.1流动相：水：甲醇：异丙醇：甲酸=73： 13： 6： 84.2检测波长：525nm4.3 色谱柱：岛津 Shim-Pak CLC ODS 15cmx6mm4.4 柱温：35 C4.5 流速：1ml/min原花青素含量测定方法1、原理原花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的聚合物。原花青素本身无
3、色，但经过用热酸处理后，可以生成深 红色的花青素离子。本方法用分光光度法测定原花青素在水解过程中生成的花青素离子。计算试样中原花 青素含量。2、试剂2.1甲醇分析纯2.2正丁醇分析纯2.3盐酸分析纯2.4硫酸铁铵NH4Fe(SO4)212H2O溶液：用浓度2mmol/l盐酸配成2% (w/v)的溶液。2.5原花青素标准品葡萄籽提取物，纯度95%3、仪器3.1分光光度计3.2回流装置4、分析步骤4.1试样的制备4.1.1片剂取20片试样，研磨成粉状。4.1.2胶囊 挤出20粒胶囊内容物，研磨或搅拌均匀，如内容物含油，应将内容物尽可能挤出。4.1.3 口服液摇匀后取样。4.2提取4.2.1粉状试样
4、 称取50-100mg试样置于50ml容量瓶中，加入30ml甲醇，超声处理20min，放冷至室温后， 加甲醇至刻度，摇匀，离心或放置至澄清后取上清液备用。4.2.2含油试样 称取50mg试样置于小烧杯中，用20ml甲醇分数次搅拌，将原花青素洗入50ml容量瓶中， 直至甲醇提取液无色，加甲醇至刻度，摇匀。5.2.3 口服液吸取适量试样(取样量不超过1ml)置于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。4.3测定4.3.1标准曲线称取原花青素标准品10.0mg溶于10ml甲醇中，吸取该溶液0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5ml 置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。各取1ml测定。与试样
5、测定方法相同。4.3.2试样测定 将正丁醇与盐酸按95 : 5的体积比混合后，取出6ml置于具塞锥瓶中，再加入0.2ml硫酸 铁铵溶液和1ml试样溶液，混匀，置沸水浴回流，精确加热40min后，立即置冰水中冷却，在加热完毕15min 后，于546nm波长处测吸光度，由标准曲线计算试样中原花青素的含量。显色在1小时内稳定。5、分析结果表述试样中原花青素测定结果按(1)式计算5.1计算：m1xvx1000X(%)=x100 (1)mx1000x1000式中：X试样中原花青素的百分含量，g/100g；m1反应混合物中原花青素的量，ug；v一待测样液的总体积，ml；m一试样的质量，mg5.2结果表示计算结果保留三位有效数字。6、技术参数相对标准偏差：10%回收率：84.694.4%
